一种脱酚嗜盐菌及其应用
【技术领域】
[0002] 本发明属于生物工程、环境工程技术领域，具体设及一种脱酪嗜盐菌及其应用。
【背景技术】
[0003] 高盐度废水是指含盐质量分数至少1%的废水，运种废水含有多种污染物质，包括 无机盐、有机物、重金属和放射性物质等。无机盐类可维持生物细胞膜平衡、调节渗透压、促 进微生物的酶反应。但是，较高的盐度会破坏生物的代谢功能，降低生物的降解动力，从而 抑制微生物的生长代谢。苯酪常溫下为一种无色晶体，有较强毒性。长期饮用含酪的水可 引起慢性积累性中毒，引起头晕、出疹、痊痒、贫血及各种神经系统症状，酪对皮肤和粘膜有 强烈的腐蚀作用，也可对人的肝脏造成伤害。由于高盐含酪废水对环境及生物活体造成巨 大危害，在我国被列为重点解决的有害废水之一。
[0004] 高盐含酪废水广泛产生于一些行业如炼油、印染、造纸等工业生产工艺流程中。其 数量多，危害大。我国石油储备比较丰富，石油开采作为我国工业主要组成部分之一，排放 的废水一般含有高浓度可溶性无机盐及难降解或有毒的有机物。不仅如此，作为我国国民 经济主要支柱的化工、制药等行业，也产生大量类似成分的工业废水，运类废水的环境影响 是不容忽视的。 阳〇化]目前，对高盐含酪废水中苯酪的处理方法包括物理法、物理化学法及生物法。其 中，物理方法包括利用难溶于水的萃取剂与苯酪结合的萃取法、采用较高比表面积材料的 吸附法、通过阴离子交换树脂回收的离子交换法等；化学方法包括利用强氧化性氧化剂氧 化水中苯酪的化学氧化法、将苯酪形成溶解度更小的醋类物质的化学沉淀法等。但物化法 具有处理规模大、基建投资和运行费用高，易造成水资源的浪费及二次污染的缺点。生物处 理方法利用微生物的新陈代谢作用分解水中的苯酪，具有应用范围广、处理量大、设备简单 等优点，但传统的活性污泥法占地面积大，且苯酪的毒性及高盐度环境导致微生物的生长 受到抑制。自然界中嗜盐菌的存在使微生物在高盐环境下降解有机物成为可能。因此，研 究高效脱酪嗜盐菌的培养及筛选对实际工业废水的处理具有很强的应用价值。
【发明内容】
[0006] 本发明的首要目的在于针对传统活性污泥法中因苯酪的毒性致使微生物生长受 到抑制、且高盐度造成细胞失水等问题，提供一种在高盐环境下稳定存在并高效降解苯酪 的脱酪嗜盐菌。本发明的目的还在于提供所述脱酪嗜盐菌的应用。
[0007] 本发明的目的通过下述技术方案实现： 一种脱酪嗜盐菌为菌株JS4,经真菌ITS鉴定，菌株JS4为德己利氏酵母属 (化化TJO巧rcessp.)。该菌株已于2015年10月13日保藏于中国典型培养物保藏中屯、(地 址：中国.武汉.武汉大学)，其分类命名为化AsiTO巧rcesSP.JS4,保藏编号为CCTCCNO: M2015603。菌株JS4可在苯酪浓度O~1200mg/L范围内、盐度0%~15%范围内、抑值 4. 0~10. 0范围内W苯酪为唯一碳源和能源稳定存在并降解苯酪。菌株JS4在抑6.8~ 7. 2、溫度30°C、盐度5%的条件下，7化内对700mg/L苯酪的去除率超过99%。
[0008] 所述的菌株JS4通过自身氧化分解过程能降解目标有机污染物苯酪，其在好氧条 件下对苯酪具有较强降解能力，可用于含苯酪废水的处理，去除废水中的苯酪。
[0009] 所述的菌株JS4在制备生物脱酪菌剂中的应用。
[0010] 一种生物脱酪菌剂，包含菌株JS4。
[0011] 一种用于筛选高效脱酪嗜盐菌的高盐高酪选择培养基，其配制为：取2.OgKH2PO4、 1. 3g馬册〇4、一定量化C1、0.Ig畑典1、一定量苯酪和1血微量元素液，加蒸馈水至1000血， 调节抑6.8~7. 2，12rC下灭菌20min;其中，微量元素液的配制为：取0.OlgFeCl3'6H2〇、 0. 15g&8〇3、0. 03gC11SO4? 5&0、0. 18gKI、0. 12gMnClz? 4&0、0. 06gNa2Mo〇4? 2&0、0. 12邑 ZnS〇4? 7&0、0. 15gCoClz? 6H2〇、10g邸TA,加蒸馈水至 1000血。
