专利名称：用于血液分析光学装置的槽，装备有这种槽的分析设备的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种用于光学装置的流过型槽，适合于在自动血液分析 设备中计数和鉴别白细胞。其还涉及一种装备有这种槽的分析设备。
背景技术：
通过血样分析通常致力于测定 -白细胞的总数；
-更具体地说，通过亚-种群(嗜碱细胞，嗜酸性细胞，中性白细胞， 单核细胞和淋巴细胞)的白细胞数； -红细胞和血小板的数目；以及 -血红蛋白水平。 已知多种分析技术，特別是
-血红蛋白测定在红细胞溶解之后执行，也就是破坏红细胞的细胞 膜，并且通过在培养基中释放的血红蛋白的分光光度测量法测定；血红 蛋白的测定还需要血红蛋白以一种复合形式(氧合血红蛋白或氰化正铁 血红蛋白(cyanmethemoglobin))稳定，以便在适当的波长测定单个化 合物的吸收率。
-白细胞总数通过实施特定溶解红细胞并保护白细胞在血样上由抵 抗性数出白细胞的总数，
-通过亚-种群对白细胞的鉴别以及对其的计数是这样进行的
-在特定溶解红细胞，保护白细胞并调节pH之后，通过抵抗性容 积测量进行；然而这不能在单次的分析中鉴別所有的亚-种群；
-或者通过光学方式，具体地通过流式血细胞计数进行；在特定溶 解红细胞并保护白细胞之后，在白细胞流上在较窄、中等和较大角的轴 中，并且可选择地在加入示踪剂(例如氯唑黑，或者DNA或RNA示踪 染剂，或者荧光剂)后，通过测定不同的参数(具体地衍射率、荧光率、 吸收率)，并且通过在不同的波长测定而进行；这种方法允许区分白细 胞亚-种群的鉴别。
-红细胞和血小板计数通过;fe抗性测量在稀释的样品上进行，不需
要加入特定的试剂。
存在许多的自动血细胞分析仪，其使用所述技术以便获得尽可能完 全的血样分析。
在这些自动设备中，传统地同时存在两个不同的分析回路 -第一回路，设计用于测定血红蛋白和/或计算白细胞总数；以及 -第二回路，设计用于对血样执行鉴别和/或通过流式血细胞测量术 计数白细胞。
每个回路特征为适合于所用测量装置的血样稀释率、加入一种或多 种试剂以及 一 些用于执行和测量的适当装置。
因此，对于血红蛋白的测量和白细胞的计数来说，回路典型地包括 所谓的计数槽，在其中血样被稀释，在其中加入试剂，所述试剂具体包 括红细胞溶解化合物、对由血红蛋白和白细胞保护(leucoprotective)化 合物形成的混合物进行稳定的稳定化合物，并且直接在这个计数槽中测 定下面的内容通过分光光度测定法测定血红蛋白，并且通过抵抗性测 定白细胞数.稀释率选择为使得分析溶液优选为同质的，并且使得测定 设备不会饱和。这个稀释率在1/10(yh-l/50(^之间， 一般在1/160'h-l/l 80th 之间。
对于通过流式细胞测量术的白细胞鉴別来说，回路使用一个用于稀 释血样的槽，其中加入一种或多种试剂，包含红细胞溶解剂，可选择地 包含鉴別剂(例如DNA或RNA白细胞荧光彩色剂)，然后取这个溶液 的一部分以便将其注射进入流式细胞测量术的循环光学槽中。此处使用 的稀释率小于l/100th,允许由目前市场上能够获得的血细胞计数器(液 压动力聚焦型)得到最佳的分析时间。
因此，常规地，通常为两个分析回路必须使用两种不同的试剂，并 且在这两个分析回路中执行血样的不同稀释。
制造商的主要目的是通过减少化合物和试剂的数目来简化现有的 自动设备，能够节省生产和维护成本并减小自动设备的尺寸，而不会减 少一次完全血样分析的时间。
本发明具体旨在实现这些目的.
为此目的的文献WO 2004/003517提出了一种方法和设备，其中两 个分析回路具有公用的装置。原理为在一个单独的稀释槽中执行血样的 第 一次稀释，并且将部分选定容量的这个稀释液连续输送到测量或计数
单元，以便每次测量或计数血样中所含的不同无素。为了执行完全的分 析，也就是计数红细胞和血小板、计数白细胞、测量血红蛋白和白细胞 鉴别，该文献描迷了下面的解决办法使用第一次输送以计数红细胞和 血小板，加入溶解剂到稀释槽中，然后执行第二次输送以计数白细胞， 执行溶解后稀释溶液的第三次输送以测量血红蛋白水平，加入白细胞鉴 别剂，并执行第四次输送以在测量单元中实现白细胞鉴别，
这个原理能够使用单独的所谓的稀释槽，但其不能节省分析次数， 因为测量或计数在部分稀释液的每次输送之后连续执行.此外，它需要 完美控制连续试剂和被分配的稀释液的容量以及输送给测量单元的稀 释液的容量。此外，它还需要使用多个注射器和溶解剂。
本发明的目的也是克服这种缺陷。
发明内容
根据第一目的，本发明涉及一种用于自动分析血样的方法，以及一 种用于执行这个方法的单-试剂和设备。 根据本发明的方法特征在于 - 一种分析溶液，包含所述血样、稀释剂，和 -至少一种溶解红细胞的化合物； -至少一种保护白细胞的化合物；以及
-至少一种生色复合体形式的稳定血红蛋白的化合物；形成于一个 单独的稀释和分析槽中，
-在所述槽中在溶解红细胞之后，在这个分析溶液中通过分光光度 测定法测得血红蛋白水平；以及
-适量的这个分析溶液从所述槽取出，通过光学装置对其执行白细 胞鉴别，
白细胞的计数可以在分析槽中共同进行和/或由光学装置进行。 红细胞的计数以及可选择的血小板的计数例如可以在该方法的前 一步骤中，对从唯一 的稀释和分析槽中取出的样品进行.
因此，本发明基于这样的观念所用的唯一的分析溶液例如用于两 种类型的分析，它们通常在两个独立的回路中执行，也就是一方面测量 血红蛋白并且可选择地计数白细胞> 另 一方面通过光学装置鉴别白细 胞，所述分析溶液混合了 "试剂"化合物，该试剂化合物借助于它们的 性质和它们的数量能够至少执行这些分析。引入的试剂化合物这样选 择，其互相化学相容并且在数量上适于目标分析。它们可以选自现有技 术中典型使用的化合物。也可能使用一种通常用于执行白细胞鉴别的商 业配方，也就是包含用于溶解红细胞的化合物和白细胞保护化合物，并 且为其加入生色复合体形式的用于稳定血红蛋白的第三试剂化合物。
由于这个单一的分析溶液，本发明具体地具有下面的优势
-自动分析设备可以包括一个单独的槽用于准备分析溶液，
國血红蛋白测量可以直接在这个槽中进行，并且也可以通过分析溶 液的抵抗性测试进行白细胞的全计数；
-有可能使用单-试剂，其混合了对血红蛋白测量和通过光学装置对 白细胞鉴別所需的全部"试剂"化合物；这具体地允许简化液压回路， 其将从下文中看出；
-可以在单独的稀释液和分析槽中执行血样的单-稀释，稀释率由所 用的测量方法和检测装置确定。单-试剂可以用作用于执行这个单-稀释 的稀释剂。优选地，选择稀释率为1/100th-l/50C^之间，对应于血红蛋白 水平测试所需的稀释率，也优选约1/175&的稀释率(在下面给出的实施 方式中为l/173th)。
由于可能使用单-稀释剂和单-试剂，由于本发明的第一方面，因此 有可能大大简化分析设备，同时仍然提供血样的完整分析。
根据本发明还提出了用于光学测试的装置，其允许在高于l/100'h 稀释率时分析白细胞(通过亚-种群计数和鉴别)，其在下文中限定和描 述.
