5-甲酸吲哚酮的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于医药技术领域，尤其涉及一种5-甲酸吲哚酮的制备方法。
【背景技术】
[0002]在细胞信号调节网络中起着极为重要的作用，其中MEK是该通路的重要成员，ERK级联反应的激活过程已得到公认。在外界刺激下，Ras蛋白在细胞膜富集而活化，Raf蛋白被活化的Ras磷酸化激活，此后其C端催化区与MEK1/2结合，进一步使MEK1/2磷酸化而激活。MEK1/2具有双重特异性，使ERK蛋白活性位点的苏氨酸和酪氨酸两个调节位点磷酸化而激活。活化的ERK转移到胞核而磷酸化转录因子、细胞骨架相关蛋白、酶类等多种底物来调节相关基因表达，进而参与细胞生长、发育、分裂、迁移、代谢、凋亡等多种生理过程。因此，基于MEK的药物发现已成为抗肿瘤药物研究领域中的热点所在。
[0003]在天然产物中，也发现有一些5-甲酸吲哚酮结构，并表现出抗菌，细胞毒等多方面显著的生理活性。近来，围绕5-甲酸吲哚酮是药物设计研究，同时，5-甲酸吲哚酮也是合成配体及聚合物的重要前体物质，可与多种金属离子配位，形成多种结构复杂、功能各异的金属-有机聚合。正因为5-甲酸吲哚酮显著的生理活性及重要的合成用途，对该类化合物的合成方法有较多的研究，最近，新的多取代的5-甲酸吲哚酮的合成也有报道。
[0004]但是5-甲酸吲哚酮的制备方法比较复杂，操作过程复杂。
【发明内容】
[0005]本发明就是针对上述问题，提供一种操作简单，环境友好的一种5-甲酸吲哚酮的制备方法。
[0006]为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案。
[0007]甲酸吲哚酮的制备方法，包括下步骤。
[0008](1)在装有滴液漏斗及温度计的250mL三颈瓶中加入9.0g的三氯乙醛和120mL水，搅拌均勻后，依次加入65g无水硫酸钠,6.9g对氨基苯甲酸和4.3mL浓盐酸与30mL水配成的溶液，得到白色絮状物。滴加10.8g盐酸羟胺和50mL水配成的溶液，渐渐加热至60-70T,反应2h，趁热过滤得到浅黄色沉淀，过滤，水洗，干燥，得浅黄色固体对羧基异70亚硝基乙酰苯胺14.8g，收率>100% ;直接进行下一步反应；
(2)将32.6mL浓硫酸加入250mL三颈瓶中，加热至50°C，搅拌下分批加入9.2g化合物2，加人速度以控制温度60-70°C为宜，加入完毕后升温至80oC，反应20min后冷却至室温，搅拌下缓慢倾人100g碎冰中，冰浴静置lh，抽滤，水洗多次至中性，得到棕色沉淀5-甲酸靛红，直接进行下一步反应；
(3)将化合物3加入500mL的三颈瓶中，加入80%的水合肼25mL，再加入25mL7jC，加热至140°C反应6h，以TLC跟踪反应至终点；冷却至室温，加入浓盐酸至pH〈3，50°C搅拌12h，过滤，水洗得到淡黄色固体5-甲酸-吲哚-2-酮，mp:>300°Co
[0009]进一步地，在100ml烧瓶中，将二乙醇胺10g溶于氯仿40ml中，室温下缓慢滴加二氯亚砜2.6ml的氯仿20ml溶液；反应7h，反应完全，旋干，补加氯仿，再旋干，将二氯亚砜尽可能的蒸干；干燥，得到14g白色固体9，收率85%。
[0010]在进一步地，将1.58g、10mmol、17与lmol苯胺衍生物16加入到10ml正丁醇中，180°C下微波反应，反应30min ;反应结束后静置，冷却析晶；过滤用少量二氯甲烷洗滤饼，真空干燥得白色晶体。
[0011]本发明有益效果:
