一种从紫锥菊中提取菊苣酸的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于植物活性提取技术领域，具体涉及一种从紫锥菊中提取菊苣酸的方法。
【背景技术】
[0002]紫锥菊(Echinacea purpurea Moench)属于菊科紫锥菊属多年生草本植物。菊苣酸为咖啡酸衍生物，是紫锥菊中极为重要的免疫活性成分之一。菊苣酸能抑制透明质酸酶和HIV-1整合酶，并在体内体外具有细胞吞噬促进作用和抗病毒活性。经检测，紫锥菊干燥根中中菊苣酸的含量为1.78g/100g，而地上部分中菊苣酸的含量为1.69g/100g。而目前菊苣酸的主要制备方法是先用乙醇加热回流提取，再用大孔树脂纯化，然而上述方法提取的菊苣酸纯度和收率均较低。
【发明内容】
[0003]本发明要解决的技术问题是提供一种从紫锥菊中提取菊苣酸的方法，该方法收率大，得到的菊苣酸纯度高。
[0004]本发明提供的技术方案是一种从紫锥菊中提取菊苣酸的方法，包括以下步骤:
[0005]1)取紫锥菊用60?75v%乙醇提取，将提取液过滤，取滤液备用；
[0006]2)往滤液中加入活性炭脱色，过滤，得到澄清液；
[0007]3)将澄清液浓缩后，上硅胶柱层析，水洗柱至无色，然后用甲醇和丙酮的混合溶剂进行洗脱，收集甲醇和丙酮洗脱液；
[0008]4)将甲醇和丙酮洗脱液再次上硅胶柱层析，用乙醇、丙酮和水的混合溶剂进行洗脱，收集乙醇、丙酮和水洗脱液，回收溶剂，干燥，即为菊苣酸。
[0009]步骤1)中，乙醇的用量为紫锥菊重量的10?30倍，在40?60°C下回流提取1?3次，每次提取1?3h。
[0010]步骤2)中，活性炭的加入量为滤液总重的1?1.5%0，脱色温度为40?60°C，脱色时间为20?30min。
[0011]步骤3)中，甲醇和丙酮的体积比为50?60:40?50。作为优选，甲醇和丙酮的体积比为60:40，可以大大提高菊苣酸纯度和收率。
[0012]步骤3)中，上柱时，浓缩液的流速为0.5?lBV/h ;洗脱时，水的流速为0.5?1BV/h，用量为1?2BV ;甲醇和丙酮混合溶剂的流度为1?1.5BV/h，用量为2?2.5BV。
[0013]步骤4)中，乙醇、丙酮和水的体积比为30?50:30?40:20?30。作为优选，乙醇、丙酮和水的体积比为50:30:20o
[0014]步骤4)中，甲醇和丙酮洗脱液的上柱流速为0.5?lBV/h ;乙醇、丙酮和水的混合溶剂的洗脱流度为1?1.5BV/h，用量为2?2.5BV0
[0015]与现有技术相比，本方法可以大大提高菊苣酸的收率和纯度，经检测，紫锥菊干品收率可达1.50%以上，纯度可达96.5%以上。
【具体实施方式】
[0016]以下具体实施例对本发明作进一步阐述，但不作为对本发明的限定。
[0017]实施例1
[0018]1)取紫锥菊根部干品100g用60v%乙醇提取，乙醇的用量为紫锥菊重量的10倍，在40°C下回流提取3h，将提取液过滤，取滤液备用；
[0019]2)往滤液中加入活性炭脱色，活性炭的加入量为滤液总重的1%。，脱色温度为40°C，脱色时间为20min，过滤，得到澄清液；
[0020]3)将澄清液浓缩后，上硅胶柱层析，浓缩液的流速为0.5BV/h ;水洗柱至无色，水的流速为0.5BV/h，用量为1BV ;然后用甲醇和丙酮的混合溶剂进行洗脱，甲醇和丙酮的体积比为50:40，洗脱流度为lBV/h，用量为2BV，收集甲醇和丙酮洗脱液；
[0021]4)将甲醇和丙酮洗脱液再次上硅胶柱层析，上柱流速为0.5BV/h，用乙醇、丙酮和水的混合溶剂进行洗脱，乙醇、丙酮和水的体积比为30:30:20，洗脱流度为lBV/h，用量为2BV，收集乙醇、丙酮和水洗脱液，回收溶剂，干燥，称重，得到1.53g菊苣酸。经检测，纯度为
96.
