一种吲哚美辛的药物组合物及其医药用图
【专利摘要】本发明公开了一种吲哚美辛的药物组合物及其医药用途，本发明提供的吲哚美辛的药物组合物中含有吲哚美辛和一种结构新颖的天然产物化合物(Ⅰ)，吲哚美辛、化合物(Ⅰ)单独作用时，对变应性鼻炎具有治疗作用；吲哚美辛和化合物(Ⅰ)联合作用时，对变应性鼻炎的治疗效果进一步提高，可以开发成治疗变应性鼻炎的药物，与现有技术相比具有突出的实质性特点和显著的进步。
【专利说明】
一种吲哚美辛的药物组合物及其医药用途
技术领域
[0001] 本发明属于生物医药领域，涉及吲哚美辛的新用途，具体涉及一种吲哚美辛的药 物组合物及其医药用途。
【背景技术】
[0002] 吲哚美辛适用于解热、缓解炎性疼痛作用明显，故可用于急、慢性风湿性关节炎、 痛风性关节炎及癌性疼痛(西药类癌痛药）；也可用于滑囊炎、腱鞘炎及关节囊炎等;能抗血 小板聚集，故可防止血栓形成，但疗效不如乙酰水杨酸;治疗Behcet综合征，退热效果好；用 于Batter综合征，疗效尤为显著；用于胆绞痛、输尿管结石引起的绞痛有效;对偏头痛也有 一定疗效，也可用于月经痛。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于提供一种吲哚美辛的药物组合物，该药物组合物中含有吲哚美 辛和一种天然产物，吲哚美辛和该天然产物可以协同治疗变应性鼻炎。
[0004] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0005] 一种具有下述结构式的化合物（I)，
[0007] -种吲哚美辛的药物组合物，包括吲哚美辛、如权利要求1所述的化合物（I)和药 学上可以接受的载体，制备成需要的剂型。
[0008] 进一步地，药学上可以接受的载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、 崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体或润滑剂。
[0009] 进一步地，所述剂型包括片剂、胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、 膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、喷雾剂、滴剂或贴剂。
[0010] 上述化合物（I)的制备方法，包含以下操作步骤：（a)将重楼粉碎，用75~85%乙醇 热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取， 分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a)中正丁醇萃取物用 大孔树脂除杂，先用10 %乙醇洗脱8个柱体积，再用70 %乙醇洗脱10个柱体积，收集70 %洗 脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中70%乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分 离，依次用体积比为60:1、30:1、15:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；（d)步 骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为8:1、4:1和2:1的二氯甲烷-甲醇梯 度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百 分浓度为75 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集10~15个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到 化合物(I)。
[0011] 进一步地，化合物（I)的制备方法中，步骤(a)用80%乙醇热回流提取，合并提取 液。
[0012] 进一步地，化合物（I)的制备方法中，所述大孔树脂为D101型大孔吸附树脂。
[0013]进一步地，化合物（I)的制备方法中，步骤(a)中用二氯甲烷代替乙酸乙酯进行萃 取，得到二氯甲烷萃取物。
[0014] 上述化合物(I)在制备治疗变应性鼻炎的药物中的应用。
[0015] 上述吲哚美辛的药物组合物在制备治疗变应性鼻炎的药物中的应用。
[0016] 本发明的优点：
[0017] 本发明提供的吲哚美辛的药物组合物中含有吲哚美辛和一种结构新颖的天然产 物，吲哚美辛、化合物（I)单独作用时，对变应性鼻炎具有治疗作用；吲哚美辛和化合物（I) 联合作用时，对变应性鼻炎的治疗效果进一步提高，可以开发成治疗变应性鼻炎的药物。本 发明与现有技术相比具有突出的实质性特点和显著的进步。
【具体实施方式】
[0018] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0019] 实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0020] 试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0021]分离方法：（a)将重楼（2kg)粉碎，用80%乙醇热回流提取（15LX3次），合并提取 液，浓缩至无醇味（3L)，依次用石油醚（3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次）和水饱和的正丁醇 (3LX3次）萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a)中 正丁醇萃取物用D101型大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个柱体积，再用70%乙醇洗脱10 个柱体积，收集70%洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中70%乙醇洗脱 浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为60:1 (10个柱体积）、30:1 (8个柱体积）、15:1 (10个 柱体积)和5:1(8个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；（d)步骤(c)中组分4用 正相硅胶进一步分离，依次用体积比为8:1 (10个柱体积）、4:1 (8个柱体积)和2:1 (6个柱体 积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反 相硅胶分离，用体积百分浓度为75 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集10~15个柱体积洗脱液， 洗脱液减压浓缩得到化合物(I)(纯度大于98% )。
