一种降解土壤中残留农药的微生物发酵液培育方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种降解土壤中残留农药的微生物发酵液培育及其应用方法，属于生物应用领域。
【背景技术】
[0002]农药残留问题是随着农药大量生产和广泛使用而产生的。第二次世界大战以前，农业生产中使用的农药主要是含砷或含硫、铅、铜等的无机物，以及除虫菊酯、尼古丁等来自植物的有机物。第二次世界大战期间，人工合成有机农药开始应用于农业生产。到目前为止，世界上化学农药年产量近200万吨，约有1000多种人工合成化合物被用作杀虫剂、杀藻剂、除虫剂等类农药。
[0003]进入土壤的化学农药:一部分被土壤胶体吸附，一部分随土壤水扩散迀移，还有一部分因挥发进入大气。土壤对农药的吸附是有限的、暂时的，只是在一定条件下对农药的缓冲解毒作用，而没有使用化学农药得到真正的降解。农药随水迀移的结果可使化学农药进入江、河、湖、海，造成水体污染，严重者可造成人、畜中毒。而以气体形式挥发进入大气的农药微粒，随降雨而又可返回土体。因此，结局农药残留问题的本质是再是土体中将其进行充分降解、转化。
【发明内容】
[0004]本发明所要解决的技术问题是:针对土壤对农药的吸附是有限的、暂时的，只是在一定条件下对农药的缓冲解毒作用，而没有使用化学农药得到真正的降解的弊端，提供了一种降解土壤中残留农药的微生物发酵液培育及其应用方法，实现了将土壤中农药残留的充分降解、转化的目的。
[0005]为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案:
将含有效微生物数为个/m的微生物发酵液与水以1:30?1:130的体积比配置成水溶液，在土壤犁地五分钟后，按照每亩50?80kg均匀喷洒于受农药污染的土壤，然后再次翻耕一边，将发酵液与土壤充分混合。
[0006]所述的土壤为受农药污染，pH值为4.0?9.0的土壤。
[0007]所述的微生物培养方法包含以下所述步骤:
(O种子液的培养:将土壤稀释液接种在无菌的牛肉膏蛋白胨固体培养基中，在温度28?38°C，100?120rpm环境下，培养36h，获得微生物群的种子液；
(2)生产液的培养:将微生物群种子液10%?20%的接种量，倒入100L发酵罐中，在温度28?38°C，100?120rpm环境下，空气通入量为1.5m3/h，发酵48h ；
(3)发酵完成后的将发酵液装入储液罐。
[0008]本发明的应用方法:将含有效微生物数为个/ml的微生物发酵液与水以1:30?1:130的体积比配置成水溶液，在土壤犁地五分钟后，按照每亩50?80kg均匀喷洒于受农药污染的土壤，然后再次翻耕一边，将发酵液与土壤充分混合。
[0009]本发明的有益效果:
(I)所提取的微生物群能够产生生物活性酶
通过现代微生物分离技术、分子生物学技术和酶工程技术培养生产微生物群及生产发酵液。其蛋白酶的含量不低于500U/ml，淀粉酶不低于300U/ml，这些酶能够有效的对农药产生酶促反应。
[0010]所使用的微生物群还可以产生抗生素
由于所选微生物群来自于受污染的土壤，所以微生物中部分微生物可以产生抗生素，对于致病菌有抑制作用，同时减少其它致病菌在土壤中的繁殖。所使用的微生物群还可以产生抗生素由于有多种微生物，它们具有较强的针对性和组合能力，在载体中它们不互相排斥，在环境中相互协调，效果明显提高。
[0011]土壤中残留农药降解率达到90%以上。
[0012]具体实施方案:
将土壤稀释液接种在无菌的牛肉膏蛋白胨固体培养基中，在温度28?38°C，100?120rpm环境下，培养36h，获得微生物群的种子液；将微生物群种子液10%?20%的接种量，倒入100L发酵罐中，在温度28?38°C，100?120rpm环境下，空气通入量为1.5m3/h，发酵48h ;发酵完成后的将发酵液装入储液罐。
[0013]将土壤稀释液接种在无菌的牛肉膏蛋白胨固体培养基中，在温度28°C，10rpm环境下，培养36h，获得微生物群的种子液；将微生物群种子液10%的接种量，倒入100L发酵罐中，在温度28°C，10rpm环境下，空气通入量为1.5m3/h，发酵48h ;发酵完成后的将发酵液装入储液罐。
