固相蛋白质芯片、形成设备及蛋白质表达量、活性值测定装置的制作方法

专利名称：固相蛋白质芯片、形成设备及蛋白质表达量、活性值测定装置的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种用于在多孔质膜上形成固相蛋白质的固相蛋 白质芯片及使用此固相蛋白质芯片生成固相蛋白质的设备以及蛋 白质表达量和活性值测定装置。
背景技术：
到目前为止，人们都知道有一种固相蛋白质芯片(JP2004020 437)具有第一和第二模板，这两个模板分别有用于夹多孔质膜 的平面，第一模板其平面上有凹部和多个第一贯通孔，第二模板 的平面上有可压入上述凹部的凸部和与第一贯通孔对应的多个第 二贯通孔，当将第一和第二模板重叠，将凸部压入上述凹部时， 对应的第一和第二贯通孔互为同轴，且第一和第二模板可拆卸地 粘贴在一起。
此固相蛋白质芯片由多孔质膜和第一贯通孔形成大量芯池， 通过向芯池中注入蛋白质试样液，透过多孔质膜吸移蛋白质试 样，即可在多孔质膜上每池中形成固相蛋白质。

发明内容
本发明的范围只由后附权利要求书所规定，在任何程度上都 不受这一节发明内容的陈述所限。本发明的范围只由后附权利要求书所规定，在任何程度上都不 受这一节发明内容的陈述所限。
然而，这种固相蛋白质芯片必须在各池注入蛋白质试样，且全 部芯池注入工作完成后一并进行吸移，若要固相化不同制备方法制 备的多种蛋白质试样，则需要分别准备不同的固相蛋白质芯片，以 便根据不同的制备时间形成固相蛋白质。而且，用传统的固相蛋白 质芯片，最早注入试样的芯池与最后注入试样的芯池其所注入的蛋 白质试样的蒸发和向多孔质膜的渗透情况等会很不一样。
本发明就是针对上述这种问题而开发的，其目的是提供一种固 相蛋白质芯片，即使固相化制备方法不同的多种蛋白质试样，也可 以不必准备多种固相蛋白质芯片，进而减少固相化所需时间上的损 耗。本发明的目的是提供一种固相蛋白质芯片，它能够縮小由于注 入时间差而带来的每个芯池的蛋白质试样的状态差异。
本发明第一侧面提供的固相蛋白质芯片是用于在多孔质膜上 形成固相蛋白质的固相蛋白质芯片，它包括具有开有多个贯通孔 的第一区域和开有多个贯通孔的第二区域的底板；第一多孔质膜； 第一板条，与底板的第一区域相对而设，有与第一区域相对并开有 多个贯通孔的第三区域、第一多孔质膜夹在第一区域和第三区域之 间；第二多孔质膜；第二板条，与底板的第二区域相对而设，具 有与第二区域相对、开有多个贯通孔的第四区域、第二多孔质膜夹 在第四区域和第二区域之间。
此固相蛋白质芯片在底板上设有第一区域和第二区域，并分别 配置有与第一区域相对应的第一板条和与第二区域相对应的第二 板条，因此，第一区域和第二区域可分别固相化，即使固相化制备
方法不同的多种蛋白质也可以减少固相化所需耗时，并能够縮小由 于注入时间差带来的蛋白质试样的状态差异。
此固相蛋白质芯片可以通过第一板条配置于底板上，使第三区 域上的各贯通孔与第一多孔质膜形成芯池，又通过第二板条配置于 上述底板上，使第四区域的各贯通孔和第二多孔质膜形成芯池。
由于通过第一板条和第二板条分别配置于底板上形成芯池，因 此，能够提供结构简单的固相蛋白质芯片。
在上述固相蛋白质芯片中，底板也可具有划分第一区域和第二 区域的凸部，第一板条和第二板条还可分别有嵌入底板凸部的槽。
这种结构通过简单操作即可构建固相蛋白质芯片。
固相蛋白质芯片还具有第一滤膜和第二滤膜，可以让第一多孔 质膜和第一滤膜夹在第三区域和第一区域之间，让第二多孔质膜和 上述第二滤膜夹在第四区域和第二区域之间。
如此多孔质膜和滤膜夹在板条之间可以使滤膜保持水分，避免 多孔质膜干燥。
也可以在第一多孔质膜上构建测定蛋白质表达量用固相蛋白 质，在上述第二多孔质膜上构建测定蛋白质活性用固相蛋白质。
可以在固相蛋白质芯片的各个区域构建测定蛋白质表达量用 固相蛋白质和测定蛋白质活性用固相蛋白质，从而可以减少用制备 时间不同的蛋白质表达量测定用试样和蛋白质活性值测定用试样 构建固相时的耗时。
本发明的第二侧面提供的蛋白质固相形成装置包括固定上述 固相蛋白质芯片的固相蛋白质芯片固定器、与固定在固相蛋白质芯 片固定器上的固相蛋白质芯片第一区域相对而设的第一吸移部分、