[0022] 结构确证:册431-]\^显示[]\?1]+为111/2 469.3630，结合核磁特征可得分子式为 C31H48〇3，不饱和度为8。核磁共振氢谱数据δΗ(ppm，CDC13，600MHz): H-1 (1 · 49，m)，H-1 (2 · 91， ddd，J=13.3,7.0,4.2Hz)，H-2(2.41，ddd，J=15.4,6.8,4.2Hz)，H-2(2.65，ddd，J=15.4， 11.2,7.0Hz)，H-5(1.34，d，J=11.2Hz)，H-6(1.48，m)，H-6(1.63，m)，H-7(1.68，m)，H-7 (1.87，m)，H-9(1.64，d，J = 8.4Hz)，H-ll(4.27，d，J = 8.8,3.3Hz)，H-12(5.28，d，J = 3.3Hz)，H-16(2.43，d，J=13.1Hz)，H-16(2.21，d，J = 13.1Hz)，H-18(2.46，d，J = 8.4Hz)，H-19(1.41，m)，H-20(1.10，m)，H-21(1.28，m)，H-21(1.48，m)，H-22(1.36，m)，H-22(1.51，m)， H-23(1.02，s)，H-24(0.82，s)，H-25(1.19，s)，H-26(1.22，s)，H-27(1.36，s)，H-28(0.87， s)，H-29(0.85，d，J = 6.3Hz)，H-30(0.93，d，J = 6.1Hz)，ll-0Me(3.28，s);核磁共振碳谱数 据Sc(ppm，CDCl3,125MHz ):39.2(CH2，1-C)，34.3(CH2,2-C)，215.6(C，3-C)，47.5(C，4-C)， 55.2(CH，5-C)，19.7(CH2,6-C)，38.9(CH2,7-C)，51.8(C，8-C)，52.9(CH，9-C)，27.2(C，10-C)，76.2(CH，n-C)，126.3(CH，12-C)，137.2(C，13-C)，65.6(C，14-C)，209.4(C，15-C)，54.3 (CH2，16-C)，53.4(C，17-C)，48.0(CH，18-C)，39.9(CH，19-C)，40.5(CH，20-C)，30.8(CH2,21-C)，38.8(CH2,22-C)，26.6(CH3,23-C)，15.7(CH3,24-C)，13.7(CH3,25-C)，19.7(CH 3,26-C)， 14.3(CH3,27-C)，19.3(CH3,28-C)，17.2(CH3,29-C)，20.4(CH 3,30-C)，54.9(CH，ll-0Me)。红 外波谱表明该化合物含有羰基（1760(^1)，双键(1663(^ 1)和偕二甲基（1380(^1)基团。13C-NMR、DEPT和HSQC谱中显示有31个碳信号，包括九个甲基(一个甲氧基），七个亚甲基，七个次 甲基(一个连氧碳和一个烯烃碳），以及八个季碳(两个羰基，一个烯属季碳），以上功能结构 再结合不饱和数表明该化合物为五环三萜结构。h-NMR谱结合HSQC谱显示的六个单峰甲基 质子信号 δΗ 1.02(3H，s)，0.82(3H，s)，1.19(3H，s)，1.22(3H，s)，1.36(3H，sWP0.87(3H， 8)，两个双峰甲基质子信号6 11〇.85(3!1，(1，1 = 6.3抱），0.93(3!1，(1，1 = 6.1抱）以及1!1-匪1?数 据表明该化合物为乌苏烷型三萜类化合物。通过HMBC谱中单烯烃质子信号δ Η 5.28(lH，d，J =3.3抱，!1-12)与(：-12的相关信号以及(：-12与(：-13的碳化学位移可以确认(：-12与(：-13形成 双键结构。HMBC谱中H 3-23和H3-24与C-3，H2-16和H3-27与C-15的相关性以及它们的碳化学 位移表明C-3和C-15位为酮基。此外，HMBC谱中ΙΙ-OMe与C-11的相关信号以及碳化学位移确 认甲氧基连在C-11位。综合氢谱、碳谱、HMBC谱和NOESY谱，以及文献关于相关类型核磁数 据，可基本确定该化合物如下所示，立体构型进一步通过EO)试验确定，理论值与实验值基 本一致。
[0023]该化合物化学式及碳原子编号如下：
[0025] 实施例2:药理作用
[0026] 本实施例使用甲苯2，4二异氰酸酯(TDI)致敏兔制备变应性鼻炎兔模型，观察药物 改善动物鼻充血、流涕及喷嚏等方面的抗变应性鼻炎作用。
[0027] 1、材料与方法
[0028] 1.1动物
[0029]兔(浙江中医学院动物中心提供），雌雄各半。
[0030] 1.2试剂与样品
[0031 ]吲哚美辛购自中国药品生物制品检定所。化合物（I)自制，制备方法见实施例1。甲 苯2，4二异氰酸酯(TDI)原液lml (上海化学试剂站中心化工厂产）。0.9 %生理盐水(浙江平 湖莎普爱思制药公司），吲哚美辛、化合物(I)及其组合物用1.4%酒精制成气雾剂。
[0032] 1.3兔分组及模型制备
[0033] 兔随机分为5组：正常对照组、模型对照组、吲哚美辛组（6%，质量百分含量，下 同）、化合物⑴组(6%)、吲哚美辛与化合物（I)组合物组【3%吲哚美辛+3%化合物（I)】。治 疗组和模型对照组用配制的10%TDI溶液滴入鼻腔致敏鼻黏膜;正常对照组用生理盐水滴 鼻。每侧鼻腔〇. lml，1次/d，连续7d，然后每2d滴1次，共4次，致敏时间共15d。治疗组于致敏 结束后第2天用药物气雾剂，每侧鼻腔喷1次，一次0.1ml，2次/d，共15d;模型对照组和正常 对照组予以1.4%酒精，方法同治疗组。治疗期间治疗组与模型对照组均每2天予以10%TDI 溶液(每侧鼻腔〇. lml)激发1次。
