生物触酶制剂及其制备方法与在除甲醛除异味中的应用与流程

文档序号:12350343阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种生物触酶制剂,其特征在于,由混合浓缩粗酶提取物、大豆氨基酸提取液及稀释保护剂按体积比2~5:1~5:100混合组成;

所述混合粗酶提取物为乳酸链球菌浓缩粗酶提取物、嗜热乳链球菌浓缩粗酶提取物、罗伊氏乳杆菌浓缩粗酶提取物按比例1:1:1混合构成;

所述乳酸链球菌浓缩粗酶提取物、嗜热乳链球菌浓缩粗酶提取物、罗伊氏乳杆菌浓缩粗酶提取物的制备方法为:

(1)将乳酸链球菌、嗜热乳链球菌、罗伊氏乳杆菌使用LB培养基在37℃进行活化,得到浓度为108CFU/mL的乳酸链球菌微生物活化液、嗜热乳链球菌微生物活化液及罗伊氏乳杆菌微生物活化液;

(2)将步骤(1)制得的乳酸链球菌微生物活化液、嗜热乳链球菌微生物活化液及罗伊氏乳杆菌微生物活化液分别在LB培养基中接种,接种量为所述LB培养基体积的1~3%,培养24h,摇床转速为140rpm,得到乳酸链球菌种子液、嗜热乳链球菌种子液、罗伊氏乳杆菌种子液;

(3)以脱脂乳为培养基,将步骤(2)制得的乳酸链球菌种子液、嗜热乳链球菌种子液、罗伊氏乳杆菌种子液分别进行连续发酵,发酵温度为30~37℃,发酵时间为40~48h,,得到乳酸链球菌发酵液、嗜热乳链球菌发酵液、罗伊氏乳杆菌发酵液;

所述种子液的接种量为所述脱脂乳培养基体积的5%;

(4)将步骤(3)制得的乳酸链球菌发酵液、嗜热乳链球菌发酵液、罗伊氏乳杆菌发酵液分别过200目筛后,采用凝胶层析柱和离子交换层析柱进行提纯,随后采用200KD超滤膜包进行超滤,收集截留液;将所述截留液与4℃预冷乙醇按体积比1:2.5混合,在4℃条件下、10000r/min离心10min,除去上清液,收集沉淀;将所述沉淀与0.1mol/L的醋酸缓冲液按质量体积比1:50~100(g/mL)的比例混合至沉淀溶解,即得乳酸链球菌浓缩粗酶提取物、嗜热乳链球菌浓缩粗酶提取物、罗伊氏乳杆菌浓缩粗酶提取物;

所述稀释保护剂为甘露醇、可溶性淀粉、乳糖、海藻糖中的一种或几种组合,以水为溶剂稀释,得到稀释保护剂。

2.根据权利要求1所述生物触酶制剂,其特征在于,所述稀释保护剂的质量配比为2~4%甘露醇,1~2%乳糖,1~3%可溶性淀粉、2~5%海藻糖,86~93%水。

3.权利要求1所述生物触酶制剂的制备方法,其特征在于,具体步骤如下:

S1、乳酸菌浓缩粗酶提取物的制备:

(1)将乳酸链球菌、嗜热乳链球菌、罗伊氏乳杆菌使用LB培养基在37℃进行活化,得到浓度为108CFU/mL的乳酸链球菌微生物活化液、嗜热乳链球菌微生物活化液及罗伊氏乳杆菌微生物活化液;

(2)将步骤(1)制得的乳酸链球菌微生物活化液、嗜热乳链球菌微生物活化液及罗伊氏乳杆菌微生物活化液分别在LB培养基中接种,接种量为所述LB培养基体积的1~3%,培养24h,摇床转速为140rpm,得到乳酸链球菌种子液、嗜热乳链球菌种子液、罗伊氏乳杆菌种子液;

(3)以脱脂乳为培养基,将步骤(2)制得的乳酸链球菌种子液、嗜热乳链球菌种子液、罗伊氏乳杆菌种子液分别进行连续发酵,发酵温度为30~37℃,发酵时间为40~48h,得到乳酸链球菌发酵液、嗜热乳链球菌发酵液、罗伊氏乳杆菌发酵液;

所述种子液的接种量为所述脱脂乳培养基体积的5%;

(4)将步骤(3)制得的乳酸链球菌发酵液、嗜热乳链球菌发酵液、罗伊氏乳杆菌发酵液分别过200目筛后,采用凝胶层析柱和离子交换层析柱进行提纯,随后采用200KD超滤膜包进行超滤,收集截留液;将所述截留液与4℃预冷乙醇按体积比1:2.5混合,在4℃条件下、10000r/min离心10min,除去上清液,收集沉淀;将所述沉淀与0.1mol/L的醋酸缓冲液按质量体积比1:50~100(g/mL)的比例混合至沉淀溶解,即得乳酸链球菌浓缩粗酶提取物、嗜热乳链球菌浓缩粗酶提取物、罗伊氏乳杆菌浓缩粗酶提取物;

S2、大豆氨基酸成分提取:

(1)将大豆与水按质量体积比为1:4~6(g/L)的比例混合,常温浸泡4~8h,研磨、过200目筛,获得大豆匀浆;

(2)随后采用超声破碎方式将步骤(1)制得的大豆匀浆破乳分层,超声功率为140~160W,提取温度为46~50℃,提取时间为41~50min,得到破乳匀浆;将所述破乳匀浆在8000r/min条件下离心20~30min,去除上层油脂,收集水相,即为大豆氨基酸提取液;

S3、稀释保护剂制备:

稀释保护剂的成分包括甘露醇、可溶性淀粉、乳糖、海藻糖中的一种或几种组合,以水为溶剂稀释,得到稀释保护剂;

S4、将步骤S1制得的乳酸链球菌浓缩粗酶提取物、嗜热乳链球菌浓缩粗酶提取物、罗伊氏乳杆菌浓缩粗酶提取物按1:1:1混合,得到混合粗酶提取物;

将所述混合粗酶提取物与步骤S2制得的大豆氨基酸提取液、步骤S3制得的稀释保护剂按体积比2~5:1~5:100混合,得到生物触酶制剂。

4.根据权利要求3所述生物触酶制剂的制备方法,其特征在于,所述稀释保护剂的质量配比为2~4%甘露醇,1~2%乳糖,1~3%可溶性淀粉、2~5%海藻糖,86~93%水。

5.权利要求1所述生物触酶制剂的应用,其特征在于,用于除甲醛及异味。

6.根据权利要求5所述生物触酶制剂的应用,其特征在于,所述除甲醛及异味的具体操作步骤为将制得的生物触酶制剂装罐、喷涂;

喷涂量≥10mL/m3,喷涂距离距目标物体表面距离为30~40cm。

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