与固定在固相蛋白质芯片固定器上的固相蛋白质芯片第二区域相 对而设的第二吸移部分以及有选择地驱动第一吸移部分和第二吸 移部分的吸移驱动器。
此固相蛋白质形成装置具备有选择地驱动第一吸移部分和第 二吸移部分的吸移驱动器，故能分别吸移多孔质膜上的各个试样， 形成固相。
上述固相蛋白质形成装置也可以配置有用于盛放溶解有生物 样品的第一试样和第一试样中的待测蛋白质基质的盛放设备、用第 一试样和基质制备活性测定用第二试样的制样器以及将第一试样 注入第三区域的贯通孔、将第二试样注入第四区域的贯通孔的分装 设备。
通过配置这种分装设备和制样器可以自动分装第一试样和制 备并分装第二试样。
上述固相蛋白质形成装置也可以使盛放设备能盛放与待测蛋 白质特异性结合的第一标记物和与待测蛋白质和基质反应生成物 特异性结合的第二标记物，使制样器用第一试样、基质和第二标记 物制备第二试样，让分装设备向装有第一试样的第三区域贯通孔分 装第一标记物，向第四区域的贯通孔分装制样器制备的第二试样。
这种结构能够在第三区域形成待测蛋白质与第一标记物结合 的固相，在第四区域形成反应生成物与第二标记物结合的固相。
本发明的第三侧面提供的是蛋白质表达量和活性值测定装置， 其包括上述固相蛋白质形成装置和通过测定在第一多孔质膜上形 成的表达量测定用固相来测定待测蛋白质表达量、通过在第二多孔 质膜上形成活性测定用固相来测定待测蛋白质活性值的测定单元。具备这种测定单元使得从固相形成到待测蛋白质表达量和活 性值测定均自动进行。
用本发明的固相蛋白质芯片可以减少固相形成所需耗时，还可 以縮小因注入时间差带来的每个芯池的蛋白质的状态差异。


图1为本发明测定装置的一实施方式的斜视说明图。 图2为图l所示测定装置的芯片放置器和固相蛋白质芯片的斜 视说明图。
图3为图l所示测定装置的芯片放置器和固相蛋白质芯片的截 面说明图。
图4为固相蛋白质芯片的上板条和下板条的分解说明图。 图5为将上板条与下板条装配在一起后的固相蛋白质芯片的 斜视说明图。
图6为图l所示测定装置中活性测定单元的制样器的柱的截面 说明图。
图7为图1所示测定装置中活性测定单元的制样器的斜视图。
图8为图7所示制样器的集流腔俯视图。
图9为图8D — D截面图。
图IO为图7所示制样器的液体流路图。
图11为制样器的柱的其他例截面说明图。
图12为控制设备的硬件结构框图。
图13为控制测定装置的控制系统框图。
图M为测定装置处理过程的全部流程图。
图15为表达量测定用试样制备过程的流程图。
图16为活性测定用试样制备过程的流程图。
图17为在测定装置中标本等利用顺序的说明图。
图18为表达量测定用试样和活性测定用试样的各处理的流程图。
图19为测定装置进行表达量 活性值测定处理的一例的全流程图。
图20为其他实施方式的活性测定单元的酶反应处理器的说明图。
图21为其他实施方式的活性测定单元的荧光标记反应处理器 的说明图。
图22为用图20 21所示活性测定单元制备活性测定用试样的 制备处理流程图。
具体实施方式
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下面参照附图就配备有固相蛋白质形成设备的蛋白表达量和 蛋白活性值测定装置(以下也称"测定装置")以及固相蛋白质芯 片的实施方式进行说明。
图1为本发明一实施方式的测定装置A的斜视说明图。此测 定装置A是测定蛋白质(在本实施方式中为组织中所含周期素依 赖性激酶(CDK))的活性值和表达量的仪器，主要由以下部分构 成配置在装置本体20前面的检测器4、芯片放置器l、第一试样 放置器5及第二试剂放置器6、配置于装置本体20后面的活性测 定单元2、回收废液的废液槽7和清洗吸移管的吸移管清洗槽8、 配置于装置本体20上方可以向3个方向(X方向、Y方向和Z方 向)移动吸移管的分装设备3、配置于装置本体20背面的流动室9及电子线路板10、可与上述检测器4和电子线路板IO通信连接的 控制设备计算机12。本实施方式的测定装置A还设有纯水箱13、 清洗剂箱14、废液箱15和真空气压源11。纯水箱13存储有测定 结束时清洗流路用纯水，通过配管21连接到流动室9，清洗剂箱 14存储有清洗吸移管的清洗剂，通过配管22与吸移管清洗槽8连 接，回收废液的废液箱15通过配管23与废液槽7连接。测定装置 A同时设有增溶装置B，用来从生物样品获取上述测定装置A能处 理的标本。