本发明还提出了 一种执行^t艮据本发明方法的溶解单-试剂，其特征在
于，包括
-至少一种溶解红细胞的化合物；
-至少一种保护白细胞的化合物；以及
-至少一种生色复合体形式的稳定血红蛋白的化合物。
这种单-试剂允许通过分光光度测定法测量血样的血红蛋白浓度以
及通过光学装置进行白细胞鉴別。它还允许进行抵抗性和/或白细胞的光
学计数。优选地其选择为使得能够至少鉴別5个亚-种群。优选地其选择
为使得不包含氰化物。
根据本发明，用于溶解红细胞的化合物优选由至少一种阳离子表面.
活性剂构成。在本身已知的在先方式中，选择形成一种氧合血红蛋白复 合体(与包含氰根离子的氰化正铁血红蛋白相比它是无毒的)。因此阳 离子表面活性剂选择为使得还氧化释放的血红蛋白，以便仅形成氧合血 红蛋白复合体。因此阳离子表面活性剂的数量选择为使得有效地使红细 胞溶解并且氧化被释放的血红蛋白。它优选选自
-季铵盐，优选烷基三甲铵盐，更优选为十六基-、十二烷基、十四 烷基和十六烷基三甲铵的溴化物和氯化物；
-'比咬盐；
-长链乙氧化胺；以及 -烷基硫酸盐(SDS )。
根据本发明的白细胞保护化合物是一种延迟或防止白细胞破坏的 化合物，优选它是一种选自下面的非-离子或两性表面活性剂
-乙氧基化醇，具体是2-苯氧基醇，聚氧乙烯烷基苯基醚，例如商 品IPEGAL990 , TERGITOL NP9 , TRITON XI00或者XI14， plumfac A38或者Brij35 );
-季铵的甜菜碱和磺基甜菜碱，具体是丙基氨基月桂甜菜碱 (LAB)、以及十二烷基二甲基-3-胺基-l-丙烷磺酸盐(DDAPS)或者 十四烷基二甲基-3-胺基小丙烷磺酸盐(TDAPS);
叔胺氧化物，例如N,N-二甲基十二烷醇野芝麻花碱-N-氧化物 (LDAO )或者3-[( 3丙基氨基胆汁)-二曱基氨基-]-l-丙烷磺酸盐(CHAPS 或者CHAPSO);
-葡糖苷类型的化合物，更具体地为三碎皂苷； -糖类型的化合物(甘露醇、D-葡萄糖、海藻糖、葡聚糖减酸盐)。 生色化合物形式的稳定血红蛋白的化合物优选选自 國单或多配位基的螯合物，具有配位子(非-结合对0, N, S和 共-羧基COO-等)，具体是
-乙二胺四乙酸(EDTA )盐或者乙烯乙二醇-二-( 3-氨基乙醚)N-N'-四乙酸(EGTA)盐，以及特别是它们的二钠或二钾盐； -草酸钾K20xOx-C2042—; 羟胺盐(优选氢化亚氯酸盐)以及 -有机酸(具体为蚁酸或者乙酸)。
-芳族化合物(单或多配位基的螯合物)，包括配位子(具有非-
结合对0, N, S等)，具体是 -Tiron
-8-羟基喹啉及其衍生物；
吡咬或双吡咬以及它们的衍生物；
1,10-菲咯啉及其衍生物；
酚类化合物(单或双，以及它们的衍生物)； ■吡唑和/或吡唑啉酮以及它们的衍生物； -咪唑及其衍生物； .磧基水杨酸；以及
-皂角苷，叔胺氧化物，四元铵的甜菜碱和磺基甜菜碱(例如 DDAPS, TDAPS, LAB)。
除了根据本发明限定的三种化合物以外，有可能加入下列(多种) (单)-试剂
-至少一种染剂(或混合物)，具体标识某些白细胞，更具体为嗜 酸性细胞(或嗜碱细胞)，以便能够区别至少5种主要的白细胞亚-种群， 选自
花青素苷； 恶嗪750;
Wright和Romanowsky试剂j
DAPI;
Clorazole black E; -甲苯胺蓝；
Astra Blue;
■逸唑橙G.或蓝 ■其他的荧光剂。
-至少一种能够硬化白细胞细胞膜的固定剂，其优选是醛，更具体
地为戊二搭或者甲眵；
-至少一种湿润剂，用于最优化流体并防止形成也能用作碎片增溶
剂的气泡，选自
乙醇(甲醇乙醇或者丙烷-2-醇或酚)； -乙二醇(乙烯或者丙二醇)；
-乙氧基乙二醇(具体为TritonX100⑧或者Brij35⑧)；
-配糖化合物TWEEN80⑧或者TWEEN20 ;
严格限制固定剂和增溶剂的浓度，因为 一旦超出将阻止红细胞的漆 解并改变白细胞的光学特征；以及
- 一个緩冲系统，用于将pH值设定在5.0-10.0之间，优选在6.0-8.0 之间，并且最优地接近中性(7.0±0.4 ).选择这样一个pH值的目的是 遵守细胞的原始环境。此外，这个pH值允许根据本发明实施的组分的 更好的溶解，所述緩冲剂由通过盐酸或者苏打(4-6N)调节至上述pH 值的一对盐(无机或者有机)构成，选自
磷酸二氮/磷酸氢钠或者钟H2PCV/HP042—;
-碳酸氢钠/碳酸钠NaHC03/Na2C03
.柠檬酸/柠檬酸钠(III)緩冲剂
-TRIS-HCI
-三乙醇胺(TEA)
.咪哇
-选自下面的一种酸
.有机酸笨二甲酸、磺基水杨酸或者蚁酸，其也用于血红蛋白生 色化合物的形成和稳定)；以及 -无机酸HCI, H3P。4等'
- 一种基底盐，确保抵抗性测试所需传导率为10-50 ms/cm,摩尔渗 透压浓度为120-500 mOsm并优选接近等渗性(290±5 mOsm ),选自
-氯化钠NaCl; -氯化钾KC1; -氯化镁MgCl2; -氯化钙CaCl2; --危酸钠Na2S04;
这个基底盐能够被包含在緩冲系统中；
隱至少一种防腐剂，具有抗氧化剂、和/或抗生素特性，选自 -2-苯氧基乙醇； 对鞋苯甲酸； .BHT;
异硫氮杂茂(isothiazolone ) ( Proclin 150或者300 ); 咪唑或者尿素衍生物； 抗生素；
