过反渗透膜浓缩，最后干燥浓缩液产品得到1-脱氧野尻霉素产物。
[0038] 实施例2
[0039] 本实施例提供了一种1-脱氧野尻霉素的提取方法，首先选取优质桑叶，将桑叶粉 粹至直径为40~60目大小，将桑叶放入微波萃取器中，以2350MHz的工作频率运行微波萃取 器，并不断向其中加入7Bv的水，水的温度为55°C，搅拌萃取两次，每次25min。
[0040] 微波萃取完成后，使用卧式螺旋离心机将桑叶残渣离心去除，离心速率3100rpm， 向离心后得到的水溶液中加入1.5Bv的乙醇，乙醇的质量分数为93%，搅拌15min，此时得到 部分沉淀，将含有沉淀的溶液放入碟片离心机中再次进行离心，离心速率8500rpm，沉淀悬 浮在溶液中，分离沉淀和溶液，去除沉淀，减压干燥溶液得到中间产物并回收乙醇。
[0041] 将中间产物再次溶解在水中，溶解后得到的溶液通过截留分子量为25KDa的超滤 膜除去大分子杂质，其后通过截留分子量为400Da的纳滤膜膜除去部分小分子杂质，然后通 过反渗透膜浓缩，最后干燥浓缩液产品得到1-脱氧野尻霉素产物。
[0042] 实施例3
[0043]本实施例提供了一种1-脱氧野尻霉素的提取方法，首先选取优质桑叶，将桑叶粉 粹至直径为40~60目大小，将桑叶放入微波萃取器中，以2400MHz的工作频率运行微波萃取 器，并不断向其中加入7Bv的水，水的温度为60°C，搅拌萃取两次，每次30min。
[0044]微波萃取完成后，使用卧式螺旋离心机将桑叶残渣离心去除，离心速率3300rpm， 向离心后得到的水溶液中加入1.7Bv的乙醇，乙醇的质量分数为94%，搅拌14min，此时得到 部分沉淀，将含有沉淀的溶液放入碟片离心机中再次进行离心，离心速率9000rpm，沉淀悬 浮在溶液中，分离沉淀和溶液，去除沉淀，减压干燥溶液得到中间产物并回收乙醇。
[0045] 将中间产物再次溶解在水中，溶解后得到的溶液通过截留分子量为30KDa的超滤 膜除去大分子杂质，其后通过截留分子量为500Da的纳滤膜膜除去部分小分子杂质，然后通 过反渗透膜浓缩，最后干燥浓缩液产品得到1-脱氧野尻霉素产物。
[0046] 实施例4
[0047] 本实施例提供了一种1-脱氧野尻霉素的提取方法，首先选取优质桑叶，将桑叶粉 粹至直径为40~60目大小，将桑叶放入微波萃取器中，以2450MHz的工作频率运行微波萃取 器，并不断向其中加入8Bv的水，水的温度为65°C，搅拌萃取两次，每次35min。
[0048]微波萃取完成后，使用卧式螺旋离心机将桑叶残渣离心去除，离心速率3400rpm， 向离心后得到的水溶液中加入1.5Bv的乙醇，乙醇的质量分数为96%，搅拌16min，此时得到 部分沉淀，将含有沉淀的溶液放入碟片离心机中再次进行离心，离心速率9500rpm，沉淀悬 浮在溶液中，分离沉淀和溶液，去除沉淀，减压干燥溶液得到中间产物并回收乙醇。
[0049] 将中间产物再次溶解在水中，溶解后得到的溶液通过截留分子量为35KDa的超滤 膜除去大分子杂质，其后通过截留分子量为600Da的纳滤膜膜除去部分小分子杂质，然后通 过反渗透膜浓缩，最后干燥浓缩液产品得到1-脱氧野尻霉素产物。
[0050] 实施例5
[0051]本实施例提供了一种1-脱氧野尻霉素的提取方法，首先选取优质桑叶，将桑叶粉 粹至直径为40~60目大小，将桑叶放入微波萃取器中，以2500MHz的工作频率运行微波萃取 器，并不断向其中加入9Bv的水，水的温度为70°C，搅拌萃取两次，每次30min。
[0052]微波萃取完成后，使用卧式螺旋离心机将桑叶残渣离心去除，离心速率3500rpm， 向离心后得到的水溶液中加入1.8Bv的乙醇，乙醇的质量分数为97 %，搅拌18min，此时得到 部分沉淀，将含有沉淀的溶液放入碟片离心机中再次进行离心，离心速率lOOOOrpm，沉淀悬 浮在溶液中，分离沉淀和溶液，去除沉淀，减压干燥溶液得到中间产物并回收乙醇。
[0053]将中间产物再次溶解在水中，溶解后得到的溶液通过截留分子量为40KDa的超滤 膜除去大分子杂质，其后通过截留分子量为700Da的纳滤膜膜除去部分小分子杂质，然后通 过反渗透膜浓缩，最后干燥浓缩液产品得到1-脱氧野尻霉素产物。
[0054] 实施例6
[0055] 本实施例提供了一种1-脱氧野尻霉素的提取方法，首先选取优质桑叶，将桑叶粉 粹至直径为40~60目大小，将桑叶放入微波萃取器中，以2550MHz的工作频率运行微波萃取 器，并不断向其中加入ΙΟΒν的水，水的温度为75°C，搅拌萃取两次，每次40min。
[0056] 微波萃取完成后，使用卧式螺旋离心机将桑叶残渣离心去除，离心速率3250rpm， 向离心后得到的水溶液中加入2Bv的乙醇，乙醇的质量分数为98%，搅拌20min，此时得到部 分沉淀，将含有沉淀的溶液放入碟片离心机中再次进行离心，离心速率9000rpm，沉淀悬浮 在溶液中，分离沉淀和溶液，去除沉淀，减压干燥溶液得到中间产物并回收乙醇。
