层或盘管加热到 95°C，再改用直接蒸汽加热，当罐中温度达到121°C时，保持25分钟即可达到灭菌效果，然后 关闭蒸汽，开始降温，当罐中温度降至37°C时备用，得到种子培养基。
[0032] 然后将培养好的一级菌种液在无菌条件下加入到种子罐中去，接种量分别是罐内 种子培养基的2%，进行混合培养混合培养，然后盖好种子罐上的接种帽开始搅拌培养，培养 条件为:温度37°C，PH自然。搅拌速度80转/分钟，罐压0.05兆帕，培养时间16小时即达到质 量要求。如果罐压降低，可通过氮气保持，过高可通过罐顶的排气阀排出，得到种子罐菌种。
[0033] 实施例5 发酵液的制备 配方:核桃仁2.5%、花生仁2.5%、酪蛋白酸钠0.3%、L 一精氨酸0.3%、磷酸氢二钾0.2%、番 茄粉0.2%、卷心菜粉0.1%、牛肉膏0.5%、酵母浸粉0.2%、蛋白胨1%、丁酸钙0.5%、快速渗透剂T 0.2%、柠檬酸胺0.2%、丝氨酸0.1%、葡萄糖酸0.6%、氯化钠0.3%、乳糖2%、葡萄糖2%、乙酸钠 0.7%、可溶性淀粉0.2%、无水氯化钙0.1%、50万单位脂肪酶1%、10万单位无花果酶1%、聚醚 消泡剂0 · 1%、自来水83 · 2%，PH自然。
[0034]操作:原料的预处理：（1)首先取配方中的水30公斤，放入研磨机中，然后加入配方 中的核桃仁、花生仁及酪蛋白酸钠、无水氯化钙，开动研磨机将其打成浆状，过滤弃渣收集 浆液，将浆液加热至55°C ± 2°C，在搅拌下加入50万单位的脂肪酶1000克，酶解30分钟，然后 再加入10万单位的无花果酶1000克，酶解60分钟即可，得到酶解液;（2)将配方中的丁酸钙， 快速渗透剂T，乳糖投入到20kg的自来水中，搅拌溶化后115°C灭菌15分钟备用，得到诱导 液。
[0035]具体操作:将配方中余下的水及酶解液投入到已空罐灭菌的发酵罐中，开动搅拌 机，加入配方中其他原料，然后在不停地搅拌下通入蒸汽加温，首先，利用发酵罐的加热器 加热到95°C，然后再改用直接蒸汽加热，当罐温度达到121°C时，保持40分钟可达到灭菌的 效果，然后降温，当发酵罐中温度降至37°C时备用，得到发酵罐培养基。
[0036]接种:首先提尚种子罐的压力为Ο . 1兆帕，发酵罐的压力为Ο . 05兆帕，然后打开接 种管道的阀门，将培养好的种子罐菌种，通过压差的方式输送到发酵罐中去，然后关闭接种 管道阀门。其中接种量是每100公斤发酵罐培养基接入种子罐菌种8公斤。培养条件:发酵温 度37°C，搅拌速度100转/分钟，发酵时间36小时，罐压0.05兆帕，PH值自然，氮气通入量每 100公斤发酵罐培养基每分钟通入氮气0.01立方米，通入时间3小时。发酵至3小时停止通入 氮气，继续发酵，当发酵至8小时，开始用蠕动栗向发酵罐中流加以上灭好菌的诱导液，以每 小时0.8公斤的速度流加，发酵至36小时，停止发酵，得到发酵液。
[0037] 实施例6 收集湿菌泥 开动管式离心机，调整转速8000转/分钟，以每分钟进料20公斤的进料速度进行离心， 离心完毕后收集湿菌泥，然后对发酵液进行第二次离心，离心前调整离心机转速13000/分 钟，以每分钟进料20公斤的速度进行离心，然后收集湿菌泥。
[0038] 实施例7 湿菌泥冷冻干燥 悬菌液的制备:取湿菌泥1000克，加入无菌蒸馏水4000毫升，脱脂奶粉600克，乳糖300 克，98%的甘油200克，麦芽糊精150克。
[0039]操作:首先取配方中的水1500毫升加热至60°C-65°C，在搅拌下加入麦芽糊精，溶 化后再加入配方中余下的水，然后再加入配方中其它的原料。在37°C-40°C的条件下充分 搅拌1小时，即成为悬菌液，然后将该悬菌液放入37°C的恒温室或箱中恒温60分钟进行预 冻。
[0040]冷冻干燥前的预冻，将恒温60分钟的悬菌液分装于冻干盘中，然后放入冷冻干燥 机的预冻室内在零下40°C-45°C的条件下预冻6小时，冻结后进行抽真空干燥。
[0041 ]真空干燥:将预冻好的料盘放入真空干燥室开始抽真空干燥，干燥条件为:真空度 为10-15帕，温度零下50°C，干燥室温度32°C，干燥时间55小时。冻干完毕后收集冻干料，用 无菌粉碎机粉碎成细度为80目的菌粉密封包装备用，得到冻干菌粉。
[0042] 实施例8 胶囊复配 取80目的冻干菌粉10克，代谢物干燥粉15克，微晶纤维素20克，硅胶粉20克，乳糖10克， 硬脂酸镁15克，L 一谷氨酰胺10克。
[0043]操作:将以上各物料放入固体搅拌混合机中混合均匀，然后在无菌条件下分装入 胶囊中，装瓶或压片即为成品。
[0044] 实施例9 表1 人体应用效果