- 一种天然的抗生素细胞穿透化合物(离子载体)，其也促进染剂 或者多种染剂的穿透，选自
-NH/的离子载体I ( nonatine);
Ca^的离子载体I11 ( calcimycine); -Cl—的离子栽体；
K*的离子载体I ( vali加mycine );
本发明的组分在下面的表中概括给出，同时还给出了适当的浓度幅
组分量
阳离子表面活性剂(溶解剂)0.1-50 g/L
白细胞保护表面活性剂0.1-20 g/L
螯合的血红蛋白复合物0細1-10 g/L
染剂0.01-1 g/L
固定剂0.01-2% w/v
湿润剂0-50% v/v
緩冲剂0-6 g/L
基底盐1-50 g/L
酸适当量以调节pH值
防腐剂适当量0.1-3 g/L
离子载体有效量0-200 mg/L
蒸馏水qsfQsf 1 L
本发明也提议一种用于执行根据本发明方法的设备，其特征为
- 一个分析槽，其能够收容所述分析溶液；
-一个在所述槽中通过分光光度测量法用于测量所述分析溶液中存 在的血红蛋白水平的装置；
- 一个用于取样所述分析溶液的装置；
-一个用于对所述样品进行光学测量的装置，以便进行白细胞分析。
根据第二目的，本发明涉及一种用于血样自动分析的自动设备的光
学装置，特别有优势地，也用于执行根据本发明第一目的的方法。
如上所述，白细胞的某些亚-种群仅可以通过光学测量鉴别，例如细 胞以一个或多个角度衍射的测量，或者细胞的吸收测量。血细胞的特征 化光学系统具有 一个共用的底座，在其中设置一个光源，发出光束； 一个光学槽，在其中血细胞穿过光束； 一个用于调节在细胞流的光束的 系统；以及一些用于测量源自光学槽的被细胞阻挡之后的光的装置。具 体地，在白细胞特征化的情况中，白细胞在槽中以液流移动。它们在其 中被聚焦在该液流上的光束照亮，该液流被称作样品流。
这种装置是昂贵的；具体地，激光器用作光源，它们体积较大并且 通常需要散热系统；作为激光器的激光二极管需要昂贵的对准系统。由 这些光源发出的光束具有的光线横截面分布近似为高斯形状。因此，强 度仅在射线的狭窄中央部分近似保持不变和达到最大.对准系统使这个 中夹部分对准样品流。此外，样品流的宽度不必须超过这个中央部分的 宽度，并且这两个宽度越接近，则对准系统必须同样达到更高的精度. 因此，必须尽可能地减小样品流的宽度。
光线越聚焦，包含需要计数和Z或需要鉴别的血细胞的样品流必须越 窄。因此，使用橫截面宽度小于50pm的液流，其必须穿过光束，所述 光束本身被聚焦成横截面大于样品流横截面的光束。这需要特别精密和 因此昂贵的系统，用于将该液流注射进入光学槽中。在现有技术中，使 用液压动力聚焦类型的系统(英文表达"hydrodynamic focusing"的缩 写)获得这种结果。样品流被套管流环绕。用于样品流的注射器浸没在 套管流的中心.因此产生的样品流随其从注射器运动到由光束照亮的区 域被拉伸或者聚焦，因此在该点，其直径具有期望的约为5-50nm的宽 度。为了实现这个目的，有时需要一个单独或者双层的套管。
此外，如前面所述的，根据所需的给定精度水平， 一个调节系统对 于使细胞流与光束重合来说是必需的，可以有两种方法可以移动细胞 流或者光束'如果选择移动血细胞流，所有的光学槽单元必须移动。当 采用这个选择时，槽安装在一个平移台上，由于其滚珠轴承而确保沿着 两个轴线的精确和均匀移动。这种精确机械组件非常昂贵。也可以移动 光束以便使其与血细胞流重合。这通常使用多个可调节的透镜实现。这 个解决方法也要求较高的成本，其将光学元件与精密机构组合在一起.
此外，当其越过光束时，血细胞偏转光束轨迹。偏转光线的强度和
角度提供需要获得的细胞类型信息。通常使用两个角度范围相对于光 轴小于10度的小角，以及近似垂直于光轴的大角度。在小角的范围中， 两个信息是有用的轴中的损失和衍射。垂直于光轴地，通常测得反射 和荧光性。对于两个角度范围，光线因此必须分布在两个不同的通道 中，这一般地由分色镜或者由干扰滤光片获得。光学部件都通过将薄膜 沉积在玻璃基质上产生。它们具有良好的功效，但在一个过滤器和另一 个过滤器之间存在较大的不同，并且它们的使用寿命有限。它们因此必 须定期更换。
所有这些通常体积较大的装置也是易碎的并且需要维护，这也非常 昂贵。这种装置因此限制于分析实验室，它们足够大以致能够投资这种 自动设备。
本发明的目的在于提供一种用于白细胞鉴别和/或白细胞计数的装 置，其结构简单并且制造和维护都更加经济，能够使用自动设备，即使 是小型的实验室也能够装备这种装置，同时保持足够的测量品质。
根据本发明的第二目的，提供一种在自动血液分析仪中用于白细胞 计数和/或鉴别的光学装置，特征在于其包括电致发光二极管类型的光 源，以便使用光源光束照亮在光学槽中沿注射轴循环的血样。这种二极 管能够获得在其横截面宽度上更加均匀的光束，并因此获得更大和更均 匀的读取区域。
优选地，二极管发射波长小于600毫微米的光线，更优选地小于500 毫微未。这种波长具有更好的衍射效率，因此对使用衍射的测量具有更 好的精度。
此外，由光学装置发出的光束的宽度，也就是照亮样品流的光束， 有优势地在50-200微米(n.m)之间，接近注射轴，从而能够照亮更宽 的样品流，同时对于进行的测量具有足够的精度。仍然更有优势地，其 宽度在90-120微米之间。这种光束宽度具体通过使用电致发光二极管而 被允许.