本发明公开了一种操作简单，环境友好的一种苯并噁咗衍生物的制备方法。采用拼合原理和药效团结合法，以吲哚酮环为母核，设计合成了两类3，5- 二取代吲哚酮衍生物。完成了目标化合物的结构确证，采用MTT法首次检测了目标化合物对A549细胞的抑制活性。从结果可知，均具有较好的抑制活性，尤以化合物6e的抑制活性最好IC50=3.0 μ Μ。表明，化合物6e在100 μ Μ浓度是210对ERK磷酸化的抑制作用与AZD-6244相当。且制备过程操作简单，对环境友好。
[0012]为了使本发明所解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下【具体实施方式】，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的【具体实施方式】仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
【具体实施方式】
[0013]甲酸吲哚酮的制备方法，包括下步骤。
[0014](1)在装有滴液漏斗及温度计的250mL三颈瓶中加入9.0g的三氯乙醛和120mL水，搅拌均勻后，依次加入65g无水硫酸钠,6.9g对氨基苯甲酸和4.3mL浓盐酸与30mL水配成的溶液，得到白色絮状物。滴加10.8g盐酸羟胺和50mL水配成的溶液，渐渐加热至60-70T,反应2h，趁热过滤得到浅黄色沉淀，过滤，水洗，干燥，得浅黄色固体对羧基异70亚硝基乙酰苯胺14.8g，收率>100% ;直接进行下一步反应；
(2)将32.6mL浓硫酸加入250mL三颈瓶中，加热至50°C，搅拌下分批加入9.2g化合物2，加人速度以控制温度60-70°C为宜，加入完毕后升温至80°C，反应20min后冷却至室温，搅拌下缓慢倾人100g碎冰中，冰浴静置lh，抽滤，水洗多次至中性，得到棕色沉淀5-甲酸靛红，直接进行下一步反应；
(3)将化合物3加入500mL的三颈瓶中，加入80%的水合肼25mL，再加入25mL水，加热至140°C反应6h，以TLC跟踪反应至终点；冷却至室温，加入浓盐酸至pH〈3，50°C搅拌12h，过滤.水洗得到淡黄色固体5-甲酸-吲哚-2-酮，mp:>300°Co
[0015]在100ml烧瓶中，将二乙醇胺10g溶于氯仿40ml中，室温下缓慢滴加二氯亚砜
2.6ml的氯仿20ml溶液；反应7h，反应完全，旋干，补加氯仿，再旋干，将二氯亚砜尽可能的蒸干；干燥，得到14g白色固体9，收率85%。
[0016]将1.58g、lOmmol、17与lmol苯胺衍生物16加入到10ml正丁醇中，180°C下微波反应，反应30min ;反应结束后静置，冷却析晶；过滤用少量二氯甲烷洗滤饼，真空干燥得白色晶体。
[0017]细胞培养方法:A549细胞采用常规培养，实验时均用对数生长期细胞。细胞生长检测方法(MTT)法:取对数生长期的细胞制成5 X 104个/mL细胞悬液，接种于96孔板中，每孔100 μ L，置5%C02、37°C恒温培养箱中培养过夜后，换用含不同药物浓度梯度的培养液，每孔100 μ L，继续培养72h，加入5mg/mL的MTT (30 μ L/孔)，恒温培养箱中孵育4h。弃培养液，加入DMSO (100 μ L/孔)，振摇10s后，用酶标仪在570nm波长下检测吸光值，并计算抑制率。
【主权项】