[0014]本实例中取上述方法制备得到的发酵液，在一亩经检测氯氰菊酯污染浓度45mg/kg土壤，pH值为5.5的土壤中，在土壤犁地5分钟后，用70kg的微生物群发酵液与水以1:50的体积比配置成的水溶液喷施与土壤，然后再次犁地，使微生物群发酵液与土壤充分接触。第10天取样检测，氯氰菊酯的降解率为95%。
[0015]将土壤稀释液接种在无菌的牛肉膏蛋白胨固体培养基中，在温度38°C，120rpm环境下，培养36h，获得微生物群的种子液；将微生物群种子液20%的接种量，倒入100L发酵罐中，在温度38°C，1120rpm环境下，空气通入量为1.5m3/h，发酵48h ;发酵完成后的将发酵液装入储液罐。
[0016]本实例中取上述方法制备得到的发酵液，在一亩经检测异恶草松污染浓度35mg/kg土壤，pH值为6.0的土壤中，在土壤犁地5分钟后，用65kg的微生物群发酵液与水以1:60的体积比配置成的水溶液喷施与土壤，然后再次犁地，使微生物群发酵液与土壤充分接触。第10天取样检测，异恶草松的降解率为90%。
[0017]将土壤稀释液接种在无菌的牛肉膏蛋白胨固体培养基中，在温度34°C，IlOrpm环境下，培养36h，获得微生物群的种子液；将微生物群种子液15%的接种量，倒入100L发酵罐中，在温度33°C，IlOrpm环境下，空气通入量为1.5m3/h，发酵48h ;发酵完成后的将发酵液装入储液罐。
[0018]本实例中取上述方法制备得到的发酵液，在一亩经检测二甲四氯钠污染浓度50mg/kg 土壤，pH值为8.0的土壤中，在土壤犁地5分钟后，用80kg的微生物群发酵液与水以1:40的体积比配置成的水溶液喷施与土壤，然后再次犁地，使微生物群发酵液与土壤充分接触。第10天取样检测，异恶草松的降解率为94%。
[0019]以上实例仅为了对本发明做进一步的说明，而本发明的施用范围不受所举实施例的局限。
【主权项】
1.一种降解土壤中残留农药的微生物发酵液培育方法，其特征在于该微生物发酵液培育步骤为: (1)种子液的培育:将土壤稀释液接种在无菌的牛肉膏蛋白胨固体培养基中，在温度28?38°C，100?120rpm环境下，培养36h，获得微生物群的种子液； (2)生产液的培育:将微生物群种子液10%?20%的接种量，倒入100L发酵罐中，在温度28?38°C，100?120rpm环境下，空气通入量为1.5m3/h，发酵48h ； (3)发酵完成后的将发酵液装入储液罐。2.根据权利要求书I所述的一种降解土壤中残留农药的微生物发酵液培育方法，其特征在于:所述的用于提取微生物稀释液的土壤是pH值为4.0?9.0的土壤。3.根据权利要求书I所述的一种降解土壤中残留农药的微生物发酵液培育方法，其特征在于该微生物发酵液的应用包含下述步骤: (1)将含有效微生物数为?个/mL的微生物发酵液与水以1:30?1:130的体积比配置成水溶液； (2)在土壤犁地五分钟后，用喷雾器对土壤均匀喷雾，然后再犁地一边，让其与土壤充分混合； (3)将配置好的水溶液，按照每亩50?80kg均匀喷洒于犁地五分钟后的受农药污染的土壤，然后再此犁地，使微生物发酵液与土壤充分混合； (4)在温度大于42度或温度小于8度时，不宜施用该微生物发酵液； (5)在农药污染严重的的土壤区，可以适当加大用量。
【专利摘要】本发明涉及一种降解土壤中残留农药的微生物发酵液培育及其应用方法，属于生物应用领域。本发明针对土壤对农药的吸附是有限的、暂时的，只是在一定条件下对农药的缓冲解毒作用，而没有使用化学农药得到真正的降解的弊端，提供了一种降解土壤中残留农药的微生物发酵液培育及其应用方法，实现了将土壤中农药残留的充分降解、转化的目的。本发明方法独特，通过实例证明所使用的发酵液产生生物活性酶，产生抗生素，同时可使土壤中的农药残留物的解率达到90%以上。
【IPC分类】B09C1/10
【公开号】CN105013814
【申请号】CN201510421864
【发明人】雷春生, 周丽花, 宋国
【申请人】常州市鼎日环保科技有限公司
【公开日】2015年11月4日
【申请日】2015年7月18日