优选地，光源光束近似地在槽的方向中发射，近似横向于样品流动 的方向。设置一个透明玻片用于光束在其两个相对表面之间穿过，其可 旋转安装并设置在二极管和槽之间，当光线穿过玻片由于其两次折射， 能够允许光束在横向方向中移动。玻片的旋转允许改变玻片上光束的入 射角，并因此调节横向位移的值。优选地> 透明玻片绕一个大致平行于
槽中血样移动方向的轴线可旋转地安装。
在光学槽之外，有优势地使用Fresnel光损分离装置，用于源自光 源光束的入射生成光束，因此将所迷光束分成一个轴向生成光束和至少 一个由Fresnel光损产生同时穿过分离装置的光束。分离装置包括至少 一个分离表面，其是一种透明分离材料的一个表面，轴向光束穿过透明 材料，源自Fresnel光损的光束由分离表面反射，所述表面相对于槽外 的光束倾斜。 一个普通的便宜的玻璃片可以用作分离装置。此外，其具 有接近无限制的使用寿命，不用维护不像分色镜或千扰滤光片。
所述装置也可以包括一个用于测量轴向-生成光束的光线的设备，以 及至少一个用于测量至少一个源自Fresnel光损的光束的光线的其他设 备。这些测量设备包括用于测量荧光性、靠近轴的光损和靠近轴的衍 射。
其也可以包括用于测量由槽中样品衍射的大角度光束的装置。例 如，这些大角度可以是60。-150。之间的角度。
装置也可以在槽前面在光束路径中包括至少一个用于寄生光线的 停止隔膜。
本发明还涉及一种血液学设备，具体地涉及一种装备有这种装置的 自动血液分析仪。
根据本发明的第三方面，本发明还涉及一种流过型光学槽，用于适 于白细胞计数和鉴别的光学装置，例如流式血细胞计数器，以及一种装 备有这种槽的分析设备，本发明的目的在于提供一种槽，其结构筒单并 且生产和维护更加经济，能够被小型实验室使用装备有这种槽的自动设 备，同时保持足够的测量品质。
根据本发明，用于在自动血液分析仪中适于白细胞计数和鉴別的光 学装置的流过型槽，特征在于在槽的分析区域中，槽的横截面具有至 少在1-5毫米之间的横向尺寸。这个横截面可以近似为矩形的，并且横 向尺寸可以在矩形的一侧和/或另外一侧上测量。
这种槽因此可以，至少部分地，由注塑的塑料制成.与现有技术的 槽相比，现有技术的槽一般由石英壁形成通过粘结组装，本发明的槽以 持別有优势的方式生产。
槽还可以包括至少一个与槽模制成一体的透镜。这个至少一个的透 镜包括一个用于相对于光轴横向设置的透镜。其可以包括半球形透镜。
沿着光轴，槽可以包括一个用于引入光束的窗口和一个用于光束离 开的窗口。至少一个窗口可以与槽模制成一体和/或被插入在透明材料 中，例如石英或玻璃。
槽有优势地包括一个用于样品流的注射器和用于绕注射液流形成 套管流的装置。注射器包括出口孔，其直径在20-150微米之间，能够获 得明显大于现有技术液流的样品流。与现有技术的装置不同，不是套管 流通过将其拉伸而限定样品流的宽度，而是注射器出口的形状和橫截面 限定。因此套管流不扮演主动角色，而仅仅是被动角色，具体地，例如 对于在一个较宽槽中样品流的对中来说。
根据第 一 实施方式，这个注射器可以由 一种大致刚性的材料中形成 一个整体件。这个材料例如可以是不锈钢、陶资、人造红宝石或塑料或 者这些材料中的多个。
根据第二实施方式，这个注射器可以包括一个刚性结构管，例如由 金属制成，例如由不锈钢制成，并且在结构管内部， 一个塑料套装管延 伸出一个喷嘴，其与该塑料套装管形成一个整体件。注射器的塑料可以 是聚四氟乙烯，其使样品在管中的流动更容易并且减少积垢的风险。
本发明还涉及一种用于本发明槽的';主射器，其注射器根据这些实施 方式中的一个被生产。
本发明还涉及一种血液学设备，具体地为自动血液分析仪，装备有 根据本发明的槽。
根据第四目的，本发明还涉及一种用于血液分析设备的液压装置， 其结构简单并且生产和维护更经济，并且其使小型实验室能够使用装备 有这种装置的自动设备，同时保持足够的测量质量。本发明还涉及一种 适于这种装置的分析方法。
本发明因此提供一种用于血液分析设备的液压装置，血液分析设备 具体地为自动设备，包括用于将样品流加压注射进入一个流过型光学槽
并用于在样品流周围由套管液体产生液体套管流的装置，特征在于其 包括用于相对于套管流的流速调节样品流流速的装置。这种调节使其能 够保持槽中的均匀和近似无-湍流。
注射装置可以包括注射器、液压回路和电^f兹阀.这些装置可以包括 用于相对于套管流将样品加压注射的装置。
这个装置有优势地包括一些用于构成活塞的装置，该活塞用于与一
种移位流体一起被注射的样品。这种移位液体允许仅使用对分析而言足 够的少量样品 > 注射所需的剩余液体为在分析设备中能够获得的液体， 不像样品那样珍贵。
当使用 一个具有较宽横截面的槽，同时维持样品流的较小横截面， 套管特别有用。在相对套管流调节样品流的装置中，该装置有优势地包 括用于相对套管液体流速调节移位液体的流速的装置。调节装置可以包 括用子移位液体支路中压降的装置和/或用于套管液体支路中压降的装 置。例如，压降装置可以选自已知长度的标准管、固定的流体阻力和变 化的阻力。
液压装置可以仅包括一个动力源，例如一个单独的电才几，以便同时 产生样品流和套管流。此外，其可以包括至少两个注射器，用于产生样 品流和套管流，注射器活塞互相固定连接。因此它们具有共同的运动， 并且样品和套管流实际上同步。
具体地，可以使用现有技术的液压动力聚焦槽，其具有如前所述的 本发明的回路，样品注射进入这个槽可以相对于套管流没有压力地进 行。根据本发明，还提出一种用于在流过型血细胞计数器中分析血样的 方法，特征在于血样，可选择地在压力下，被注射进入血细胞计数器 的流过型槽中，样品在那形成样品流，在样品流周围由套管液体产生一 个液体套管流，特征在于样品流的流速相对于套管流的流速调节，
具体地，可将样品引入液压回路的注射支路中，并且在注射支路中 在样品上游引入一个移位液体，移位液体用作在将样品注射进入槽的期 间推动样品。这个移位液体可以选自试剂和稀释剂，优选试剂.为了进 行分析或解析，提供除了对制备样品所严格必须的液体之外的其他液体 是没有用的。
还可能在槽中的样品流周围由套管流产生一个套管流，这个套管液 体也可以选自试剂或稀释剂，优选为稀释剂。同样在这种情况中，为了 进行分析或解析，提供除了对制备样品所严格必须的液体之外的其他液 体是没有用的。
在使用液压动力聚焦方法或者根据本发明第三目的槽的情况中，相 对子套管液体的流速调节移位液体的流速是有优势的，例如通过在移位 液体支路中引入压降和/或在套管液体支路中51入压降装置.