[0012] 本发明具有如下优点和效果： (1)本发明的脱酪嗜盐菌可在盐度0%~15%、pH4. 0~10. 0、苯酪浓度Omg/L~1200mg/L的废水中W苯酪为唯一碳源和能源生长；其对苯酪具有较强降解能力，在适宜生长条件 下，对苯酪的去除率达99%W上。
[0013] (2)本发明的脱酪嗜盐菌对盐度、抑等环境因素适应范围广，抗冲击性强，符合运 行因素变化幅度较大的工业废水的处理对微生物的要求。
[0014] (3)本发明的脱酪嗜盐菌应用于含苯酪废水的处理中，无需另投加碳源，工艺简 单，成本低廉且相对安全，有较强的实用价值。
【附图说明】
[0015] 图1是脱酪嗜盐菌JS4在700mg/L苯酪环境中ODe。。和苯酪浓度随时间的变化曲 线图。
[0016] 图2是脱酪嗜盐菌JS4在不同初始苯酪浓度下培养72h内ODe。。最大值的柱状图。
[0017] 图3是脱酪嗜盐菌JS4在不同抑下培养72h内ODe。。最大值的柱状图。
[0018] 图4是脱酪嗜盐菌JS4在不同盐度下培养72h内ODe。。最大值的柱状图。
【具体实施方式】
[0019] 下面结合具体实施例。进一步阐述本发明，应当理解，W下实施例进一步说明本发 明的内容，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明 方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。
[0020] 下述实施例中所用培养基： 液体高盐高酪选择培养基的配制：取2.OgKH2P〇4、1.3gK2HPO4、一定量化C1、0.Ig NH4CI、一定量苯酪和1血微量元素液，加蒸馈水至1000血，调节抑6.8~7. 2,121°C下灭菌 20min。其中，微量元素液的配制为：取0.OlgFeCl3.6H2〇、0. 15g&8〇3、0. 03gCuS〇4.5H2〇、 0. 18gKI、0. 12gMnClz'AHsCKO. 06g化2M0O4^21120,0. 12gZnS〇4'THsCKO. 15gC0CI2'SHsO、 IOg邸TA,加蒸馈水至1000血。盐度和苯酪的浓度由化Cl和苯酪的加入量决定，如IL培养 基中加入50g化Cl,则高盐高酪选择培养基的盐度为5% ;1L培养基中加入50mg苯酪，则高 盐高酪选择培养基的苯酪浓度为50mg/L。固体高盐高酪选择培养基的配制为在IL所述液 体高盐高酪选择培养基中加入20g琼脂。
[0021] 实施例1脱酪嗜盐菌的筛选和鉴定 (1)W制药厂废水处理系统的硫酸盐活性污泥作为原料，通过用清水反复洗涂1~2d去除污泥本身携带的高浓度硫酸盐。
[0022] (2)第一阶段：取200mL洗涂后的活性污泥加入到盛有IL液体高盐高酪选择培养 基(盐度5%，苯酪浓度50mg/L)的烧杯中，驯化过程每周期持续2地，其中揽拌并曝气23h，沉 淀0. 5h，静置0.化。每周期沉淀后排出500血上清液，并加入500血新鲜的盐度5%的液体 高盐高酪选择培养基，新加入的培养基中苯酪浓度由上一阶段剩余苯酪浓度决定，使每周 期初始苯酪浓度保持50mg/L。第一阶段持续4她，即2个周期，在第2周期结束时，污泥具 有超过90%的苯酪去除率。第一阶段结束后排出SOOmL上清液，加入SOOmL盐度5%、一定苯 酪浓度的液体高盐高酪选择培养基进行第二阶段驯化。
[0023] (3)自第二阶段起各阶段每周期初始苯酪浓度依次为lOOmg/l、200mg/l、300mg/l、 400mg/l、500mg/l，具体操作同第一阶段，各阶段持续7化即3个周期。经检测，该污泥在各 阶段最后一个周期均具有超过90%的苯酪去除率。
[0024] (4)取第六阶段的污泥混合液IOmL加入到盛有IOOmL液体高盐高酪选择培养基 (盐度5%、苯酪浓度700mg/L)的锥形瓶中，随后置于30°C、转速为16化/min的恒溫振荡器上 振荡培养4她。将上清液W10%接种量接种于LB培养基（IOg蛋白腺、5g酵母提取物、IOg 化Cl,加蒸馈水至1000 mL)中富集4她。再将富集菌液W10%接种量接种于盛有