专利名称：一种巴龙霉素的脱色提纯方法
技术领域：
本发明涉及一种脱色提纯方法，具体地涉及一种巴龙霉素的脱色提纯方法。
背景技术：
巴龙霉素(Paromomycin)，又名巴母霉素、巴罗姆霉素或PRM，是氨基糖甙类广谱抗生素，抗菌谱与新霉素相似，其特点是对阿米巴原虫有强大的杀灭作用，对革兰氏阴性杆菌、抗酸杆菌均有良好抑菌作用，此外，其对绦虫有效。临床上主要用于肠阿米巴病、细菌性痢疾及细菌性肠道感染，也可治疗绦虫病。在巴龙霉素的生产过程中，一股先使用离子交换树脂固定床进行料液的脱色，而后再使用大孔树脂脱除杂质，生产步骤比较复杂、繁琐，进而使得巴龙霉素产品收率不高。
发明内容
本发明的目的是提供一种巴龙霉素的脱色提纯方法，以解决现有技术中存在的上述问题。该方法使用连续离子交换技术同时进行巴龙霉素混合料液的脱色和除杂，既节省了生产步骤，又提高了产品收率。本发明提供的技术方案如下一种巴龙霉素的脱色提纯方法，其特征在于，包括如下的步骤1)把逆时针转动的连续移动床的数根阴离子交换树脂柱按顺时针方向依次分为氨水解析区、产品分离区、杂质分离区和树脂再生区四个分区，每一分区包括至少3根的树脂柱；2)控制氨水解析区的液体流速为50 70mL/min，氨水浓度为2 3mol/L，解析时间为4. 5 6小时，从氨水解析区解析下来的料液进入第一料罐，第一料罐内的料液从产品分离区的进口处进入产品分离区，控制其料液流速为5 7mL/min，而后再从产品分离区的出口处流入第二料罐；3)向第二料罐内以7 SmL/min的流速补充待处理的巴龙霉素混合料液，第二料罐内的混合溶液从杂质分离区的进口处进入杂质分离区，控制其料液流速为13 15mL/ min，而后再从杂质分离区的出口处流出；4)第一料罐中收集的料液为巴龙霉素产品。经过产品分离区和杂质分离区的分离，基本上实现了色素的吸附，与此同时，液流推动结合力弱的杂质依顺时针方向流动，而树脂柱则依逆时针方向逆向移动，从而夹带结合力强的产品逆时针方向运动，进而实现杂质和产品的分离。在推荐的实施例中，所述的阴离子交换树脂为强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂。在推荐的实施例中，产品分离区的进口设置在邻接氨水解析区的第一根树脂柱上端进料口，其出口则设置在邻接杂质分离区的第一根树脂柱下端出料口 ；杂质分离区的进口设置在邻接产品分离区的第一根树脂柱上端进料口，其出口设置在邻接树脂再生区的第一根树脂柱下端出料口。
在推荐的实施例中，第二料罐的料液流出速度与第二料罐的料液流入流速相同， 以保证第二料罐内的液料维持在一恒定水平。
在推荐的实施例中，氨水解析区包括串联连接的5 6根树脂柱，产品分离区包括串联连接的3 5根树脂柱，杂质分离区包括串联连接的5 7根树脂柱，树脂再生区包括各自独立、部分串联连接或全部串联连接的4 5根树脂柱。
需要说明的是，在待处理的巴龙霉素混合料液的纯度较高，料液对除杂的要求较低，对脱色的要求较高时，应该采用增加杂质分离区的树脂柱数量，并相应地减少产品分离区的树脂柱数量，以达到最佳的分离效果，并且不损失产品。
在推荐的实施例中，树脂再生区按逆时针方向依次为酸再生区、水洗区、碱再生区和水洗区，这其中，碱再生区和酸再生区的流速为33 44mL/min，水洗区的流速为51 68mL/min。这样，在树脂进入再生区以后，可依次经过盐酸再生、水洗、碱再生和水洗这一系列的再生流程，使树脂得以再生。
与现有技术相比，本发明提供的脱色提纯方法具有如下的特点
1、该方法使用连续离子交换技术同时进行巴龙霉素混合料液的脱色和除杂，既节省了生产步骤，又提高了产品收率，一举数得；
2、与一股的离子交换不同，巴龙霉素的分离没有典型的吸附产品和水洗杂质的步骤，而是将色谱分离的方式引用到离子交换过程中，通过树脂对产品与杂质的吸附力差异除掉杂质，接着巴龙霉素进入解析区进行解析，获得了最佳的分离效果与解析效果；
3、本发明中，可根据巴龙霉素混合料液的成分差异调整产品分离区和杂质分离区的树脂柱数量，以获得更高纯度的产品；
4、与离子交换树脂固定床相比，本发明使用的离子交换树脂连续移动床能节省一半以上的树脂，节省2/3以上的酸、碱使用量，并能将产品的浓度提高到1. 2万单位，节省后续工艺的蒸发浓缩成本。
图1为本发明实施例1和实施例3的离子交换树脂连续移动床的使用状态图2为本发明实施例2的离子交换树脂连续移动床的使用状态图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的描述，但不构成对本发明的任何限制。
实施例1