在根据本发明的方法中，具体用于4艮据本发明第三目的的槽中，可
以容易地实现血样稀释率至少为1/100*。实际上，在这样的一个方法 中，样品可以相对于套管流加压引入到槽中，速度大于现有技术方法的 速度，并且对于槽中的样品流具有更大的横截面。因此，不用增加分析 时间，对于白细胞鉴别和计数，可以使用这样的稀释率，其与常规使用 的用于测量血红蛋白的相等，具体地稀释率在1/100*-1/500*之间，具体 在1/160*-1/180(|1之间。
本发明还涉及一种血液学设备，具体为一种自动血液分析设备，特 征在于其包括根据本发明的液压装置。
根据下面具体实施方式
的说明，该说明具体参照附图，本发明将被 更好地理解并且其它优势也将变得明显，其中
图1示意性图示了一个根据本发明第一目的的设备的实施例；
图2a-2e是根据本发明的方法通过分光光度测定法对血红蛋白测定 的线性测试图表；
图2f-2i是相应的细胞图3是自动设备的示意图，其用于根据本发明的第四目的使用液压 装置分析血样；
图4是根据本发明第二目的的光学装置单元的示意性纵视图5是图4光学装置更详细的示意性纵视图，其垂直于图4的平面；
图6根据本发明第三目的的光学槽的透视图7是用于根据本发明的光学槽的注射器第一实施方式的纵向剖面
图8是用于根据本发明的光学槽的注射器第二实施方式的纵向剖面
图9是图8注射器一端的纵向剖面图IO是槽的纵向剖面图，其图解了现有技术用于将血样注射入槽 中的方法；以及
图lla-llc是图表，分别图示了由使用本发明方法的自动设备获得 的结果，以及使用由根据本发明的光学装置和槽获得的结果，
具体实施方式
图1示意性示出了一个唯一的稀释和分析槽1，其能提供需要分析 的血样2、稀释剂3和试剂4，共同形成分析溶液。该槽1装备有用于 通过光度测定法测量在所述分析溶液中血红蛋白水平的装置5，以及用 于测量所迷分析溶液抵抗性以便计算白细胞总数的装置6。还提供一些 用于从分析槽1中取出一部分分析溶液的装置和用于将其注射入光学槽 7中的装置，所迷光学槽7装备有光学测量装置8 (例如流动血细胞计 数器)用于分析白细胞。根据所选的实施例，还提供用于取出一部分由 血液和稀释剂组成的样品预溶液并将其注入计数和稀释槽9中的装置， 所述计数和稀释槽9装备有用于测量所述部分溶液抵抗性的装置10，以 便计数红细胞和血小板。该设备通常装备有加热装置，以便获得约35 C的恒温控制温度。这个溫度允许溶解反应时间和最优的红血球溶解质 量。
该设备以下面的方式操作
-将一等分血液(15.6 ul)注入分析槽1中并用2 ml的稀释剂稀释 以便形成分析预溶液；稀释率为l/130th;
-从这个分析预溶液中取出非常少量的一部分(约20ul),并将其 沉积在槽9中用于计数红血球和血小板；
-然后在分析槽1中为剩余的预溶液加入0.7ml的试剂；溶解持续 约10秒(以便破坏红血球，形成并且使氧合血红蛋白复合体稳定)， 因此形成的分析溶液最终的稀释率约为1/173"1;取出一部分所述分析溶 液并注入光学槽7中，在那可以进行白细胞的分析(通过亚群对白细胞 计数和/或鉴别)；同时在分析槽l中，白细胞通过抵抗性测量被计数， 并且血红蛋白通过对形成的氧合血红蛋白复合体的波长的吸收而测 量-
在下面描述了本发明的光学装置，其特别适用于对稀释率低于 1/100111的分析溶液的白细胞分析，更具体地适用于1/160*和1/180*之 间的稀释。通常，1/160th的稀释率被认为低于1/100气
当然上面描述的方法和设备的变化实施方式都是可能的 -对于设备可以提供用于分别引入溶解化合物、白细胞保护化合 物和稳定在分析槽1中由血红蛋白形成复合体的化合物的装置，并因此 更多地以单-试剂的形式引入；用于测量分析溶液抵抗性的装置6是可选 择的；白细胞总数能够通过分析溶液的光学分析获得；类似地，计数槽9和用于测量这个槽中抵抗性的装置10仅在需要血样完全分析的情况 下才提供；
隱同样地对于该方法反应化合物可以单独引入或者全部代替单-试剂，引入可以同时或者连续进行；计数红细胞和血小板的前一步骤以 及白细胞总计的步骤可以被省略；此外，可以执行血样的两次连续稀 释；第一次稀释，其特别适用于白细胞鉴别(稀释至约1/80th)，在公 知的标准液压动力聚焦类型血细胞计数器中进行，白细胞鉴別所需的部 分从其中取出，然后在第二阶段适用于血红蛋白(在1/100*和1/500" 之间)测量的第二次稀释可以通过已知的分光计进行。
根据另 一种变化形式，槽1可以用于在第二阶段在清洁之后执行计 数红细胞和血小板，所述清洁通过由保持在注射器针头中的样品填充该 槽而进行。
现在将通过根据本发明的(单)-试剂的具体实施例描述获得的结
果
使用ABX公司的Eosi加fix⑧处方设计单试剂用于测量流式细胞光 度计中的白细胞，并且为此目的包含用于分析红细胞的化合物和白细胞 保护化合物(比较ABX公司的专利EP0430750 )。根据本发明，加入 稳定血红蛋白的化合物。
通过分光光度测定法测定血红蛋白
使用分光光度计在542 nm进行线性测试。在图2a-2e中显示了图 标。它们表示与期望浓度相关的测得的血红蛋白浓度。更具体地
-图2a对应于用于通过分光光度测定法测定血红蛋白的参照溶解 (ORPHEE 乂>司出售的LMG );
-图2b、 2c和2d对应于根据第4实施方式的单-试剂，其具有作为 血红蛋白复合体的安定剂，分别为试钛灵(Tiron) 、 DDAPS和异吡唑； 以及
-图2e对应于单独使用单-试剂Eosinofix②执行本发明的方法，也 就是不含根据本发明的血红蛋白复合体稳定剂.
对于根据本发明执行的三个测试，由1土1(T4的相关系数112对于每 一个测试可以获得一个阳性的线性测试(在附图中示出)，
通过对比，如图2e中所示，具有试剂(Eosinofix)没有血红蛋白安 定剂，不能获得线性关系.这意味着这个试剂不能单独用于测试血红蛋
白水平。
通过流式细胞光度计进行白细胞筌别
图2f-2i是使用BD FACScai^流式细胞光度计获得的细胞图，分别 对应于单独使用Eosinofix和为Eosinofix加入DDAPS、试钛灵(Tiron) 和异吡唑，在这些附图中，可以看出能真正地获得亚群的鉴别，并且其 以与白细胞鉴别标准试剂(在图2f中由Eosinofix获得的基体)相当的 方式获得。
也可以参照图llb的细胞图(其在下文描述)，其具体地由根据本 发明的血细胞计数器获得。
现在将描述根据本发明第四目的的液压装置。
图3部分地表示了液压回路100的示意图以及自动血液分析仪20 的一部分设备，由这些可以理解根据本发明的液压装置.
在图3中示出的自动设备具体包括用于将待分析血液取样在管中的 针101,所述管用于存储并运输到自动设备中。取出的血液由针以血样 的形式被注入槽102中。槽102具体被设计用于血样红细胞的稀释和/ 或溶解。在稀释之前或之后，可以取出血样的全部或部分以便在自动设 备的另外部分中进行分析，例如在装置120中，其将在下文中描述。用 于分析血红蛋白的装置110 (例如分光光度计)靠近槽102设置。用于 稀释产品的存储器103和用于试剂的存储器104通过液压回路100被连 接到槽102，所迷试剂具体为溶解试剂。
另 一个分析装置120更明确地用于，例如在从槽102取出的样品的 全部或部分上白细胞的计数和鉴别。在下文中样品也指这个全部或部 分。用于分析白细胞的装置120具体地包括光学装置200和光学槽邓0. 光学槽通过液压回路100连接到槽102.
