一种水蛭唾液重复提取的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及水蛭素提取领域，尤其涉及一种水蛭唾液重复提取的方法。
【背景技术】
[0002]水蛭，俗称蚂蟥，它是一种贵重的中药材，我国古代许多医学典籍都有记载，明代《本草纲目》中记载:水蛙“主逐恶血、痕血、月闭，破血下积聚，无子，利水通……治折伤坠扑畜血有功”。现代医学研究表明，水蛭唾腺中含有一种抗血凝物质一一蛭素，能广泛应用于断肢再植、抑制癌细胞生长等医疗领域。随着现代生物技术的应用和提高，蛭素的提取加工和医学临床应用，以及中成药的开发、研制和推广，对水蛭的需求量逐年增多。但是，现有技术中水蛭素的方法多以对水蛭活体的破坏方法获得水蛭素，影响所得水蛭素的纯度，同时对水蛭资源的供应依赖过大，尤其难以避免水蛭素生产的季节性问题。
[0003]因此，现有技术还有待于改进和发展。
【发明内容】
[0004]鉴于上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种水蛭唾液重复提取的方法，旨在解决现有技术中采用血液直接喂养不能提高水蛭抗病能力的问题。
[0005]一种水蛭唾液重复提取的方法，其中，包括以下步骤:
[0006]在新鲜血液中添加谷氨酸、精氨酸和氯化钠，混合均匀；
[0007]选用新鲜的动物肠脏，将血液灌入肠中并扎紧；
[0008]将水蛭置于灌有血液的肠脏附近，让水蛭吸食肠脏内血液；
[0009]水蛭充分吸饱后，改变环境温度使其吐出唾液，收集获得水蛭唾液。
[0010]所述的水蛭唾液重复提取的方法，其中，改变环境温度是瞬间或缓慢升温至30?70°C之间。
[0011]所述的水蛭唾液重复提取的方法，其中，所述谷氨酸、精氨酸的添加量分别为新鲜血液重量的0.01?10%，所述氯化钠的添加量为新鲜血液重量的0.02?20%。
[0012]所述的水蛭唾液重复提取的方法，其中，氯化钠在使用前，用水稀释至浓度为
0.01?40%的氯化钠溶液。
[0013]所述的水蛭唾液重复提取的方法，其中，谷氨酸、精氨酸在使用前，用水稀释至浓度为0.01?40%的谷氨酸、精氨酸溶液。
[0014]所述的水蛭唾液重复提取的方法，其中，所述新鲜血液中还加入了柠檬酸钠。
[0015]所述的水蛭唾液重复提取的方法，其中，柠檬酸钠在使用前，用水稀释至浓度为
0.01?40%的柠檬酸钠溶液。
[0016]有益效果:本发明所提供的一种水蛭唾液重复提取的方法，该方法可实现连续提取数次，这即节省了成本，又增加了水蛭素的功效，使得水蛭活体重复利用，解决了目前水蛭素提取一次性利用的低效率、工艺复杂、高成本的痛点，有助于节约和保护我国野生水蛭资源，有助于大幅降低医药用水蛭素原料价格。
【具体实施方式】
[0017]本发明提供一种水蛭唾液重复提取的方法，为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0018]经过研究发现，水蛭的唾液中也含有水蛭素，而且活性高，因此，本发明中提供一种水蛭唾液重复提取的方法，可连续提取数次，这即节省了成本，又增加了水蛭素的功效，使得水蛭活体重复利用，解决了目前水蛭素提取一次性利用的低效率、工艺复杂、高成本的痛点，有助于节约和保护我国野生水蛭资源，有助于大幅降低医药用水蛭素原料价格。
[0019]具体地，所述水蛭唾液重复提取的方法，包括以下步骤:
[0020]在新鲜血液中添加谷氨酸、精氨酸和氯化钠，混合均匀；
[0021]选用新鲜的动物肠脏，将血液灌入肠中并扎紧；
[0022]将水蛭置于灌有血液的肠脏附近，让水蛭吸食肠脏内血液；
[0023]水蛭充分吸饱后，改变环境温度使其吐出唾液，收集获得水蛭唾液。
[0024]其中，所述新鲜血液可以为猪血、牛血、羊血、鸡血或驴血。通过在血液中添加谷氨酸、精氨酸和氯化钠，可以吸引水蛭吸食。其中，所述谷氨酸、精氨酸的添加量分别为新鲜血液重量的0.01?10%，所述氯化钠的添加量为新鲜血液重量的0.02?20%。所述氯化钠可以为有机盐或无机盐，新鲜血液中的含盐量不同，加入氯化钠还可以调节血液中的含盐浓度，吸引水輕吸食。优选地，氯化钠在使用前，可以用水稀释至浓度为0.01?40%的氯化钠溶液，方便混合均匀。所述谷氨酸、精氨酸在使用前，也可以用水稀释至浓度为0.01?40 %的谷氨酸、精氨酸溶液，方便混合均匀。
[0025]氯化钠还具有防止血液凝结的作用，优选地，所述新鲜血液中还加入了柠檬酸钠，有效防止血液凝结，所述柠檬酸钠的添加为新鲜血液重量的1?2%。所述柠檬酸钠在使用前，也可以用水稀释至浓度为0.01?40%的柠檬酸钠溶液，方便混合均匀。