以下就增溶装置B和测定装置A进行说明。 [增溶装置]
增溶装置B先于测定装置A处理，从摘自患者的组织等生物 样品制备测定装置A可处理的液态标本，它主要由机箱30、配置 在机箱30前上方的操作部件31、具有一对杵34用来推挤、碾碎 上述生物样品的驱动器32和用于放置收纳上述生物样品的艾本德 管35的标本放置器33构成。
上述驱动器32可以上下驱动杵34同时作旋转运动，以此推挤、 碾碎装入艾本德管35内的生物样品。上述机箱30内内置控制上述 驱动器32动作的控制器(无图示)。
上述操作部件31配置有操作按钮31a、运转灯31b、显示装置 状态和故障信息的显示屏31c。标本放置器33内设有无图示的冷 却设备，使设置在该标本放置器33上面凹处的艾本德管35内的生 物样品保持一定的温度。
通过增溶装置B溶解、再经无图示的离心分离器离心分离处 理的生物试样的上清液被采集到规定的标本容器，放置到测定装置 A的第一试剂放置器5。 [第一试剂放置器]
第一试剂放置器5内置有与上述标本放置器33 —样的无图示 的冷却设备，使设置在该第一试剂放置器5上面凹处的螺旋盖瓶等 容器内的标本、CDK1抗原(校准品1) 、 CDK2抗原(校准品2) 等各种抗原和荧光标记CDK1抗体、荧光标记CDK2抗体等各种 荧光标记抗体保持一定温度。在本实施方式中，设有纵向5列、横 向4行共计20个凹处，能够放置最多20个螺旋盖瓶等容器。 [第二试剂放置器]
紧挨上述第一试剂放置器5设有第二试剂放置器6。此第二试 剂放置器6与上述第一试剂放置器5—样，有多个凹处，这些凹处 内用于放置添加了缓冲液、基质溶液、荧光增强试剂等溶液的艾本 德管和螺旋盖瓶等容器。
在测定装置A进行处理前，先将固相蛋白质芯片置于芯片放 置器l，同时将柱放于活性测定单元2。 [芯片放置器]
芯片放置器1由铝制印版构成，如图2 3所示，上面有承载固 相蛋白质芯片101用的第一凹部102，底部有三个吸移口 103。更 详细地说，芯片放置器1上面有长方形的第一凹部102、此第一凹 部102底部有三个同是长方形的第二凹部104。此第二凹部104由 隔壁105间隔，彼此独立，当上述固相蛋白质芯片101放在芯片放
置器1上时，互相为不连通的状态。上述第一凹部102底面在上述
第二凹部104的边缘铺设有长方框形的橡胶制弹性垫圈106。
上述第二凹部104其底部有十字形槽107，底部中心有吸移口 103。该槽107的槽底沿第二凹部104四周向中心倾斜，越来越深。 芯片放置器l的三个吸移口 103分别与用于连接外部吸移用真空气 压源11的管接头108连通。一端接上述吸移用真空气压源11的软 管109其另一端连接在此管接头108上。软管109配置有开关阀 110。分别对应于三个吸移口 103的各开关阀IIO可独立开关。如 此，即可独立吸移被后述固相蛋白质芯片的三个上板条113a、113b、 113c分割开的任意区域。
后面有待详述的固相蛋白质芯片101通过第一凹部102的底面 垫圈106找平。当含有蛋白质的试样溶液注入或滴入固相蛋白质芯 片101的各池后，吸移泵开始工作。
如此，固相蛋白质芯片101通过垫圈106气密性地吸附在第一 凹部102的底面，同时各池内的试样溶液通过后述多孔质膜被吸 移，待测蛋白质即在该多孔质膜形成固相。另外，在图2 3， 130 为推压器件，用于将固相蛋白质芯片101推压到第一凹部102的底 面加以固定。此推压器件130在固相蛋白质芯片101放置到第一凹 部102上后，向图中箭头方向滑动，其上部从上面推压固相蛋白质 芯片IOI，将其固定于第一凹部102。
上述固相蛋白质芯片101如图4~5所示，由多孔质膜111和滤 膜1"、夹持这些多孔质膜111和滤膜112的上板条113和下板条 114构成。此固相蛋白质芯片101有让含周期素依赖性激酶抗体的 抗体溶液与生物试样(标本)接触的功能。