一套注射器允许液体在液压回路中流动。在这些注射器中，表示出 了用于稀释的注射器105和用于试剂的注射器106,因此本发明可以被 很好地理解。其它的注射器没有示出，因为它们对于理解本发明不是必 需的，加上这些其它的注射器可以完整构成该装置。
除了用于液体循环的管路以外，液压回路包括用于在液压回路100 中根据其用途在特定的分析时刻转换不同回路的电磁阀。在图3中示出 了液压回路100的8个电磁阀111-119。每个电磁阀包括两个状态，其 分别用字母A或B标出。
如将在下面描迷的，液压回路的设计允许对于示出的注射器使用唯 一的动力源M。同样的动力源也可以用于其它的注射器，因此，注射器 10、 106的活塞被牢固地互相连接。因此它们的运动同步，即当它们被 推入各自注射器的注射器中时的推动P，还是当它们被抽出时的拉出 T。
现在将描述设置以及自动设备的液压搡作。
在主体301内部槽300包括外部主体301和注射器302在主体和注' 射器之间形成一个套管空间303。 液压回路100包括
-注射支路131,其在注射器的上游延伸，位于注射器和阀11]之
间；
-样品支路132，其在样品支流点142处连接到照射支路并且延伸 到槽102;
-抽吸支路133,其在抽吸支流点143处通过阀113连接到注射支 路，位于样品支流点142的上游，并且延伸到真空源107,例如注射器 或蠕动泵；
-排出支路134,其在排出支流点144处连接到注射支路，位于抽 吸支流点143的上游，并且延伸到试剂产品存储器104;
-套管支路！35,其在主体301的上游延伸并且连接套管空间和阀
115;
-稀幹支路l36，其在阀116和通过阀115稀释剂的使用108之间 延伸；
-稀释支路137，其在稀释剂存储器103和阀116之间延伸；
-试剂支路140，其在试剂存储器104和阀117之间延伸；
-反应支路141,其在阀117和通过阀111试剂的使用109之间延
伸；
-用于槽02的导流支路138,其在槽102和通过阀18的真空源 107之间延伸，样品支路132在槽102和阀U8之间与导流支路连接， 并且抽吸支路在阀118之外相对槽被连接到出口支路132;以及
-出口支路139,其通过阀U9将槽30的下游连接到废物槽，例如 在大气压力下或者通过抽吸源、注射器或蠕动泵。
在分116的第一位置U6A中，稀释';主射器105与稀释剂存储器联
通，因此拉出运动T使注射器105充满稀释剂。
在第一情况中稀释注射器包含稀释剂，阀116处于其第二位置 116B,其将注射器105连接到稀释支路136，并且阀115处于其第一位 置，其将稀释支路连接到稀释剂的使用108,推动P使稀释剂移动到这 个使用108，例如在槽102中，例如用于全部样品的稀释。
在第二情况中，阀U6处于其第二位置116B,阀115处于其第二位 置115B，其将稀释支路连接到套管支路135,推动P使稀释剂运动到光 学槽300中，以便在那儿形成套管流。在本发明中这个套管流的益处将 在下面槽300的说明中分析，
阀17处于第一位置117A中，其将试剂注射器连接到试剂存储器 104,并且阀114处于第一位置114A中，其关闭排出支路134,牵拉运 动T使试剂注射器106填满试剂。
在第一种情况中，试剂注射器包含试剂，阀117处于其第二位置 117B中，其将试剂注射器104连接到反应支路141，阀lll处于第一位 置1UA,其将反应支路连接到试剂的使用109,推动P使试剂运动到这 个使用09,例如在槽102中，例如用于整个样品的溶解。
在第二种情况中，阀117处于其第二位置117B中，并且阀lll处 于其第二位置U1B中，其将反应支路141连接到注射支路131,试剂注 射器106直接连接到注射器302,
阀118处于第一位置118A，其通过引流支路将抽吸支路133与样 品支路132隔离开，阀112处于第一位置112A，其将样品支流132的 上游部分连接到下游部分，阀113处于第一位置113A,其将抽吸支路 133的下游部分连接到上游部分，因此连接到真空源107,需要分析的 样品被吸入注射支路131中，在样品支流点142.和抽吸支流点143之间。
排出支路！34包括可变或者标准化的流体阻力150.
当稀释注射器105包含稀释剂时，试剂注射器106包含试剂，并且 需要分析的血样处于注射支路31中；并且当阀112、 113处于它们的 第二位置112B、 U3B中时，它们将与支路的上游部分和下游部分隔离 开；并且当阀115、 116处于它们的第二位置115B、 116B中时，它们将 稀释注射器105连接到套管空间303;当最终阀lll、 117处于它们的第 二位置U1B、 117B中时，它们将试剂注射器106连接到注射器302, 并且阀114处于其第二位置114B中；由一个唯一的动力源M产生的一
个唯一的推动P在槽300的方向中推动稀释剂、试剂和血样并穿过槽 300,同时根据流体阻力150部分试剂回到试剂存储器104中。
阻力150具体地允许调节套管流体和移位流体的相对流速。这允许 使这些流速能够适应这些液体的不同功能。具体地，当使用标准液压动 力聚焦槽时，这允许对于套管和在分析区域304中的样品来说具有相同 的流速，
具体地，排出支路134和在前面描述的设置使其可能使用一个唯一 的动力源，并因此具体地降低自动分析设备的成本，及其体积。
在槽300的分析区域304中，稀释剂形成一个用于样品的套管流(具 体参见图4和5)。位于注射支路131中的样品上游的试剂用作移位液 体，也就是其允许试剂注射器的活塞运动被传递到样品.因此，在将试 剂注射器填满样品以便能够对其进行分析的过程中不存在尖端点。因 而，即使是少量的样品也可以分析，并且所有的样品可以被注射和分析 而不会有部分样品残留在注射支流131中或残留在注射器106中。
当然，没有在图3中示出的其它注射器、阀和支路可以使液压回路 100完整，以便用于使自动分析设备20能够完整和良好地操作。
现在将描述根据本发明的光学装置200，具体参考图4和5。
光学装置包括一个近似单色的光源201。这个光源是一个电致发光 二极管。光线主要沿着光轴X200发出。光轴X加0近似垂直于光学槽 300中样品运动的注射轴X300设置，两个轴X200和X300共同限定一 个光学平面。
为了防止由光源201产生的光束311受寄生光线污染，在光束路径 上设置一组三个的光阑，其每一个垂直于光束。光阑202穿有直径近似 等于光束的孔，并且每个光阑中孔的直径逐步增加以便使其适应测量光 束的直径，测量光束的直径随着远离光源201变大，光束然后穿过由一 个或多个透镜构成的聚焦装置203。
在聚焦装置之外，光束遇到调节装置，其允许光轴在一个垂直于注 射轴X300的平面中移动，也就是在相对于槽中样品运动的横向方向 中。光束的横向移动可以导致样品部分照射或者无照射，这将对分析結 果造成直接影响。
在所描述的实施例中，调节装置由一个绕轴X220可旋转安装的透 明玻片220构成，轴221近似平行于注射轴X300。如果玻片垂直于轴
X200设置，光束穿过它而不会被折射，相反，如果玻片与光轴形成一 定的角度，在玻片入射和出射处的双折射使光束在垂直于调节轴X220 的平面中移位。调节轴X220近似平行于注射轴X300，在玻片中通过折 射仅产生一个横向位移.玻片的厚度和/或折射率越大并且玻片相对于光 轴越倾斜，位移越大。因此对于一个具有选定厚度和折射率的玻片，为 了调节光束相对于在光学槽300的分析区域304中移动的样品的位置， 将玻片220绕其轴X2M旋转是足够的，与现有技术的装置相比这样的 一种调节装置特别经济，特别是因为精确的旋转通常比使用高-精度机构 的精确平移更易于执行。
