抗原乳化设备及乳化方法
【专利摘要】本发明涉及一种抗原乳化设备及乳化方法，其中抗原乳化设备包括具有细长的颈部和球状的底部的乳化容器，伸入乳化容器中的搅拌杆，安装于搅拌杆的底端并位于乳化容器底部中心的刀头，以及安装于乳化容器外的夹套，乳化容器和夹套的顶部分别与上盖密封连接，搅拌杆的顶部穿过上盖。本发明的乳化方法包括安装上述设备、投料、搅拌等步骤。本发明具有抗原损失小、破坏少，乳化速度快，程度高等优点。
【专利说明】抗原乳化设备及乳化方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种乳化方法及装置，具体涉及一种抗原乳化设备和乳化方法。
【背景技术】
[0002]抗原在免疫动物前，需要与佐剂混合并乳化，形成稳定的油包水乳剂，目前抗原乳化方法主要有三种，研磨法、注射器混合法和超声法，这三种方法的优缺点如下:
(I)研磨法:先将佐剂加热并取适量放入无菌的玻璃研钵内，待冷却后再缓缓滴入等体积的抗原溶液，边滴边按同一方向研磨，滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后，继续研磨一段时间，使之成为乳白色粘稠的油包水乳剂。本法适于制备大量的佐剂抗原，缺点是研钵壁上粘附大量乳剂，抗原损失较大。
[0003](2)注射器混合法:将等量的弗氏佐剂和抗原溶液分别吸入两个注射器内，两注射器之间以一细胶管相连，注意排净空气，然后交替推动针管，直至形成粘稠的乳剂为止。本法优点是容易做到无菌操作，抗原损失少，适用于制备少量的抗原乳剂。但同时难以乳化完全，个别抗原，用塑料注射器根本推不动，而用玻璃注射器又有渗漏。制备好的乳化剂经鉴定才能适用。鉴定方法是将乳化剂滴入冷水中，若保持完整不分散，成滴状浮于水面，即乳化完全，为合格的油包水剂。
[0004](3)超声法:要求实验室有超声破碎仪的，需要控制超声频率和时间，超声容易激发一些自由基，对抗原有未知损害。而且上述三种方法乳化抗原的时间较长、一次乳化的体积受到设备的局限。
【发明内容】
[0005]发明目的:为了克服现有的乳化方法抗原的损失大、乳化不完全、费力、破坏抗原的缺点，本发明提供一种抗原乳化设备及乳化方法。
[0006]技术方案:为解决上述技术问题，本发明提供的抗原乳化设备包括乳化容器、上盖、搅拌杆、刀头和夹套，所述乳化容器具有细长的颈部和球状的底部，所述搅拌杆伸入乳化容器中，所述刀头安装于搅拌杆的底端并位于所述乳化容器底部的中心，所述乳化容器置于夹套中，所述夹套上开有冷却水进口与冷却水出口，所述乳化容器和夹套的顶部分别与所述上盖密封连接，所述搅拌杆的顶部穿过上盖。
[0007]作为优选，为了提高搅拌乳化过程中刀头的稳定性，避免刀头对抗原的剪切破坏，所述刀头是中心对称的S形刀头。
[0008]作为优选，为了简化设备的制造工艺，并避免抗原的粘附损失，所述夹套是塑料夹套，所述乳化容器是玻璃容器。
[0009]作为优选，为了快速带走搅拌过程中产生的热量，所述冷却水进口位于所述夹套的下部，所述冷却水出口位于夹套上所述冷却水进口相对侧的上部。
[0010]发明提供的抗原乳化方法包括以下步骤:
I)安装抗原乳化设备，包括乳化容器、上盖、搅拌杆、刀头和夹套，所述乳化容器包括细长的颈部和球状的底部，所述搅拌杆伸入乳化容器中，所述刀头安装于搅拌杆的底端并位于所述乳化容器底部的中心，所述乳化容器置于夹套中，所述夹套上开有冷却水进口与冷却水出口，所述乳化容器和夹套的顶部分别与所述上盖密封连接，所述搅拌杆的顶部穿过上盖;
2)将佐剂和抗原注入所述乳化容器中；
3)将冷却水循环管连接到所述冷却水进口和冷却水出口；
4)在搅拌杆的顶端连接电机，启动电机带动搅拌杆和刀头旋转。
[0011]作为优选，为了达到更好的乳化效果，所述步骤2)中所述佐剂与抗原的体积比为I ?3:1。
[0012]作为优选，为了提高搅拌头与抗原和佐剂的接触率，所述步骤2)中所述抗原和佐剂的体积之和为乳化容器底部容积的3/5?4/5。
[0013]作为优选，为了缩短乳化时间并避免抗原损害，所述步骤4)中电机的转速为8000 ?lOOOOrpm。
[0014]有益效果:本发明通过在球状容器内高速搅拌的方法乳化抗原，解决了现有乳化方法抗原的损失大、乳化不完全、费力、破坏抗原的问题；利用夹套中冷却水的循环流动对乳化容器降温，避免搅拌中温升对抗原的免疫原性的破坏；而且高速搅拌的乳化速度快，可以根据抗原的体积选择不同大小的乳化容器，可乳化从Iml到IOOOml不等体积的抗原。