[0022]实施例2
[0023]1)取紫锥菊根部干品100g用75v%乙醇提取，乙醇的用量为紫锥菊重量的30倍，在60°C下回流提取3次，每次提取2h，将提取液合并，过滤，取滤液备用；
[0024]2)往滤液中加入活性炭脱色，活性炭的加入量为滤液总重的1.5%。，脱色温度为60°C，脱色时间为30min，过滤，得到澄清液；
[0025]3)将澄清液浓缩后，上硅胶柱层析，浓缩液的流速为lBV/h ;水洗柱至无色，水的流速为lBV/h，用量为2BV ;然后用甲醇和丙酮的混合溶剂进行洗脱，甲醇和丙酮的体积比为50:50，洗脱流度为1.5BV/h，用量为2.5BV，收集甲醇和丙酮洗脱液；
[0026]4)将甲醇和丙酮洗脱液再次上硅胶柱层析，上柱流速为lBV/h，用乙醇、丙酮和水的混合溶剂进行洗脱，乙醇、丙酮和水的体积比为50:40:30，洗脱流度为1.5BV/h，用量为
2.5BV，收集乙醇、丙酮和水洗脱液，回收溶剂，干燥，称重，得到1.55g菊苣酸。经检测，纯度为 96.6%。
[0027]实施例3
[0028]1)取紫锥菊根部干品100g用65v%乙醇提取，乙醇的用量为紫锥菊重量的20倍，在50°C下回流提取2次，每次提取2h，将提取液合并，过滤，取滤液备用；
[0029]2)往滤液中加入活性炭脱色，活性炭的加入量为滤液总重的1%。，脱色温度为50°C，脱色时间为25min，过滤，得到澄清液；
[0030]3)将澄清液浓缩后，上硅胶柱层析，浓缩液的流速为0.5BV/h ;水洗柱至无色，水的流速为0.5BV/h，用量为1.5BV ;然后用甲醇和丙酮的混合溶剂进行洗脱，甲醇和丙酮的体积比为60:40，洗脱流度为lBV/h，用量为2BV，收集甲醇和丙酮洗脱液；
[0031]4)将甲醇和丙酮洗脱液再次上硅胶柱层析，上柱流速为0.5BV/h，用乙醇、丙酮和水的混合溶剂进行洗脱，乙醇、丙酮和水的体积比为50:30:20，洗脱流度为lBV/h，用量为2BV，收集乙醇、丙酮和水洗脱液，回收溶剂，干燥，称重，得到1.66g菊苣酸。经检测，纯度为97.