在透过槽并穿过样品之后，光束至少部分地成为轴向-生成光束
212, 其近似沿光轴离开槽，轴向-生成光束212带有关于其穿过的样品 的信息。
为了能够同时测量多个这些信息，其必须能够由多个测量设备 222、 223分析光束。具体地，光学分析依赖于沿两个角度的折射光束的 测量小角和大角。因此需要将光线分布在两个用于每个范围的不同的 通道中，因此使用将生成光束212分成两个生成光束213、 214的装置 205。分离装置主要由光束分离器205构成。这个光束分离器是一个透 明的玻璃玻片。其与光轴成45度设置。因此产生第二轴向-生成光束
213, 其由穿过光束分离器的光线形成，以及由菲涅耳光损(Fresnel losses)形成的光损所产生的光束214,也就是由光束分离器反射的光 线。
这种光束分离器相比现有技术中在这种类型光学分析装置中所用 的分离设备具有非常低的成本。具体地，因为其不包含任何而外的反射 涂层，其实际上耐老化并几乎不需要维护。在给定的玻片内多次反射以 及轴向-生成光束入射辐射的偏振，约5-15%的能量被反射，剩余的传递 到第二轴向-生成光束中。
在槽和光束分离器之间，轴向-生成光束212通过适当的装置206 变平行.在光束分离器之外，生成光束213、 2M通过各自适当的装置 207、 208被再次聚焦，用于通过各自的测量设备222、 223对它们进行 分析.
在所描述的实施例中，分析第二轴向-生成光束213的测量设备222 是用以测量靠近光轴由血细胞产生衍射(称为FSC测量)的设备。在所
描述的实施例中，分析由涅耳光损214所产生光束的设备是用于测量轴 线中光线损耗(称为ALL测量)的设备，也就是光线被样品中的细胞遮 挡。
图5示意性表示了槽在一个垂直于注射轴X300并包含光学轴X200 的平面中的一部分。如在这个图中特别示出的，由侧向-生成流315中的 样品从侧部重发射的光线也被分析，其被聚焦在槽外的测量设备224 中。
现在将描述根据本发明的光学槽，具体展望使用例如在先描述的液 压回路，具体参考图6。该槽的操作可以与现有技术的液压动力聚焦-类型操作比较，其在图10中非常示意性地示出，
图10的槽350包括主体351、注射器302和分析区354。槽的内部 横向尺寸D354约为250微米。如果槽为圆形横截面，这个尺寸可以是 直径，或者如果槽为方形或矩形橫截面，这个尺寸是边长。如由虛线示 出的，使用套管流362来具体减小样品流361的直径，因此在现有技术 中，在分析区域354中，样品流的直径D361小于50微米。
根据本发明的槽300,在图4-6中示出，包括主体301和注射器302, 沿着注射轴X300近似同轴地设置。分析区304设置在注射器的下游。
主体由注塑材料制成，优选由塑料制成。这种生产方法能够获得复 杂的形状。具体地，在主体中模制一个透镜305。这个透镜能够收集被 血细胞遮挡、折射或散射的光线。
这个透镜必须具有一些尺寸，尤其是一足够的直径，使得相对这些 尺寸注射原料中的可能的局部不均匀性可被忽略。在示出的实施例中， 透镜305直径约为3毫米。这个注塑透镜是一个侧面透镜305,其侧面 被生成的光束315穿过.此外，侧面透镜必须允许光线能够在尽可能多 的方向中收集，也就是具有尽可能大的方向范围。因而，透镜越靠近样 品，方向范围越大。在示出的实施例中，透镜是一个称为90°的半球形 透镜透镜。此外，透镜是槽壁的一部分，其与槽中的液体直接接触，也 就是在样品和透镜之间不存在空气间隙，具有较低的折射率。这改善了 测量。
为了克服均匀性不完善的缺陷，在光线具体聚焦的位置使用玻璃， 例如BK7类型的玻璃，这种情况特別用于轴向窗口 306,在那光源光束 211透入槽并且在那轴向-生成光束212离开槽。
为了能够产生产生具有这种尺寸的注塑透镜，在分析区域中，槽300 必须具有至少类似的尺寸。此外'这些较大的尺寸使玻璃窗能够被整合 到塑料壁中，而具有较小尺寸的现有技术的槽由全部是玻璃或石英的壁 组成。在特别是图5和6中示出的实施例中，槽的下部沿着光轴为4.5 毫米，在垂直方向中为3毫米。这个具有较大尺寸的矩形部分与少量的 样品相关，其传输需要分析的血细胞，需要使用血样的流体动力套管。 通过比较，现有技术的槽具有分析区域内部横向尺寸D354,接近250 微米。
在分析区域304的上游，槽的主体301环绕注射器302并且绕注射 器形成套管空间303。在注射器内部，注射器的壁在套管空间中从套管 流312分离出一个由样品形成的液流311。样品流发源于液压回路的套 管支路35。在分析区域中，两股液流接触，保持同心并且同时流入槽 中。
为了降低自动设备的生产成本，降低生产部件的精度是有优势的. 如上面提到的，这种目的可以通过产生具有更大横截面的样品流实现，
然而，如果使用样品流被套管流拉长的现有技术，具有较大横截面 的样品流将成为湍流，其特别危害测量的精度。此外，样品流的横截面 将被逐步减小，这与所期望的效果相反，期望获得具有较大橫截面的样 品流。这个目的通过使用根据本发明的液压回路100实现，其在前面参 照图1说明。这种回路使其可能为套管流和样品流独立选择流速，以便 在样品流中出现较少的湍流并且这个湍流不会对分析结果产生显著的 影响。两股液流每一个可以是近似均匀的，作为选择在某些适当流速的 范围中分层。
此外，如困7或图8中图示的注射器302也能够限制样品流中的瑞 流.此外，其允许样品以较高的注射速度进入光学槽中，同时保持其流 动近似均匀。
如图7中示出的注射器302包括一个结构管320,例如由不锈钢制 成保证注射器的刚性。结构管在内侧套装一个由塑料制成的管321，塑 料例如聚四氟乙烯(PTFE),在示出的实施例中，结构管和套装管为圆 柱形的。在结构管的下游，套装管延伸一个由塑料制成的喷嘴，结合使 用的塑料区分结构管的结构功能和喷嘴的注射功能的事实允许以较低 的成本获得足够精确的形状。喷嘴具有这样的横截面，其从套装管的内径D321开始到喷嘴3" 下游端324处出口孔323的内径D323逐步变窄。在所述的实施例中， 下游端324为圆柱形，长度为L324.喷嘴的壁首先向内凹入，然后弯曲 成为向内凸起，喷嘴的橫截面因此从上游到下游，从直径D321到直径 D324逐步变窄。凹入面正切于圓柱形套装管的内表面。凸起面正切于 圆柱形端324的内表面，在所述的实施例中，孔323的直径D323约为 60微米，套装管的内径D321约为1毫米，喷嘴的长度L322约为2.5毫 米，结构管的长度L320约为6毫米，并且圆柱形端的长度L324约为200 微米。
注射器302,例如在图8和9中示出的，为一单一构件并且由单一 基本刚性的材料制成，这个材料例如可以是不锈钢、陶瓷、人造红宝石 或塑料。塑料有优势地可以为聚四氟乙烯。注射器包括一个近似圆柱形 的管331,其下游延伸一个喷嘴"2。
喷嘴逐步向内变窄，从管331的内径D331到样品出口孔333的内 径D333，该出口孔在喷嘴332的下游端334处。在示出的实施例中， 变窄根据一个优选9-10度的截头的锥形打开进行。在该截头的锥形以外 并且直到出口孔333,圆柱形部件335中的直径保持不变，长度为L335 直径为D333。
在喷嘴的外部，其外径根据一个约为8-9度的截头锥形打开逐步变 大，然后，在非常明显的更加变小的端部中根据约为35-45度的角度 A334形成截头的锥形打开，直到出口孔333的外径D334,D334比D333 大约3-4倍.
