一种利用鱿鱼内脏提取天然牛磺酸的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及磺酸的提取，尤其是一种利用鱿鱼内脏提取天然牛磺酸的方法。
【背景技术】
[0002]我国海洋资源丰富，其中鱿鱼是一种产量极高的水产品原料。鱿鱼在加工的过程中，鱿鱼的内脏占鱿鱼的比例大约是10%，其作为下脚料通常被遗弃，造成了资源的极大浪费。鱿鱼内脏中游离态天然牛磺酸的含量高达1.03%，是所有水产品中牛磺酸含量最高之一，原料来源广且安全。
[0003]目前，牛磺酸的提取方法主要是化学合成法。化学合成法因其得率高而应用最为广泛，但是化学合成法成本高，易造成环境污染，且采用化学合成法提取的牛磺酸无法达到天然牛磺酸中生物活性的强度。
【发明内容】
[0004]为了克服现有技术中采用化学合成法提取牛磺酸存在成本高、易环境污染及降解生物活性的不足，本发明的目的是提供一种工艺合理、操作简便、提得牛磺酸纯度高的利用鱿鱼内脏提取天然牛磺酸的方法。
[0005]本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:一种利用鱿鱼内脏提取天然牛磺酸的方法，其特征在于:其经过下列工艺步骤:
(1)原料选取与处理:将所选取的新鲜鱿鱼内脏依次进行水洗、捣碎和匀浆，制得鱿鱼内脏浆液；将鱿鱼内脏浆液加水，煮沸提取，离心，取上清液；残渣二次加水，煮沸提取，离心，取二次上清液；合并上清液，得牛磺酸提取液；
(2)初滤:将步骤(1)中得到的牛磺酸提取液采用截留分子量为30000D的超滤离心管进行初步超滤浓缩，截留包括大分子蛋白质、多糖在内的杂质，收集滤过液，得到牛磺酸初滤液；
(3)二次超滤:将步骤(2)中得到的牛磺酸初滤液送入截留分子量为1000D的卷式膜分离设备进行二次超滤，截留包括小分子蛋白质在内的杂质，得牛磺酸超滤液；
(4)离子交换层析纯化牛磺酸:将步骤(3)中得到的牛磺酸超滤液过阳离子交换柱，采用PH梯度洗脱的方法，收集PH1.0?4.1之间的牛磺酸洗脱液；
(5)反渗透浓缩:将步骤(4)中收集的牛磺酸洗脱液送入反渗透膜设备中进行反渗透浓缩，反渗透压力控制为2?lOMPa，牛磺酸被截留在浓缩液中，得牛磺酸浓缩液；
(6)醇沉结晶:将步骤(5)中得到的牛磺酸浓缩液加入无水乙醇，沉淀，得到牛磺酸混浊液，蒸馏后，喷雾干燥，得到牛磺酸结晶体。
[0006]所述步骤(1)中鱿鱼内脏浆液的加水量为鱿鱼内脏浆液重量的2?4倍，煮沸提取的时间为1?3h ;所述的残渣的加水量为残渣重量的1?3倍，煮沸提取的时间为0.5?
1.5h0
[0007]所述步骤(3)中的卷式膜分离设备的进、出口压力均控制为2?4MPa，平均温度控制为30?40°Co
[0008]所述步骤￠)中的牛磺酸浓缩液加的无水乙醇的量为牛磺酸浓缩液体积3?5倍。
[0009]本发明是将清洗过的鱿鱼内脏进行匀浆，匀浆后水提得牛磺酸提取液；对牛磺酸提取液进行两次超滤，再经离子交换层析纯化后对其进行反渗透浓缩，得到的浓缩液进行醇沉，蒸馏，喷雾干燥，得到牛磺酸结晶体。其中，采用超滤法去除蛋白，蛋白脱除率高，且不引入其他杂质，利于后续工艺处理；采用离子交换层析纯化，使获得的产品纯度高；采用反渗透浓缩可达到效率高、能效小、降低成本的目的。对所获得的牛磺酸可用薄层层析对牛磺酸纯度进行检测，以标准品为对照。本发明的工艺流程合理，操作简单，速度快，自动化程度高，易于工业化，无环境污染，提得的牛磺酸纯度高。
【具体实施方式】
[0010]下面结合实施例对本做进一步说明。
[0011]实施例1
一种利用鱿鱼内脏提取天然牛磺酸的方法，其经过下列工艺步骤:
(1)原料选取与处理:将所选取的新鲜鱿鱼内脏依次进行水洗、捣碎和匀浆，制得鱿鱼内脏浆液；将鱿鱼内脏浆液加水，加水量为鱿鱼内脏浆液重量的3倍，煮沸提取，煮沸提取时间为2h ;送入离心机中，控制转速5000r/min，离心20min，取上清液；残渣二次加水，加水量为残渣重量的2倍，煮沸提取，煮沸提取时间为lh ;送入离心机中，控制转速5000r/min，离心20min，取二次上清液；合并上清液，得牛磺酸提取液；
(2)初滤:将步骤(1)中得到的牛磺酸提取液采用截留分子量为30000D的超滤离心管进行初步超滤浓缩，截留包括大分子蛋白质、多糖在内的杂质，收集滤过液，得到牛磺酸初滤液；
(3)二次超滤:将步骤(2)中得到的牛磺酸初滤液送入截留分子量为1000D的卷式膜分离设备进行二次超滤，其中，卷式膜分离设备的进、出口压力均控制为3MPa，平均温度控制为35°C ;截留包括小分子蛋白质在内的杂质，得牛磺酸超滤液；
(4)离子交换层析纯化牛磺酸:将步骤(3)中得到的牛磺酸超滤液过阳离子交换柱，采用PH梯度洗脱的方法，收集PH1.0?4.1之间的牛磺酸洗脱液；
(5)反渗透浓缩:将步骤(4)中收集的牛磺酸洗脱液送入反渗透膜设备中进行反渗透浓缩，反渗透压力控制为5MPa，牛磺酸被截留在浓缩液中，得牛磺酸浓缩液；
(6)醇沉结晶:将步骤(5)中得到的牛磺酸浓缩液加入其体积4倍的无水乙醇，沉淀，得到牛磺酸混浊液，蒸馏后，喷雾干燥，得到牛磺酸结晶体。
[0012]本实施例所提供的技术方案工艺流程合理，操作简单，自动化程度高，易于工业化，无环境污染，提得的牛磺酸纯度高。
[0013]实施例2
一种利用鱿鱼内脏提取天然牛磺酸的方法，其经过下列工艺步骤:
(1)原料选取与处理:将所选取的新鲜鱿鱼内脏依次进行水洗、捣碎和匀浆，制得鱿鱼内脏浆液；将鱿鱼内脏浆液加水，加水量为鱿鱼内脏浆液重量的4倍，煮沸提取，煮沸提取时间为3h ;送入离心机中，控制转速4000 r/min，离心30min，取上清液；残渣二次加水，加水量为残渣重量的3倍，煮沸提取，煮沸提取时间为1.5h ;送入离心机中，控制