如图1中所示，逆时针转动的连续移动床设有20根201X4强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂柱，按顺时针方向依次分为氨水解析区100、产品分离区200、杂质分离区300和树脂再生区200四个分区，这其中，串联连接的第1 6号柱为氨水解析区100，串联连接的第7 11号柱为产品分离区200，串联连接的第12 16号柱为杂质分离区300，第17 20号柱树脂再生区400，并依次设为水洗区、碱再生区、水洗区和酸再生区。
产品分离区200的进口设置在第7号树脂柱上端进料口，其出口设置在第11号树脂柱下端出料口 ；杂质分离区300的进口设置在第12号树脂柱上端进料口，其出口设置在第16号树脂柱下端出料口。4
氨水解析区100的液体流速为60mL/min，氨水浓度为2. 5mol/L,并控制转盘旋转周期为15h (亦即氨水解析区100的解析时间为4.证)，从氨水解析区100解析下来的料液进入第一料罐a，第一料罐a内的料液从产品分离区200第7号树脂柱下端进口进入产品分离区200，其料液流速为6mL/min，而后再从产品分离区200的出口处流入第二料罐b。进料的巴龙霉素混合料液每毫升的旋光达到8. 5万单位，液相色谱检测巴龙霉素纯度为80%， 杂质占20%。向第二料罐b内以SmL/min的流速补充待处理的巴龙霉素混合料液(褐色)，第二料罐b内的混合溶液从杂质分离区300第12号树脂柱下端进口处进入杂质分离区300，控制其料液流速为14mL/min，而后再从杂质分离区300的出口处流出。树脂再生区400中，碱再生区和酸再生区的流速为44mL/min，水洗区的流速为 68mL/min。在转盘旋转两周之后，连续移动床系统得到平衡，检测第一料罐a中得到的巴龙霉素产品组分和第16号树脂柱出口出来的杂质组分，出料情况如下产品组分呈透明色，每毫升的旋光为1. 12万单位，巴龙霉素的纯度为95% ；杂质组分的旋光为0，表明没有巴龙霉素的损失。实施例2如图2中所示，逆时针转动的连续移动床设有20根201X4强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂柱，按顺时针方向依次分为氨水解析区100、产品分离区200、杂质分离区300和树脂再生区200四个分区，这其中，串联连接的第1 6号柱为氨水解析区100，串联连接的第7 9号柱为产品分离区200，串联连接的第10 16号柱为杂质分离区300，第17 20号柱树脂再生区400，并依次设为水洗区、碱再生区、水洗区和酸再生区。产品分离区200的进口设置在第7号树脂柱上端进料口，其出口设置在第9号树脂柱下端出料口 ；杂质分离区300的进口设置在第10号树脂柱上端进料口，其出口设置在第16号树脂柱下端出料口。氨水解析区100的液体流速为50mL/min，氨水浓度为2. Omol/L,并控制转盘旋转周期为20h (亦即氨水解析区100的解析时间为MO，从氨水解析区100解析下来的料液进入第一料罐a，第一料罐a内的料液从产品分离区200第7号树脂柱下端进口进入产品分离区200，其料液流速为7mL/min，而后再从产品分离区200的出口处流入第二料罐b。进料的巴龙霉素混合料液每毫升的旋光达到9. 5万单位，液相色谱检测巴龙霉素纯度为93%，杂质占7%。向第二料罐b内以7mL/min的流速补充待处理的巴龙霉素混合料液(褐色)，第二料罐b内的混合溶液从杂质分离区300第10号树脂柱下端进口处进入杂质分离区300，控制其料液流速为14mL/min，而后再从杂质分离区300的出口处流出。树脂再生区400中，碱再生区和酸再生区的流速为33mL/min，水洗区的流速为 51mL/min。在转盘旋转两周之后，连续移动床系统得到平衡，检测第一料罐a中得到的巴龙霉素产品组分和第16号树脂柱出口出来的杂质组分，出料情况如下产品组分呈透明色，每毫升的旋光为1.25万单位，巴龙霉素的纯度为98. 3% ；杂质组分的旋光为0，表明没有巴龙霉素的损失。
实施例3
如图1中所示，逆时针转动的连续移动床设有20根201X4强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂柱，按顺时针方向依次分为氨水解析区100、产品分离区200、杂质分离区300和树脂再生区200四个分区，这其中，串联连接的第1 6号柱为氨水解析区100，串联连接的第7 11号柱为产品分离区200，串联连接的第12 16号柱为杂质分离区300，第17 20号柱树脂再生区400，并依次设为水洗区、碱再生区、水洗区和酸再生区。
产品分离区200的进口设置在第7号树脂柱上端进料口，其出口设置在第11号树脂柱下端出料口 ；杂质分离区300的进口设置在第12号树脂柱上端进料口，其出口设置在第16号树脂柱下端出料口。