如图4 5所示，上板条113由三个互相独立的板条、即第一上
板条113a、第二上板条113b、第三上板条113c构成。各上板条呈 长方平板形，第一上板条113a和第二上板条113b均开有12个排 列成4行3列矩阵的长圆形贯通孔115，第三上板条113c开有16 个长圆形贯通孔115，同样排列成4行4列矩阵。各上板条有数贯 通孔组成的相互独立的区域，用于处理试样。各上板条底面沿短边 有槽116。
另一方面，长方板形的下板条114在与上述上板条113a、 113b 和113c的各贯通孔115对应的位置分别开有排列成矩阵的共计40 个长圆形贯通孔117。贯通孔117有与贯通孔115同样的形状和截 面积。下板条114有与上述上板条113a、 113b和113c各区域对应 的数个贯通孔组成的区域。
下板条114的上面有绕40个贯通孔117 —周的垄形凸部118 和与上板条113a、 113b和113c各区域对应将贯通孔117划分为三 个区域的间隔壁119。由上述凸部118和间隔壁119在其内侧划分 出三个长方形多孔质膜设置区。上述上板条113和下板条114可用 氯乙烯树脂等制作。
如图2 5所示，下板条114的多孔质膜设置区域可以放置多孔 质膜111和滤膜112 (过滤膜)的叠层板，然后将各上板条113a、 113b禾n U3c的槽116嵌入逐一对应的下板条114的凸部118，使 上板条113a、 113b和113c装配于下板条114，即可形成固相蛋白 质芯片IOI。这样做，各贯通孔115与各贯通孔117为同一圆心。
上述固相蛋白质芯片其上板条113被划分为三个区域，可分别 吸移三个区域。比如，当吸移上板条113a的区域时，关闭上板条
113b和113c对应的吸移口 103开关阀110，打开上板条113a对应 的吸移口 103开关阀110。在此状态下，用吸移用真空气压源11 吸移，即可有选择地单独只吸移上板条113a的区域。
上板条数在本发明中无特别限定。可考虑测定项目数和标本数 适当选择。
活性测定单元2如图6~11所示，由分别具有柱201和集流腔 213的数个制样器211组成，用于测定CDK活性值。柱201可以 是图6所示形态或图11所示形态任意一种。
图6所示柱201由氯乙烯树脂制圆筒构成，内部有固定用于萃 取液体试样中的目标物的载体206的载体固定器202和用于盛放导 入该载体固定器202的液体试样的贮液器204。上述柱201其贮液 器204上方有一可从外部注入或抽取液体试样的开口 205,载体固 定器202下端有连接流路203，可以向集流腔213导入液体试样， 同时从集流腔213吸入液体试样。上述柱201构成了让含有一定基 质的基质液与生物试样(标本)接触的方法。
载体206由圆柱形单硅胶构成，该单硅胶与粒子载体不同，结 构为三维网络状骨格及其空隙交织为一体。单硅胶上固定有所定的 CDK抗体。载体206从柱201下端开口处插入载体固定器202，通 过圆环207靠固定用管208的弹力挤压支撑。上述固定用管208 从柱201下端开口处挤入，固定用管208与圆环207的芯池形成连 接流路203。
图11所示柱401由聚丙烯制圆筒构成，其内部有固定用于萃 取液体试样中的目标物的载体406的载体固定器402和用于盛放导入该载体固定器402的液体试样的贮液器404。上述柱401其C:液 器404上方有一可从外部注入或抽取液体试样的开口 405，载体固 定器402下端有一开口，可以向集流腔213导入液体试样，同时从 集流腔213吸入液体试样。上述柱401构成了让含有一定基质的基 质液与生物试样(标本)接触的方法。
载体406由圆柱形单硅胶构成，该单硅胶与粒子载体不同，有 三维网络状骨格及其空隙交织为一体的结构。单硅胶上固定有所定 的CDK抗体。载体406从柱401下端开口处插入载体固定器402， 由超声波在底面四周形成的热粘接部分251固定。
柱201、 401下端有装填用法兰盘209，用于将该柱201和401 装填到上述制样器211加以固定。此法兰盘209为将直径D的圆 盘状法兰盘两侧平行切削宽度W (W<D)形成的长圆形法兰盘。