1.5-甲酸吲哚酮的制备方法，其特征在于，包括下步骤: (1)在装有滴液漏斗及温度计的250mL三颈瓶中加入9.0g的三氯乙醛和120mL水，搅拌均勻后，依次加入65g无水硫酸钠,6.9g对氨基苯甲酸和4.3mL浓盐酸与30mL水配成的溶液，得到白色絮状物；滴加10.8g盐酸羟胺和50mL水配成的溶液，渐渐加热至60_70°C，反应2h，趁热过滤得到浅黄色沉淀，过滤，水洗，干燥，得浅黄色固体对羧基异70亚硝基乙酰苯胺14.8g，收率>100% ;直接进行下一步反应； (2)将32.6mL浓硫酸加入250mL三颈瓶中，加热至50°C，搅拌下分批加入9.2g化合物2，加人速度以控制温度60-70°C为宜，加入完毕后升温至80°C，反应20min后冷却至室温，搅拌下缓慢倾人100g碎冰中，冰浴静置lh，抽滤，水洗多次至中性，得到棕色沉淀5-甲酸靛红，直接进行下一步反应； (3)将化合物3加入500mL的三颈瓶中，加入80%的水合肼25mL，再加入25mL水，加热至140°C反应6h，以TLC跟踪反应至终点；冷却至室温，加入浓盐酸至pH〈3，50°C搅拌12h，过滤，水洗得到淡黄色固体5-甲酸-吲哚-2-酮，mp:>300°Co 2.根据权利要求1所述5-甲酸吲哚酮的制备方法，其特征在于:在100ml烧瓶中，将二乙醇胺10g溶于氯仿40ml中，室温下缓慢滴加二氯亚砜2.6ml的氯仿20ml溶液；反应7h,反应完全，旋干，补加氯仿，再旋干，将二氯亚砜尽可能的蒸干；干燥，得到14g白色固体9，收率85%。3.根据权利要求1所述5-甲酸吲哚酮的制备方法，其特征在于:将1.58g、10mmol、17与lmol苯胺衍生物16加入到10ml正丁醇中，180°C下微波反应，反应30min ;反应结束后静置，冷却析晶；过滤用少量二氯甲烷洗滤饼，真空干燥得白色晶体。
【专利摘要】<b>5-</b><b>甲酸吲哚酮的制备方法属于医药技术领域，尤其涉及一种</b><b>5-</b><b>甲酸吲哚酮的制备方法。本发明提供一种操作简单，环境友好的一种</b><b>5-</b><b>甲酸吲哚酮的制备方法。</b><b>5-</b><b>甲酸吲哚酮的制备方法，包括下步骤。（</b><b>1</b><b>）在装有滴液漏斗及温度计的</b><b>250mL</b><b>三颈瓶中加入</b><b>9.0g</b><b>的三氯乙醛和</b><b>120mL</b><b>水，搅拌均匀后，依次加入</b><b>65g</b><b>无水硫酸钠；（</b><b>2</b><b>）将</b><b>32.6mL</b><b>浓硫酸加入</b><b>250mL</b><b>三颈瓶中，加热至</b><b>50oC</b><b>，搅拌下分批加入</b><b>9.2g</b><b>化合物</b><b>2</b><b>，加人速度以控制温度</b><b>60-70oC</b><b>为宜；（</b><b>3</b><b>）将化合物</b><b>3</b><b>加入</b><b>500mL</b><b>的三颈瓶中，加入</b><b>80%</b><b>的水合肼</b><b>25mL</b><b>，再加入</b><b>25mL</b><b>水，以</b><b>TLC</b><b>跟踪反应至终点；冷却至室温，加入浓盐酸至</b><b>pH<3</b><b>，</b><b>50oC</b><b>搅拌</b><b>12h</b><b>，过滤，水洗得到淡黄色固体</b><b>5-</b><b>甲酸</b><b>-</b><b>吲哚</b><b>-2-</b><b>酮，</b><b>mp:>300oC</b><b>。</b>
【IPC分类】C07D209/34
【公开号】CN105272901
【申请号】CN201410358300
【发明人】牛誉博
【申请人】牛誉博
【公开日】2016年1月27日
【申请日】2014年7月25日