[0057]将中间产物再次溶解在水中，溶解后得到的溶液通过截留分子量为45KDa的超滤 膜除去大分子杂质，其后通过截留分子量为800Da的纳滤膜膜除去部分小分子杂质，然后通 过反渗透膜浓缩，最后干燥浓缩液产品得到1-脱氧野尻霉素产物。
[0058] 实施例7
[0059] 本实施例提供了一种1-脱氧野尻霉素的提取方法，首先选取优质桑叶，将桑叶粉 粹至直径为40~60目大小，将桑叶放入微波萃取器中，以2600MHz的工作频率运行微波萃取 器，并不断向其中加入ΙΟΒν的水，水的温度为80°C，搅拌萃取两次，每次40min。
[0060] 微波萃取完成后，使用卧式螺旋离心机将桑叶残渣离心去除，离心速率3500rpm， 向离心后得到的水溶液中加入2Bv的乙醇，乙醇的质量分数为95%，搅拌20min，此时得到部 分沉淀，将含有沉淀的溶液放入碟片离心机中再次进行离心，离心速率1 OOOOrpm，沉淀悬浮 在溶液中，分离沉淀和溶液，去除沉淀，减压干燥溶液得到中间产物并回收乙醇。
[0061] 将中间产物再次溶解在水中，溶解后得到的溶液通过截留分子量为50KDa的超滤 膜除去大分子杂质，其后通过截留分子量为550Da的纳滤膜膜除去部分小分子杂质，然后通 过反渗透膜浓缩，最后干燥浓缩液产品得到1-脱氧野尻霉素产物。
[0062] 对上述实施例获得的1-脱氧野尻霉素产物进行检测，同时对比市售的1-脱氧野尻 霉素产品的化学组成，结果如下表。
[0063] 表1各实施例所得产物成分检测表
[0065] 由上表数据可知，本发明各实施例对于桑叶中1-脱氧野尻霉素的提取得到的产品 中，1-脱氧野尻霉素的含量高，相应的药用价值更高，且整个提取过程中不会使用有毒化学 试剂，更加环保节能。
[0066] 以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技 术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修 改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 桑叶中1-脱氧野尻霉素的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：（1)选取桑叶，粉碎 至直径为40~60目，将粉碎后的桑叶置于50°C~80°C的水中进行微波提取； (2) 离心分离去除桑叶残渣，收集水溶液，向水溶液中加入乙醇，搅拌1 Omin~20min; (3) 离心分离，减压浓缩离心分离后的溶液、干燥得中间产物； (4) 将中间产物溶解于水中，通过超滤膜除去大分子杂质，然后通过纳滤膜除去小分子 杂质，最后通过反渗透膜浓缩干燥得产物。2. 根据权利要求1所述的桑叶中1-脱氧野尻霉素的提取方法，其特征在于，所述微波提 取按以下方式进行:在5Bv~15Bv的水中，微波频率为2300MHz~2600MHz条件下提取至少两 次，每次20min~40min。3. 根据权利要求2所述的桑叶中1-脱氧野尻霉素的提取方法，其特征在于，所述微波频 率为 2450MHz。4. 根据权利要求1所述的桑叶中1-脱氧野尻霉素的提取方法，其特征在于，所述步骤 (2) 中，离心分离在卧式螺旋离心机中以转速3000rpm~3500rpm进行。5. 根据权利要求1所述的桑叶中1-脱氧野尻霉素的提取方法，其特征在于，所述步骤 (3) 中，离心分离在碟片离心机中以转速8000rpm~lOOOOrpm进行。6. 根据权利要求1所述的桑叶中1-脱氧野尻霉素的提取方法，其特征在于，所述步骤 (2)中，加入乙醇的量为ΙΒν~2Bv，乙醇的质量分数为92%~98%。7. 根据权利要求6所述的桑叶中1-脱氧野尻霉素的提取方法，其特征在于，乙醇的质量 分数为95 %。8. 根据权利要求1所述的桑叶中1-脱氧野尻霉素的提取方法，其特征在于，步骤(4)中， 中间产物溶解在5Bv~ΙΟΒν的水中。9. 根据权利要求1所述的桑叶中1-脱氧野尻霉素的提取方法，其特征在于，步骤(4)中， 所述超滤膜的过滤范围为20kDa~50kDa。10. 根据权利要求1所述的桑叶中1-脱氧野尻霉素的提取方法，其特征在于，步骤(4) 中，所述纳滤膜的过滤范围为300Da~800Da。
【专利摘要】本发明提供了一种桑叶中1-脱氧野尻霉素的提取方法，属于植物有效成分提取技术领域，包括粉碎、微波提取、离心分离、水提醇沉、浓缩干燥、膜分离、干燥等步骤。通过微波萃取技术提高了桑叶中1-脱氧野尻霉素的提取效率并且保证1-脱氧野尻霉素的分子结构不受破坏，使得提取出的1-脱氧野尻霉素药用价值更高。
【IPC分类】C07D211/46
【公开号】CN105503700
【申请号】CN201511020693
【发明人】杨刚柱, 徐小琴, 张卫刚, 杨立琛
【申请人】重庆骄王天然产物股份有限公司
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2015年12月30日