图7为制样器211的斜视图，如该图所示，制样器211有一L 字形支板212，此支板212上固定有集流腔213、注射泵214和带 减速器的步进式电机215。
步进式电机215的输出轴上接有螺旋轴216，拧在此螺旋轴216 上的驱动臂217连在注射泵214的活塞218前端。螺旋轴216在步 进式电机215的驱动下旋转，则活塞218上下运动。注射泵214 和集流腔213由送液管250通过连接器219和220连接。注射泵 214通过连接器220a由送液管220b与盛放着用于注满流路的液体 (清洗剂)的容器234 (参照图10)连接。
如图8 9所示，集流腔213有一连接上述柱201下开口的柱连 接器221。
集流腔213内部有流路223，下面有负责流路223和柱连接器 221之间开关的电磁阀225。集流腔213侧面有用于连接连接器220 的连接器连接专用螺芯池226，此螺芯池226接到流路223上。
图10为制样器211的液体流路图，显示了注射泵214通过连 接器220连接到集流腔213的状态。注射泵214上还通过电磁阀 233连接容器234，该容器234由正压源235施加正压。
在此，就将柱201填充到集流腔213的方法进行说明。
如图8~10所示，集流腔213的上面有嵌入柱201下端的填柱 用凹部227，此凹部227的底部中央直通柱连接器221，同时底部 四周装有圆环228。集流腔213上面以填柱用凹部227为中心，以 宽于上述幅宽W、窄于D的间隔平行固定有二片截面呈L字形的 压板229、 230。
为防止从固定在集流腔213上的柱201内的载体206通过的标 本或试剂与冲灌集流腔213内流路223的液体(清洗剂)接触而被 稀释，在将柱201固定于填柱用凹部227之前先打开电磁阀225(电 磁阀233为关闭)，仅让注射泵214吸移约16uL。由此柱连接器 221的液面下降，形成气隙。
此后再将柱201装填到填柱用凹部227，使法兰盘209从压板 229、 230之间通过，顺时针或逆时针旋转90度。则法兰盘209直 径D的部分触及到压板229、 230，靠圆环228的弹性，法兰盘209 被压板229、 230固定。拆除柱201时，只要按着柱201向左右任 一方向旋转卯度即可。
柱201装填到制样器211的集流腔213时，为防止气泡混入， 该集流腔213的凹部227被手动或自动分装的液体充满，但是只要
将柱201的前端插入凹部227，其体积就会使液体溢出。为防止此 液体流向四周，填柱用凹部227的周围设有溢液存储凹部231，溢 液存储凹部231的一部分设有用吸移器吸排溢液的溢液排出凹部 232。
各种标本或试剂通过装有吸移管的分装设备3向指定地方或 从指定地方吸排。
在此，就从柱201上开口 205注入标本或试剂时的操作进行说 明。向开口 205注入标本或试剂时，首先电磁阀225打开(电磁阀 233关闭)，注射泵214开始吸移操作。这样，气隙和标本或试剂 就通过电磁阀225吸移到注射泵214 —侧。然后注射泵214开始排 出操作。这样，标本或试剂就通过电磁阀225被送到柱201内。 [分装设备]
分装设备3如图l所示，包括吸移管向X方向移动用框架352、 吸移管向Y方向移动用框架353和吸移管向Z方向移动用移动板 354。
框架352有向箭头X方向移动移动板354的螺旋杆355、支撑 并振动移动板354的导向横杆356和旋转螺旋杆355的步进式电机 357。
框架353有向箭头Y方向移动框架352的螺旋杆358、支撑并 振动框架352的导向横杆359和旋转螺旋杆358的步进式电机361 。
移动板354有向箭头Z方向移动固定吸移管362的臂368的 螺旋杆367、支撑并振动臂368的导向横杆及旋转螺旋杆367的步 进式电机370。
在本实施方式中，因分装设备3具有一对吸移管362，故可以
同时向二个标本容器中注入试剂等溶液，同时从二个标本容器中吸 移其中内容，并高效进行测定处理。
