成为：葡萄糖20g，琼脂20g，中草药提取物7g，干酪素4g，磷酸 氢二钾2g，氯化镁0. 6g，氯化钾0. 8g，蒸馏水1000mL，pH值5. 8,121°C灭菌20min。
[0084] 所述一级、二级、三级种子培养基组成为：麸皮70g，玉米粉55g，豆饼粉38g，海藻 糖12g，鱼粉8g，氯化铵1 lg，氯化钙8g，干酪素8g，中草药提取物8g，硫酸镁3g，磷酸氢二钾 2g，纯净水 1000mL，pH 值 6,121°C灭菌 20min ;
[0085] 所述种子罐培养基组成为：麸皮70g，玉米粉55g，豆饼粉38g，海藻糖12g，中草药 提取物12g，鱼粉8g，氯化铵llg，氯化钙8g，干酪素8g，硫酸镁3g，磷酸氢二钾2g，纯净水 1000mL，pH 值 6,121°C灭菌 20min ;
[0086] 所述发酵罐培养基组成为：麸皮70g，玉米粉55g，植物提取物50g，豆饼粉38g，中 草药提取物25g，海藻糖20g，鱼粉8g，氯化铵1 lg，氯化钙8g，干酪素4g，硫酸镁3g，磷酸氢 二钾2g，硝酸钾2g，硫酸锌0. 2g，纯净水1000mL，pH值6,121°C灭菌20min ;
[0087] 所述中草药提取物的制备方法如下：按重量份数计，称取黄芪65份，当归55份， 党参42份，甘草42份，鱼腥草40份，神曲40份，柴胡12份，黄芩12份；将上述中草药粉 碎至粒径为2毫米以下，然后于容器中均匀混合并添加5倍重量的水，控制温度80°C保持 3h，然后降温至52 °C，加入混合物料总重量8 %的混合酶制剂进行酶解，用乳酸调节pH值 为6. 2,酶解3h，最后添加混合物料2倍重量乙醇和丙醇的混合物，乙醇和丙醇混合的质量 比为1:1. 5,控制温度至70°C保持4h，过滤，得第一滤液；添加滤渣2倍重量的水，控制温度 90°C保持2h，然后降温至30°C，过滤，得第二滤液；将第一滤液和第二滤液按照质量比3:2 合并，滤液真空浓缩后冷冻干燥、粉碎即得中草药提取物；
[0088] 所述混合酶为葡聚糖酶、木聚糖酶、戊聚糖酶、果胶酶按质量比5:3:1:0. 5均匀混 合。
[0089] 酶活力单位定义：lmL粗酶液，于40°C、pH 3. 0条件下，lmin水解酪蛋白产生1 μ g 酪氨酸的酶量为1个酶活力单位，以U/mL表示。
[0090] 3.霉菌培养物的制备：酸性蛋白酶制备时的发酵液经减压浓缩、冷冻干燥、低温 粉碎即得霉菌培养物；所述霉菌培养物中活菌含量为gxK^cFu/g。
[0091] 实施例2
[0092] 一种含酸性蛋白酶的皮革软化复合酶，由以下重量份数的原料组成：
[0093] 植物提取物30份，酸性蛋白酶15份，霉菌培养物8份，酸性脂肪酶5份，非离子表 面活性剂4份、保护剂2份，激活剂2份，抗氧化剂0. 4份；
[0094] 所述非离子表面活性剂的质量组分为：烷基多苷（APG)30份，烷基葡萄糖酰胺 (AGA)25份，N-十二烷基乙二胺三乙酸钠（ED3A)12份，异构醇醚羧酸盐AEC-1107 12份，月 桂酰胺醚羧酸盐（LAEC)9份，平平加 c-125 4份，JFC 4份；
[0095] 所述激活剂是由如下质量组份的无机盐均匀混合而成：氯化锌12份，硫酸钠12 份，氯化镁8份，氯化钙4份；
[0096] 所述保护剂由以下重量份数的原料组成：灵芝多糖25份，海藻糖25份，NaCl 15 份，（NH4) 2S047份，半胱氨酸4份；
[0097] 所述抗氧化剂为葡萄籽原花青素、迷迭香提取物和杏叶提取物按质量比9:2:1. 5 均匀混合；
[0098] 所述植物提取物、酸性蛋白酶、霉菌培养物均为实施例1制备；
[0099] 上述皮革软化复合酶的制备方法，包括如下步骤：
[0100] 首先将所述保护剂、激活剂分别超微粉碎，均匀混合，随后立即依次加入植物提取 物、霉菌培养物均匀混合20-30min，然后依次加入酸性蛋白酶、酸性脂肪酶、非离子表面活 性剂均匀混合，最后加入抗氧化剂，混合均匀后密封包装即得皮革软化复合酶。
[0101] 实施例3
[0102] -种含酸性蛋白酶的皮革软化复合酶，由以下重量份数的原料组成：
[0103] 植物提取物20份，酸性蛋白酶10份，霉菌培养物5份，酸性脂肪酶3份，非离子表 面活性剂2份、保护剂1份，激活剂1份，抗氧化剂0. 3份；