例如D333-60 D334=200 pm,并且A334=40o。 由于前述的不同设置，有可能获得较高的注射速度，因此，在所述 的实施例中，有可能在不到10秒内注射超过200微升的样品。具体地， 这种注射速度使其有可能使用高稀释率的血样，于现有技术的自动设备 相比而不必提高分析的持续时间。具体地，相同的稀释，例如1/1604， 可以通过装置UO(参见图3)用于分析血红蛋白并且通过光学装置120 用于分析白细胞，而不必是用于分析白细胞通常所用的1/80气
图lla-c困示了使用根据本发明第一目的的方法和设备获得的结 果，所述设备使用根据本发明第三目的的光学槽7和根据本发明第二目 的的光学装置8。图lla显示了血红蛋白测量的相对线性测试，并固此
显出了根据本发明对血样血红蛋白水平的可能的可靠测试。图llb显示 了从测试血样获得的光学细胞图，并加入了根据本发明的30%的嗜酸性 细胞。在这个细胞图上，出现了五个亚-种群并且区分表示W艮据细胞区 分种群E代表嗜酸性细胞，N代表中性白细胞，M代表单核细胞，B 代表嗜碱细胞，L代表淋巴细胞)。图llc显示了通过白细胞水平抵抗 性进行的相对线性测试。
这些附图显示了由本发明，通过使用根据本发明的配方，特别是单 -试剂形式的配方执行至少血红蛋白水平和白细胞水平的分析以及白细 胞的鉴别。
当然，本发明不局限于所述的实施例，并且能对这些实施例应用许 多的改变而不会超出本发明的范围，
例如，可以使用不同于稀释剂或试剂的产品，以便分别形成套管流 和流体活塞，特别是如果它们能够在用于其他用途的自动设备中获得。
另外，除了仅设置在注射回路上以外，可以在套管回路或者在这两 者上同时设置流体阻力。借助于分别用于移动或套管的液体的移动装 置，由于给定最大流速的作用，这个可以发生。
光学槽的透镜和/或光学装置的透镜的多个或全部因此可以随着槽 主体一起通过注塑产生，而不是如前面所迷的单一的部件。具体地，可 以注塑出玻璃窗。特別是如果相对于测量所需的精度，注塑材料中的不 均匀性大致可忽略。
可以互相独立地使用前面所述的调节装置和/或分离装置，并且可选 择的与不同于场致发光二极管的其他光源一起使用。
权利要求
1.一种用于光学装置(120)的流过型槽，用于在自动血液分析设备(20)中计数和鉴别白细胞，其特征在于槽的分析区域(304)，槽的横截面具有至少在1-5毫米之间的横向尺寸。
2. 如权利要求l所述的槽，其特征在于至少部分地由注塑材料制成。
3. 如权利要求2所述的槽，其特征在于包括至少一个与槽模制成 一个整体部件的透镜(305 )。
4. 如权利要求3所述的槽，其特征在于至少一个透镜包括一个相 对于光轴側向设置的透镜。
5. 如权利要求4所述的槽，其特征在于至少一个透镜包括一个半 球形透镜。
6. 如权利要求3-5中一项所述的槽，其特征在于沿着光轴包括至 少两个窗口 ( 306 ),其中一个用于射入光束而另一个用于光束离开。
7. 如权利要求6所述的槽，其特征在于至少一个窗口与槽模制成 一个整体的部件。
8. 如权利要求6或7所述的槽，其特征在于插入至少一个由透明 材料制成的窗口 ( 306 )。
9. 如权利要求1-8中一项所述的槽，其特征在于'.包括一个用于样 品流(311 )的注射器(302 )和用于绕注射流形成套管流的装置(301 )。
10. 如权利要求9所迷的槽，其特征在于注射器包括出口孔(323, 333 ),其直径在20-150微米之间。
11. 如权利要求9或IO所述的槽，其特征在于注射器大致刚性的 材料制成一个整体部件。
12. 如权利要求ll所述的槽，其特征在于注射器由陶瓷制成。
13. 如权利要求ll所述的槽，其特征在于注射器由人造红宝石制'成。
14. 如权利要求ll所述的槽，其特征在于注射器由不锈钢或塑料 制成。
15. 如权利要求9或IO所述的槽，其特征在于注射器包括一个刚 性的结构管(320),和在结构管内部的一个由塑料制成的套装管(321 ),. 该套装管延伸出一个与该套装管成整体部件的喷嘴(322 )。
16. 如权利要求15所述的槽，其特征在于注射器的塑料为聚四氟 乙烯。
17. 血液设备(20),具体是一种自动血液分析设备，其特征在于 其包括根据l-12中一项的槽(300 ),
全文摘要
本发明涉及一种循环容器(300)，其适合于用于血液分析自动仪器中的白细胞计数和/或鉴别的光学装置(120)。本发明特征在于容器的分析区域(403)，容器的横截面的横向尺寸在1-5毫米之间。其可以有优势地，至少部分地，由注塑塑料制成，并且包括至少一个与容器(300)模制成一个整体部件的透镜(302)。
文档编号G01N15/14GK101184985SQ200680019046
公开日2008年5月21日 申请日期2006年3月22日 优先权日2005年3月31日
发明者H·钱普赛克斯, O·马格宁, S·钱普赛克斯 申请人:C2诊断公司