[0032]实施例4
[0033]1)取紫锥菊根部干品100g用75v%乙醇提取，乙醇的用量为紫锥菊重量的10倍，在60°C下回流提取1次，每次提取3h，将提取液过滤，取滤液备用；
[0034]2)往滤液中加入活性炭脱色，活性炭的加入量为滤液总重的1%。，脱色温度为60°C，脱色时间为20min，过滤，得到澄清液；
[0035]3)将澄清液浓缩后，上硅胶柱层析，浓缩液的流速为lBV/h ;水洗柱至无色，水的流速为0.5BV/h，用量为2BV ;然后用甲醇和丙酮的混合溶剂进行洗脱，甲醇和丙酮的体积比为60:40，洗脱流度为lBV/h，用量为2.5BV，收集甲醇和丙酮洗脱液；
[0036]4)将甲醇和丙酮洗脱液再次上硅胶柱层析，上柱流速为0.5BV/h，用乙醇、丙酮和水的混合溶剂进行洗脱，乙醇、丙酮和水的体积比为50:30:20，洗脱流度为1.5BV/h，用量为2BV，收集乙醇、丙酮和水洗脱液，回收溶剂，干燥，称重，得到1.69g菊苣酸。经检测，纯度为 97.7%o
【主权项】
1.一种从紫锥菊中提取菊苣酸的方法，其特征在于:包括以下步骤: 1)取紫锥菊用60?75￥%乙醇提取，将提取液过滤，取滤液备用； 2)往滤液中加入活性炭脱色，过滤，得到澄清液； 3)将澄清液浓缩后，上硅胶柱层析，水洗柱至无色，然后用甲醇和丙酮的混合溶剂进行洗脱，收集甲醇和丙酮洗脱液； 4)将甲醇和丙酮洗脱液再次上硅胶柱层析，用乙醇、丙酮和水的混合溶剂进行洗脱，收集乙醇、丙酮和水洗脱液，回收溶剂，干燥，即为菊苣酸。2.根据权利要求1所述的一种从紫锥菊中提取菊苣酸的方法，其特征在于:步骤1)中，乙醇的用量为紫锥菊重量的10?30倍，在40?60°C下回流提取1?3次，每次提取1 ?3h03.根据权利要求1所述的一种从紫锥菊中提取菊苣酸的方法，其特征在于:步骤2)中，活性炭的加入量为滤液总重的1?1.5%。，脱色温度为40?60°C，脱色时间为20?30mino4.根据权利要求1所述的一种从紫锥菊中提取菊苣酸的方法，其特征在于:步骤3)中，甲醇和丙酮的体积比为50?60:40?50。5.根据权利要求4所述的一种从紫锥菊中提取菊苣酸的方法，其特征在于:甲醇和丙酮的体积比为60:40o6.根据权利要求1所述的一种从紫锥菊中提取菊苣酸的方法，其特征在于:步骤3)中，上柱时，浓缩液的流速为0.5?lBV/h ;洗脱时，水的流速为0.5?lBV/h，用量为1?2BV ;甲醇和丙酮混合溶剂的流度为1?1.5BV/h，用量为2?2.5BV。7.根据权利要求1所述的一种从紫锥菊中提取菊苣酸的方法，其特征在于:步骤4)中，乙醇、丙酮和水的体积比为30?50:30?40:20?30。8.根据权利要求7所述的一种从紫锥菊中提取菊苣酸的方法，其特征在于:乙醇、丙酮和水的体积比为50:30:20o9.根据权利要求1所述的一种从紫锥菊中提取菊苣酸的方法，其特征在于:步骤4)中，甲醇和丙酮洗脱液的上柱流速为0.5?lBV/h ;乙醇、丙酮和水的混合溶剂的洗脱流度为1?1.5BV/h，用量为2?2.5BVo
【专利摘要】本发明提供了一种从紫锥菊中提取菊苣酸的方法，包括以下步骤：1)取紫锥菊用60～75v％乙醇提取，将提取液过滤，取滤液备用；2)往滤液中加入活性炭脱色，过滤，得到澄清液；3)将澄清液浓缩后，上硅胶柱层析，水洗柱至无色，然后用甲醇和丙酮的混合溶剂进行洗脱，收集甲醇和丙酮洗脱液；4)将甲醇和丙酮洗脱液再次上硅胶柱层析，用乙醇、丙酮和水的混合溶剂进行洗脱，收集乙醇、丙酮和水洗脱液，回收溶剂，干燥，即为菊苣酸。本方法可以大大提高菊苣酸的收率和纯度，经检测，紫锥菊干品收率可达1.50％以上，纯度可达96.5％以上。
【IPC分类】C07C69/732, C07C67/48
【公开号】CN105294440
【申请号】CN201510640962
【发明人】周晓青, 钟德品, 谢冬养, 陆美珍, 赵明东
【申请人】桂林三宝药业有限公司
【公开日】2016年2月3日
【申请日】2015年9月30日