_J,_3_l_?_3_J 说明： 男性:服用10天对便秘、腹泻、腹痛、结肠炎、消化不良有改善者360人，服用15天明显改 善者365人，服用28天显著改善者380人，服用100天达到正常状态的385人，停服180天未出 现反复的382人，出现反复的3人，达到预期满意效果。
[0045] 女性:服用10天对便秘、腹泻、腹痛、结肠炎、消化不良有改善者365人，服用15天明 显改善者375人，服用28天显著改善者387人，服用100天达到正常状态的390人，停服180天 未出现反复的386人，出现反复的4人，达到预期满意效果。
[0046] 实施例10 表2 Λ体府用效里
说明： 男性:服用10天对小儿食欲不振、厌食、肠道炎有改善者380人，服用15天明显改善者 385人，服用28天显著改善者383人，服用100天达到正常状态的395人，肤色改善者280人，腹 部脂肪明显减少者达260人，大脑记忆明显改善者达330人，达到预期满意效果。停服180天 反复2人。
[0047]女性:服用10天对小儿食欲不振、厌食、肠道炎有改善者392人，服用15天明显改善 者396人，服用28天显著改善者391人，服用100天达到正常状态的397人，肤色改善者287人， 腹部脂肪明显减少者达275人，大脑记忆明显改善者达379人，停服180天食欲不振反复2人， 达到预期满意效果。
[0048] 实施例11 胃癌细胞抑制生长试验(MGC 803细胞株）
注:按0.5%的加入量直接将0.5克本发明生产的载体菌加入到100毫升含有癌细胞的培 养液中，37°C厌氧培养36小时，72小时，得出以上结果，并且按以上操作重复做了 24批次，得 出相冋效果。
[0049] 实施例12 结肠癌细胞抑制生长试验(MC-38细胞株）
注:按0.5%的加入量直接将0.5克本公司生产的载体菌加入到100毫升含有癌细胞的培 养液中，37°C厌氧培养36小时，72小时，得出以上结果，并且按以上操作重复做了 31批次，得 出相冋效果。
[0050] 实施例13 畜禽试验结果:太湖猪(增重效果）
其中：在猪的全价饲料中添加0.15%的载体菌粉，饲喂60天达到的效果。
[0051 ] 实施例14 畜禽试验结果:罗曼肉鸡(增重效果）
其中，在鸡的全价饲料中添加〇. 1%的载体菌粉，饲喂40天达到的效果。
[0052] 实施例15 畜禽试验结果:海兰蛋鸡(产蛋率）
其中，在蛋鸡的全价饲料中加入〇. 1%的载体菌粉，自由采食达到以上效果。
[0053] 实施例16 美国八号果蔬试验
其中，在水中加入0.25%的载体菌粉，花期喷洒1次，坐果期喷1次，灌根1次，达到以上效 果。
[0054] 实施例17 黄瓜果树试验:爱丰品种
' 其中，在水中加入0.3%的载体菌粉花期喷洒1次，果期喷洒1&，果期灌根1次，达到以上 效果。
[0055] 实施例18 前子果蔬试验:京前10号
其中，在水中加入0.3%的载体菌粉花期喷洒1次，初果期喷洒1次，灌根1次，达到以上效 果。
【主权项】
1. 一种双歧杆菌乳酸菌混合发酵菌酶解法制备工艺，其特征在于，所述的步骤包括:制 备扩大菌种液和一级种子培养液得到一级菌种液，再将一级菌种液与种子培养基在种子罐 混合培养得到种子罐菌种，再将所述的种子罐菌种与发酵罐培养基混合培养并通过诱导液 进行发酵得到发酵液，当发酵完毕后，进行发酵液离心，得到湿菌泥，其中湿菌泥即为双歧 杆菌乳酸菌的混合发酵菌泥;其中所述的扩大菌种液制备包括酶解法制备试管培养基和接 种两部分;其中所述的一级种子培养液制备包括酶解法制备一级种子培养液;所述的种子 培养基的制备包括酶解法制备种子培养基;所述的发酵罐培养基的制备包括酶解法制备发 酵罐培养基。2. 根据权利要求1所述的一种双歧杆菌乳酸菌混合发酵菌酶解法制备工艺，其特征在 于，所述的扩大菌种液的制备包括以下步骤： 酶解法制备试管培养基:将l〇g核桃仁、l〇g花生仁、5克酪蛋白酸钠、0.1克无水氯化钙 不分前后顺序投入到300ml水中进行研磨并打成浆状过滤得到浆液，再在浆液中加入700ml 水并进行加热至53°C~57°C并进行搅拌，在搅拌中加入脂肪酶进行酶解，酶解后再加入无花 果酶进行酶解得到酶解液，然后向酶解液中加入3gL-精氨酸、3g番茄粉、6g牛肉膏、2g酵母 浸粉、5g蛋白胨、0. lg梓檬酸铵、0.6g丝氨酸、3g氯化钠、5g乳糖、8g葡萄糖、8g乙酸钠、3.2g 磷酸氢二钾进行搅拌溶解后分装于试管中，每支试管中分装20ml，将所述多个试管放入医 用消毒器中，采用〇. 1~. 14Mpa灭菌20分钟后得到试管培养基； 接种：在无菌条件下