[0104] 所述非离子表面活性剂的质量组分为：烷基多苷（APG)20份，烷基葡萄糖酰胺 (AGA)20份，N-十二烷基乙二胺三乙酸钠（ED3A)10份，异构醇醚羧酸盐AEC-1107 10份，月 桂酰胺醚羧酸盐（LAEC)8份，平平加 c-125 3份，JFC 3份；
[0105] 所述激活剂是由如下质量组份的无机盐均匀混合而成：氯化锌10份，硫酸钠10 份，氯化镁5份，氯化钙3份；
[0106] 所述保护剂由以下重量份数的原料组成：灵芝多糖20份，海藻糖20份，NaCl 10 份，（NH4) 2S045份，半胱氨酸3份；
[0107] 所述抗氧化剂为葡萄籽原花青素、迷迭香提取物和杏叶提取物按质量比8:1:1均 匀混合；
[0108] 所述植物提取物、酸性蛋白酶、霉菌培养物均为实施例1制备；
[0109] 上述皮革软化复合酶的制备方法同实施例2。
[0110] 实施例4
[0111] 一种含酸性蛋白酶的皮革软化复合酶，由以下重量份数的原料组成：
[0112] 植物提取物40份，酸性蛋白酶20份，霉菌培养物10份，酸性脂肪酶8份，非离子 表面活性剂5份、保护剂3份，激活剂3份，抗氧化剂0. 5份；
[0113] 所述非离子表面活性剂的质量组分为：烷基多苷（APG)40份，烷基葡萄糖酰胺 (AGA)30份，N-十二烷基乙二胺三乙酸钠（ED3A)15份，异构醇醚羧酸盐AEC-1107 15份，月 桂酰胺醚羧酸盐（LAEC) 10份，平平加 c-125 5份，JFC 5份；
[0114] 所述激活剂是由如下质量组份的无机盐均匀混合而成：氯化锌15份，硫酸钠15 份，氯化镁10份，氯化钙5份；
[0115] 所述保护剂由以下重量份数的原料组成：灵芝多糖30份，海藻糖30份，NaCl 20 份，（NH4) 2S049份，半胱氨酸5份；
[0116] 所述抗氧化剂为葡萄籽原花青素、迷迭香提取物和杏叶提取物按质量比10:3:2 均匀混合；
[0117] 所述植物提取物、酸性蛋白酶、霉菌培养物均为实施例1制备；
[0118] 上述皮革软化复合酶的制备方法同实施例2。
[0119] 实施例5
[0120] -种含酸性蛋白酶的皮革软化复合酶，由以下重量份数的原料组成：
[0121] 植物提取物40份，酸性蛋白酶10份，霉菌培养物10份，酸性脂肪酶3份，非离子 表面活性剂5份、保护剂1份，激活剂3份，葡萄籽原花青素0. 3份；
[0122] 所述非离子表面活性剂的质量组分为：烷基多苷（APG)40份，烷基葡萄糖酰胺 (AGA)20份，N-十二烷基乙二胺三乙酸钠（ED3A)15份，异构醇醚羧酸盐AEC-1107 10份，月 桂酰胺醚羧酸盐（LAEC) 10份，平平加 c-125 3份，JFC 5份；
[0123] 所述激活剂是由如下质量组份的无机盐均匀混合而成：氯化锌15份，硫酸钠10 份，氯化镁10份，氯化钙3份；
[0124] 所述保护剂由以下重量份数的原料组成：灵芝多糖30份，海藻糖20份，NaC120 份，（NH 4) 2S045份，半胱氨酸5份；
[0125] 所述植物提取物、酸性蛋白酶、霉菌培养物均为实施例1制备；
[0126] 上述皮革软化复合酶的制备方法同实施例2。
[0127] 实施例6酸性蛋白酶的热稳定性分析
[0128] 将实施例1酸性蛋白酶发酵粗酶液分别置于40°C、45°C、5(TC、55°C、6(rC、65°C、 70°C下，每隔10分钟取样测定酶活。40°C、45°C、50°C下，60分钟酶活没有下降。55°C与60°C 下，30分钟降到原有酶活的95%，60分钟降到90%。65 °C下，30分钟降到原有酶活的85%， 60分钟降到80%。70°C下，30分钟降到原有酶活的80%，60分钟降到原有酶活的75%。说 明酸性蛋白酶热稳定性较强。
[0129] 实施例7酸性蛋白酶的pH稳定性分析
[0130] 将实施例1酸性蛋白酶发酵粗酶液分别置于pH值2. 0、2. 5、3. 5、4. 5、5. 5、6. 0下， 每隔10分钟取样测定酶活。粗酶液pH值2. 0、2. 5、3. 5下，60分钟酶活没有下降。pH值4. 5 下，30分钟降到原有酶活的95%，60分钟降到90%。pH值5. 5下，30分钟降到原有酶活的 90%，60分钟降到85%。pH值6. 0下，30分钟降到原有酶活的85%，60分钟降到80%，说 明酸性蛋白酶耐pH范围较宽泛。
[0131] 实施例8植物提取物对酸性蛋白酶酶活力的影响
[0132] 采用本发明实施例1中酸性蛋白酶的制备方法，其它工艺