[0026]水蛭在吃饱的情况，通过改变其环境温度，会使其分泌出大量的唾液，采用此种方法刺激水蛭，既无需添加催吐剂污染唾液成分，也无需对水蛭进行挤压使其受伤，是一种高效又对水蛭活体伤害不大的方法。改变环境温度是瞬间或缓慢升温至30?70°C之间。水蛭在的原始温度可以为0?25°C，当升温至30?70°C之间，温差可达20°C以上，水蛭在经过20°C以上的温差变化，就会吐出大量唾液。每次每条活体水蛭可以提取1?60次，每次能提取3?12毫升左右，每个月能提取1?6次，唾液中水蛭素含量为20?120AT-(U国际单位)/mL。
[0027]以下通过实施例对本发明做进一步说明。
[0028]实施例1
[0029]从饲养池内捞出成熟、健康的菲牛水蛭盛放到清水池中，每隔2天换水清洗一次，去除活体水蛭表面的杂质，不喂食，如此保持一个月。一个月后，用清水再次清洗活体水蛭，室温下，将水蛭放置于灌有贮藏槽内，将灌有血液的肠脏放入贮藏槽中，水蛭吸食肠脏内的血液，充分喂饱。对贮藏槽瞬间升温至50°C，收集水蛭吐出的唾液。瞬间升温3次，收集水輕吐出的唾液。
[0030]经过检测，这些唾液中，水蛭素含量为45AT- (U国际单位)/mL。
[0031]实施例2
[0032]从饲养池内捞出成熟、健康的菲牛水蛭盛放到清水池中，每隔2天换水清洗一次，去除活体水蛭表面的杂质，不喂食，如此保持一个月。一个月后，用清水再次清洗活体水蛭，室温下，将水蛭放置于灌有贮藏槽内，将灌有血液的肠脏放入贮藏槽中，水蛭吸食肠脏内的血液，充分喂饱。对贮藏槽缓慢升温至70°C，收集水蛭吐出的唾液。瞬间升温3次，收集水輕吐出的唾液。
[0033]经过检测，这些唾液中，水蛭素含量为50AT- (U国际单位)/mL。
[0034]实施例3
[0035]从饲养池内捞出成熟、健康的菲牛水蛭盛放到清水池中，每隔2天换水清洗一次，去除活体水蛭表面的杂质，不喂食，如此保持一个月。一个月后，用清水再次清洗活体水蛭，室温下，将水蛭放置于灌有贮藏槽内，将灌有血液的肠脏放入贮藏槽中，水蛭吸食肠脏内的血液，充分喂饱。对贮藏槽瞬间升温至40°C，收集水蛭吐出的唾液。瞬间升温3次，收集水輕吐出的唾液。
[0036]经过检测，这些唾液中，水蛭素含量为52AT- (U国际单位)/mL。
[0037]应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。
【主权项】
1.一种水蛭唾液重复提取的方法，其特征在于，包括以下步骤: 在新鲜血液中添加谷氨酸、精氨酸和氯化钠，混合均匀； 选用新鲜的动物肠脏，将血液灌入肠中并扎紧； 将水蛭置于灌有血液的肠脏附近，让水蛭吸食肠脏内血液； 水蛭充分吸饱后，改变环境温度使其吐出唾液，收集获得水蛭唾液。2.根据权利要求1所述的水蛭唾液重复提取的方法，其特征在于，改变环境温度是瞬间或缓慢升温至30?70°C之间。3.根据权利要求1所述的水蛭唾液重复提取的方法，其特征在于，所述谷氨酸、精氨酸的添加量为新鲜血液重量的1?3%，所述氯化钠的添加量为新鲜血液重量的3?5%。4.根据权利要求1所述的水蛭唾液重复提取的方法，其特征在于，氯化钠在使用前，用水稀释至浓度为0.01?40%的氯化钠溶液。5.根据权利要求1所述的水蛭唾液重复提取的方法，其特征在于，谷氨酸、精氨酸在使用前，用水稀释至浓度为0.01?40%的谷氨酸、精氨酸溶液。6.根据权利要求1所述的水蛭唾液重复提取的方法，其特征在于，所述新鲜血液中还加入了柠檬酸钠。7.根据权利要求6所述的水蛭唾液重复提取的方法，其特征在于，柠檬酸钠在使用前，用水稀释至浓度为0.01?40%的柠檬酸钠溶液。
【专利摘要】本发明公开一种水蛭唾液重复提取的方法，包括以下步骤：在新鲜血液中添加谷氨酸、精氨酸和氯化钠，混合均匀；选用新鲜的动物肠脏，将血液灌入肠中并扎紧；将水蛭置于灌有血液的肠脏附近，让水蛭吸食肠脏内血液；水蛭充分吸饱后，改变环境温度使其吐出唾液，收集获得水蛭唾液。该方法可实现连续提取数次，这即节省了成本，又增加了水蛭素的功效，使得水蛭活体重复利用，解决了目前水蛭素提取一次性利用的低效率、工艺复杂、高成本的痛点，有助于节约和保护我国野生水蛭资源，有助于大幅降低医药用水蛭素原料价格。
【IPC分类】C07K1/14, C07K14/815
【公开号】CN105418756
【申请号】CN201511008637
【发明人】汤浩强
【申请人】汤浩强
【公开日】2016年3月23日
【申请日】2015年12月25日