装置本体20的背面如图1所示，配置有清洗上述吸移管362 的吸移管清洗槽8和连接各制样器211 (参照图7)对流体进行操 作的流动室9。此流动室9如图10所示，包含各制样器211的 电磁阀225、从清洗剂舱向注射泵214填充液体时控制液体的电磁 阀233、吸移管362吸排液体时控制液体的电磁阀、从废液槽7吸 移被吸移管362废弃的液体时控制液体的电磁阀以及在清洗槽8 清洗吸移管362时控制液体的电磁阀。 [电子线路板]
装置本体20的背部配置有向制样器211、步进式电机357、361、 370和流动室9等提供驱动信号的电子线路板10。 [检测器]
检测器4用于测定反映被固相蛋白质芯片101的多孔质膜111 捕捉到的蛋白量的荧光物质量以及反映磷酸基量的荧光物质量，向 上述固相蛋白质芯片101照射励起光，检测发出的荧光，向电子线 路板IO输出与检出的荧光强度相应大小的电子信号。作为检测器 4可以适当采用由通用的光源、照明系统和集光系统构成的仪器。 [控制设备]
控制设备计算机12如图12所示，包括连接上述电子线路板 10的控制器77、向此控制器77输入数据等的输入设备78及显示 分析结果等的显示器79。上述控制器77构成了本发明的分析系统、
用标准曲线从荧光强度获取活性值的活性值获取系统以及利用标 准曲线从荧光强度获取表达量的表达量获取系统。
上述控制器77如图12所示，具备CPU91a、ROM91b、RAM91c、 输出输入接口 91d和图像输出接口 91e。 ROM91b装有操作系统、 控制装置运行的控制程序及执行控制程序所需的数据。CPU91a可 以将控制程序调入RAM91c，或从ROM91b直接执行控制程序。 作为CPU91a如此处理的结果，以数据形式通过输出输入接口 91d 输送到上述电子线路板10， CPU91a处理所需数据通过输出输入接 口 91d从上述电子线路板10接收进来。CPU91a可通过执行控制 程序来控制上述电子线路板10。 CPU91a根据检测器4测得的荧光 强度获取周期素依赖性激酶的表达量和活性值。为了获取上述表达 量和活性值，上述RAM91c中存储有用于将荧光强度转换为表达 量或活性值的转换数据标准曲线。标准曲线也可每次测定表达量或 活性值时制作。
图13为控制本实施方式的测定装置A的控制系统框图。此控 制系统如该图所示，由以下两部分构成印有驱动分装设备3各部 分驱动电路的电子线路板10及由控制此电子线路板10并分析检测 器4的检测结果的控制器77、向控制器77输入数据等的输入设备 78和显示控制器77分析结果等的显示器79构成的计算机12。
控制器77通过控制电子线路板IO从电子线路板IO输出驱动 各制样器211的步进式电机215的驱动信号、调节第一试剂放置器 5的温度的驱动信号、驱动步进式电机357、 361、 370的驱动信号 以及驱动位于流动室9的电磁阀的驱动信号。控制器77通过电子 线路板10从检测器4接收检测信号。
下面，以人的癌组织为标本，就使用本实施方式的测定装置A 测定蛋白质表达量和蛋白质活性值的方法进行说明。
(1) 用增溶装置进行前期处理
在用测定装置A处理之前，先用增溶装置B从采自癌症患者 的组织中采集液状标本。其顺序是先用镊子将上述组织放入艾本
德管。再将该艾本德管(eppentube)置于图1所示增溶装置B的 标本放置器33，按操作部件31的开始按钮，则杵34下降到规定 位置，将艾本德管内的组织推到该艾本德管底部。
在这种状态下，自动或手动向艾本德管内注入含有表面活性剂 和蛋白质分解酶抑制剂等的缓冲液等增溶剂。然后，转动杵34将 上述组织捣烂。经过一定时间后停止转动杵34，提起该杵34，从 标本放置器33取出艾本德管。再将艾本德管内增溶过的物质用离 心分离机分离，手动采集所得上清液作为标本。
(2) 标本等安置到测定装置A
将上述上清液装入二个标本容器，以不同的稀释倍率稀释后将 该标本容器放置到第一试剂放置器5的规定位置。二个标本中，一 个是测定表达量用标本，另一个是测定活性值用标本。
将上述固相蛋白质芯片101置于芯片放置器1上，同时将八个 柱201分别放置到活性测定单元2的制样器211上。
(3) 测定装置A处理的全部流程
测定装置A处理的全部流程如图14所示。在以下流程图中的 判断中，不图示"是"和"否"时，下为是，右(左)为否。以下 说明的处理全部为受控制器77控制的处理。