氨水解析区100的液体流速为70mL/min，氨水浓度为3. Omol/L,并控制转盘旋转周期为15h (亦即氨水解析区100的解析时间为4.证)，从氨水解析区100解析下来的料液进入第一料罐a，第一料罐a内的料液从产品分离区200第7号树脂柱下端进口进入产品分离区200，其料液流速为5mL/min，而后再从产品分离区200的出口处流入第二料罐b。进料的巴龙霉素混合料液每毫升的旋光达到8. 5万单位，液相色谱检测巴龙霉素纯度为80%， 杂质占20%。
向第二料罐b内以SmL/min的流速补充待处理的巴龙霉素混合料液(褐色)，第二料罐b内的混合溶液从杂质分离区300第12号树脂柱下端进口处进入杂质分离区300，控制其料液流速为13mL/min，而后再从杂质分离区300的出口处流出。
树脂再生区400中，碱再生区和酸再生区的流速为40mL/min，水洗区的流速为 60mL/mino
在转盘旋转两周之后，连续移动床系统得到平衡，检测第一料罐a中得到的巴龙霉素产品组分和第16号树脂柱出口出来的杂质组分，出料情况如下
产品组分呈透明色，每毫升的旋光为1.23万单位，巴龙霉素的纯度为94. 5% ；杂质组分的旋光为0，表明没有巴龙霉素的损失。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化， 均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
权利要求
1.一种巴龙霉素的脱色提纯方法，其特征在于，包括如下的步骤1)把逆时针转动的连续移动床的数根阴离子交换树脂柱按顺时针方向依次分为氨水解析区、产品分离区、杂质分离区和树脂再生区四个分区，每一分区包括至少3根的树脂柱；2)控制氨水解析区的液体流速为50 70mL/min，氨水浓度为2 3mol/L，解析时间为 4. 5 6小时，从氨水解析区解析下来的料液进入第一料罐，第一料罐内的料液从产品分离区的进口处进入产品分离区，控制其料液流速为5 7mL/min，而后再从产品分离区的出口处流入第二料罐；3)向第二料罐内以7 SmL/min的流速补充待处理的巴龙霉素混合料液，第二料罐内的混合溶液从杂质分离区的进口处进入杂质分离区，控制其料液流速为13 15mL/min，而后再从杂质分离区的出口处流出；4)第一料罐中收集的料液为巴龙霉素产品。
2.根据权利要求1中所述的一种巴龙霉素的脱色提纯方法，其特征在于所述的阴离子交换树脂为强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂。
3.根据权利要求1中所述的一种巴龙霉素的脱色提纯方法，其特征在于产品分离区的进口设置在邻接氨水解析区的第一根树脂柱上端进料口，其出口则设置在邻接杂质分离区的第一根树脂柱下端出料口 ；杂质分离区的进口设置在邻接产品分离区的第一根树脂柱上端进料口，其出口设置在邻接树脂再生区的第一根树脂柱下端出料口。
4.根据权利要求1或2中所述的一种巴龙霉素的脱色提纯方法，其特征在于第二料罐的料液流出速度与第二料罐的料液流入流速相同。
5.根据权利要求3中所述的一种巴龙霉素的脱色提纯方法，其特征在于氨水解析区包括串联连接的5 6根树脂柱，产品分离区包括串联连接的3 5根树脂柱，杂质分离区包括串联连接的5 7根树脂柱，树脂再生区包括各自独立、部分串联连接或全部串联连接的4 5根树脂柱。
6.根据权利要求4中所述的一种巴龙霉素的脱色提纯方法，其特征在于树脂再生区按逆时针方向依次为酸再生区、水洗区、碱再生区和水洗区，这其中，碱再生区和酸再生区的流速为33 44mL/min，水洗区的流速为51 68mL/min。
全文摘要
本发明涉及一种巴龙霉素的脱色提纯方法，其包括如下的步骤1)把逆时针转动的连续移动床的数根阴离子交换树脂柱按顺时针方向依次分为氨水解析区、产品分离区、杂质分离区和树脂再生区四个分区；2)从氨水解析区解析下来的料液进入第一料罐，第一料罐内的料液从产品分离区的进口处进入产品分离区，而后再从产品分离区的出口处流入第二料罐；3)向第二料罐内补充待处理的巴龙霉素混合料液，第二料罐内的混合溶液从杂质分离区的进口处进入杂质分离区，而后再从杂质分离区的出口处流出；4)第一料罐中收集的料液为巴龙霉素产品。该方法使用连续离子交换技术同时进行巴龙霉素混合料液的脱色和除杂，既节省了生产步骤，又提高了产品收率。
文档编号C07H1/06GK102532214SQ20101061039
公开日2012年7月4日 申请日期2010年12月28日 优先权日2010年12月28日
发明者方富林, 杜明华, 林丽华, 林雄水, 蓝伟光 申请人:三达膜科技(厦门)有限公司