[0034] 1.4鼻分泌量测定实验
[0035] 末次治疗后2d，观察动物30min鼻分泌量。计分方法:无涕0分，涕流至前鼻孔1分， 超过前鼻孔2分，流至鼻唇沟之间3分，至下唇处4分，涕流满面5~6分。
[0036] 1.5喷嚏次数、抓痒次数测定实验
[0037]末次治疗后2d，观察动物30min喷嚏次数、抓痒次数。
[0038] 1.6统计学方法
[0039]实验数据用均数土标准差(X土s)表示，应用SPSS18.0版统计软件进行单因素方差 分析和t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
[0040] 2、实验结果
[0041 ] 2.1对变应性鼻炎模型兔喷嚏次数、抓痒次数的影响
[0042]与正常对照组比较，模型对照组动物出现打喷嚏及抓痒(P<0.01);与模型对照组 比较，吲哚美辛与化合物(I)组合物组喷嚏次数、抓痒次数明显减少(p<0.01);与模型对照 组比较，吲哚美辛组、化合物(I)组喷嚏次数、抓痒次数减少(P<〇.05)。结果见表1。
[0043] 2.2对变应性鼻炎模型兔鼻分泌量的影响
[0044]与正常对照组比较，模型对照组兔的鼻分泌量明显增加(P<0.01)与模型对照组 比较，吲哚美辛与化合物（I)组合物组鼻分泌量明显减少(p<0.01);与模型对照组比较，吲 哚美辛组、化合物（I)组鼻分泌量减少(P<〇.05)。结果见表1。
[0045]表1对变应性鼻炎模型兔喷嚏次数、抓痒次数和鼻分泌量的影响
[0047]变应性鼻炎是由多种细胞因子和多种免疫活性细胞，特别是E0S、肥大细胞及T淋 巴细胞参与的，以鼻黏膜变应性炎症为特征的超敏反应性疾病。鼻黏膜中含有大量黏液及 浆液腺体，这些腺体的分泌物和大分子气体在保持气道内表面液体平衡和抵御细菌入侵过 程中起重要作用。因此，腺体分泌异常会导致鼻腔生理功能紊乱，变应性鼻炎是发生在鼻黏 膜的变应性疾病，腺体过度分泌为其主要的特征之一。肥大细胞及嗜酸粒细胞数目增多及 肥大细胞脱颗粒是变应性鼻炎鼻黏膜典型的病理特征。
[0048]上述结果表明，吲哚美辛、化合物（I)单独作用时，对变应性鼻炎具有治疗作用；吲 哚美辛和化合物（I)联合作用时，对变应性鼻炎的治疗效果进一步提高，可以开发成治疗变 应性鼻炎的药物。
[0049]上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明的保护 范围。本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换， 而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。
【主权项】
1. 一种具有下述结构式的化合物（I)，2. -种吲哚美辛的药物组合物，其特征在于:包括吲哚美辛、如权利要求1所述的化合 物(I)和药学上可以接受的载体，制备成需要的剂型。3. 根据权利要求2所述的吲哚美辛的药物组合物，其特征在于:药学上可以接受的载体 包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体 或润滑剂。4. 根据权利要求2所述的吲哚美辛的药物组合物，其特征在于:所述剂型包括片剂、胶 囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、 栓剂、喷雾剂、滴剂或贴剂。5. 权利要求1所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于，包含以下操作步骤：（a)将重 楼粉碎，用75~85%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯 和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步 骤(a)中正丁醇萃取物用大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个柱体积，再用70%乙醇洗脱 10个柱体积，收集70%洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中70%乙醇洗 脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为60:1、30:1、15:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗 脱得到4个组分；（d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为8:1、4:1和2: 1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相 硅胶分离，用体积百分浓度为75 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集10~15个柱体积洗脱液，洗 脱液减压浓缩得到化合物(I)。6. 根据权利要求5所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于:步骤(a)用80%乙醇热回 流提取，合并提取液。7. 根据权利要求5所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于:所述大孔树脂为D101型 大孔吸附树脂。8. 根据权利要求5所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于:步骤(a)中用二氯甲烷代 替乙酸乙酯进行萃取，得到二氯甲烷萃取物。9. 权利要求1所述的化合物（I)在制备治疗变应性鼻炎的药物中的应用。10. 权利要求2~4任一所述的吲哚美辛的药物组合物在制备治疗变应性鼻炎的药物中 的应用。
【文档编号】A61P11/02GK106046104SQ201610384230
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年5月28日
【发明人】刘慎权
【申请人】刘慎权