首先， 一接通电源，则开始接受测定注册的处理(步骤S1)。 在此项处理中接受标本号等有关测定信息的输入。装置判断是否收 到开始测定的指示(步骤S2)。如果为是，则进入步骤S3，如果
为否，则进入步骤S7。
然后，从设置在第一试剂放置器5的标本容器中吸移标本，对 所吸标本进行一定的处理，来制备荧光检测所需试样(步骤S3)。 此步骤中包含后面详述的表达量测定用试样的制备处理和活性值 测定用试样的制备处理，这二个处理同时进行。
将放置含有荧光检测用试样的固相蛋白质芯片101的芯片放 置器1从图1所示位置移至检测器4中(步骤S4)。
接下来，向固相蛋白质芯片101的各池照射励起光，检测从上 述荧光检测用试样发出的荧光(步骤S5)。 ，
然后在计算机12的控制器77获取荧光强度，根据获取的荧光 强度输出分析结果(步骤S6)。
判断是否收到关闭测定装置A的指示(步骤S7)。若为是， 则进入步骤S8，如果为否，则返回步骤S1。
最后进行关机处理，切断电源(步骤S8)。
(4)表达量测定用试样的制备处理
上述步骤S3中的表达量测定用试样的制备处理过程如图15 所示。
首先，排出预留在固相蛋白质芯片101上板条113a各池中的 保存液，洗净各池(步骤Sll)。清洗即用分装设备3的吸移管从 上方向各池注入清洗剂，再从固相蛋白质芯片下方用负压穿过多孔 质膜吸出注入的清洗剂。以下的清洗工序也同样。
接下来，用吸移管从放置在第一试剂放置器5的标本容器中吸
移表达量测定用标本，将该标本注入上板条113a的规定芯池。再 从固相蛋白质芯片下方(与上板条113a对应的吸移口 103)用负 压吸出该标本。如此，蛋白质便固定在固相蛋白质芯片的多孔质膜 上(步骤S12)。
然后，同步骤S11—样，用清洗剂清洗上述规定芯池。以此从 固相蛋白质芯片的多孔质膜除去蛋白质以外的成份(步骤S13)。
再将包被液注入上述规定芯池内，静置15分钟以上(比如30 分钟)后，排出残留在池内的包被液(步骤S14)。如此可以防止 被荧光标记的CDK1抗体(荧光标记CDK1抗体)和被荧光标记 的CDK2抗体(荧光标记CDK2抗体)固定在多孔质膜没有固相 蛋白质的部位。荧光标记CDK1抗体和荧光标记CDK2抗体可以 使用市场销售产品。
分别向所定芯池内注入荧光标记CDK1抗体和荧光标记CDK2 抗体。此时，各荧光标记抗体注入二个芯池。经过20 30分钟，荧 光标记抗体与固相化在多孔质膜上的蛋白质(CDK1或CDK2)反 应结束后，排出注入的荧光标记(步骤S15)。
最后，同步骤S13 —样，用清洗剂洗净上述所定芯池(步骤 S16)。
(5)活性值测定用试样的制备处理
在上述步骤S3中的活性值测定用试样的制备处理流程如图16 所示。在此活性值测定用试样的制备处理中，作为图1所示活性测 定单元2，使用的是图中眼前处有四个制样器211、图里面也有四 个制样器211的测定单元。此活性测定单元2的各制样器211从图 里面左起依次设为第一制样器(Acl)、第二制样器(Ac2)、第 三制样器(Ac3)、第四制样器(Ac4)，从图前面左起依次设为 第五制样器(Ac5)、第六制样器(Ac6)、第七制样器(Ac7)、 第八制样器(Ac8)。
先用分装设备3的吸移管从开口 205分别向第一 第八制样器 (Acl Ac8)注入清洗用试剂缓冲剂。由于注射泵214和电磁阀225 如前所述运转，贮液器204的缓冲剂经过载体206被引入流路223， 又经过载体206回流到贮液器204。全部柱201中回流到贮液器204 的缓冲剂由分装设备3的吸移管吸移、废弃(步骤S21)。
接下来进行免疫沉降(抗体与CDK的反应)(步骤S22)。 先从放在第一试剂放置器5上的一个标本容器中用一个吸移管吸 移活性值测定用标本1，用另一个吸移管吸移活性值测定用标本2。 从标本容器中吸移的活性值测定用标本1如图17所示，首先注入 第一制样器(Acl)的贮液器204。标本1通过注射泵214和电磁 阀225如前所述动作，被输送到第一制样器(Acl)的载体206。 此时，上下移动活塞218—个来回(吸入—排出)，则标本l在柱 201的载体206中往返一次。