【专利附图】
【附图说明】
[0015]图1是本发明的实施例的结构示意图；
图中:1乳化容器，2上盖，3搅拌杆，4刀头，5夹套，5-1冷却水进口，5-2冷却水出口，6电机。
【具体实施方式】
[0016]实施例:本实施例的抗原乳化设备如图1所示，包括乳化容器1、上盖2、搅拌杆3、刀头4和夹套5，其中乳化容器I由玻璃制成，具有细长的颈部和球状的底部，安装于搅拌杆3底端的刀头4呈S形，搅拌杆3伸入乳化容器I中并使刀头4位于乳化容器I底部球状的中心处。由塑料制成的夹套5套于乳化容器I外，两者之间形成用于通过冷却水的间隙。在夹套5的下部开有冷却水进口 5-1，其上部开有冷却水出口 5-2，夹套5和乳化容器I的顶部均与上盖2密封连接，搅拌杆3的顶部穿过上盖2并与上盖2外部的电机6传动联接。
[0017]使用时，选用底部容积为60ml的乳化容和相应大小的刀头，在乳化容器中加入20ml弗氏佐剂和20ml人载脂蛋白B (ApoB)抗原溶液，轻轻摇匀后安装到上述乳化设备中，接通冷却水管，启动电机并调速至IOOOOrpm，高速搅拌4分钟，取出乳剂观察，呈良好的油包水型乳剂，非常均一。
[0018]为验证本实施例新型乳化设备的效果，我们用注射器混合法制备了一些抗原乳剂进行对比，并免疫动物，采血检测抗体水平，观察不同方法制备的抗原乳剂的效果。
[0019]注射器混合法:用两只20ml —次性注射器，分别吸入IOml弗氏佐剂和IOml人载脂蛋白B (ApoB)抗原溶液，将两注射器用细胶管连接，两人分别交替推动注射器，使佐剂和抗原混合，开始时较易推动，越往后越难推动注射器，形成的乳剂粘住注射器活塞，极其紧密，阻力非常大，约30分钟，佐剂和抗原才充分混合形成良好乳剂。
[0020]动物免疫:用上述两种方法乳化的乳剂分别免疫绵羊，注射器混合组免疫10只，乳化机乳化组免疫20只，每只羊均免疫2ml。
[0021]采血检测抗体水平:经过4次免疫后采血，分离血清,分别检测每只羊的抗体水平，结果如下:
羊抗人载脂蛋白B (ApoB)抗血清 检测记录
采血时间:2013 年 5 月迎日 检测时间:2013年5月21日
【权利要求】
1.一种抗原乳化设备，其特征在于包括:乳化容器、上盖、搅拌杆、刀头和夹套，所述乳化容器具有细长的颈部和球状的底部，所述搅拌杆伸入乳化容器中，所述刀头安装于搅拌杆的底端并位于所述乳化容器底部的中心，所述乳化容器置于夹套中，所述夹套上开有冷却水进口与冷却水出口，所述乳化容器和夹套的顶部分别与所述上盖密封连接，所述搅拌杆的顶部穿过上盖。
2.根据权利要求1所述的抗原乳化设备，其特征在于:所述刀头是中心对称的S形刀头。
3.根据权利要求1所述的抗原乳化设备，其特征在于:所述夹套是塑料夹套，所述乳化容器是玻璃容器。
4.根据权利要求1所述的抗原乳化设备，其特征在于:所述冷却水进口位于所述夹套的下部，所述冷却水出口位于夹套上所述冷却水进口相对侧的上部。
5.一种抗原乳化方法，其特征在于包括以下步骤: .1)安装抗原乳化设备，包括乳化容器、上盖、搅拌杆、刀头和夹套，所述乳化容器包括细长的颈部和球状的底部，所述搅拌杆伸入乳化容器中，所述刀头安装于搅拌杆的底端并位于所述乳化容器底部的中心，所述乳化容器置于夹套中，所述夹套上开有冷却水进口与冷却水出口，所述乳化容器和夹套的顶部分别与所述上盖密封连接，所述搅拌杆的顶部穿过上盖； .2)将佐剂和抗原注入所述乳化容器中； .3)将冷却水循环管连接到所述冷却水进口和冷却水出口； .4)在搅拌杆的顶端连接电机，启动电机带动搅拌杆和刀头旋转。
6.根据权利要求5所述的抗原乳化方法，其特征在于:所述步骤2)中所述佐剂与抗原的体积比为1?3:1。
7.根据权利要求5所述的抗原乳化方法，其特征在于:所述步骤2)中所述抗原和佐剂的体积之和为乳化容器底部容积的3/5?4/5。
8.根据权利要求5所述的抗原乳化方法，其特征在于:所述步骤4)中电机的转速为8000 ?10000rmp。
【文档编号】B01F3/08GK103446911SQ201310405815
【公开日】2013年12月18日 申请日期:2013年9月9日 优先权日:2013年9月9日
【发明者】徐志伟 申请人:镇江万山红遍农业园