另一方面，从标本容器中吸移的活性值测定用标本2注入第五 制样器(Ac5)的贮液器204。标本2同上述一样被送往第五制样 器(Ac5)的载体206。第一制样器(Acl)和第五制样器(Ac5) 的柱201的载体206中既没有固定CDK1抗体也没有固定CDK2 抗体。因此，在第一制样器(Acl)和第五制样器(Ac5) ， CDK1 和CDK2不固相化，第一制样器(Acl)的柱201中存留含CDK1
和CDK2的标本1，第五制样器(Ac5)的柱201中存留含CDK1 和CDK2的标本2。
然后，存留在第一制样器(Acl)的柱201中的标本1被吸移 管吸移到第三制样器(Ac3)的贮液器204。于是，标本1同上述 一样，被送到第三制样器(Ac3)的载体206。
而存留在第五制样器(Ac5)的柱201中的标本2被吸移管吸 移到第四制样器(Ac4)的贮液器204。于是，标本2同上述一样， 被送到第四制样器(Ac4)的载体206。
第三制样器(Ac3)和第四制样器(Ac4)的柱201中的载体 206中固定有CDK1的抗体。因此，在第三制样器(Ac3)和第四 制样器(Ac4) ， CDK1被固相化，但CDK2未固相化，第三制样 器(Ac3)的柱201中存留不含CDK1含CDK2的标本1,第四制 样器(Ac4)的柱201中存留不含CDK1含CDK2的标本2。
然后，存留在第三制样器(Ac3)的柱201中的标本1被吸移 管吸移到第七制样器(Ac7)的贮液器204。于是，标本1同上述 一样，被送到第七制样器(Ac7)的载体206。
而存留在第四制样器(Ac4)的柱201中的标本2被吸移管吸 移到第八制样器(Ac8)的贮液器204。于是，标本2同上述一样， 被送到第八制样器(Ac8)的载体206。
第七制样器(Ac7)和第八制样器(Ac8)的柱201中的载体 206中固定有CDK2抗体。因此，在第七制样器(Ac7)和第八制 样器(Ac8) ， CDK2被固相化，第七制样器(Ac7)的柱201中 存留既不含CDK1又不含CDK2的标本1，第八制样器(Ac8)的 柱201中存留既不含CDK1又不含CDK2的标本2。
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说明书第22/29页
第七制样器(Ac7)和第八制样器(Ac8)的柱201中存留的 标本l和标本2分别被吸移管吸出，废弃到废液槽7。
第一制样器(Acl)和第五制样器(Ac5)用于背景活性测定， 第三制样器(Ac3)和第四制样器(Ac4)用于CDK1的活性测定， 第七制样器(Ac7)和第八制样器(Ac8)用于CDK2的活性测定。
如此，通过向其他柱注入柱内残留的标本，用少量标本即可测 定背景活性、CDK1活性和CDK2活性。
接下来，将缓冲剂1输送到柱201内(步骤S23)，以洗掉标 本中的不要成份。
由于此缓冲剂1对步骤S25实施的酶反应产生影响，因此为了 创造这种酶反应的条件，向柱201输送缓冲剂2，冲洗掉上述缓冲 剂1的成份(步骤S24)。
向柱201注入含基质HistonHl和ATP Y s的基质反应液，来 回抽动一次活塞218 (步骤S25)。从柱201下侧挤到柱201中的 溶液静置。通过此步骤，在CDK1或CDK2作为酶的作用下，磷 酸基被导入HistonHl 。此磷酸基的量受CDK1或CDK2发挥酶的 功能的强弱(即活性)所左右，因此，测定上述磷酸基的量即可求 出CDK1或CDK2的活性值。另外，使用图17所示第 一 制样器(Ac 1 ) 和第五制样器(Ac5)求出的背景活性值如后所述，用于背景校正。
下一步用吸移管将荧光标记用试剂从柱201上方直接分装到 柱201内，让荧光标记与导入到HistonHl的磷酸基结合(步骤S26)。 其时，吸移管通过反复吸排柱内液体一定时间来搅拌柱201内的液 体。
从步骤S26开始经过一定时间(如20分钟)后，同上述荧光
标记用试剂一样直接向柱201分装反应停止液，再同步骤S26—样， 反复吸排柱内液体一定时间来搅拌柱201内的液体(步骤S27)。 以此停止荧光标记的结合。
再将第一制样器(Acl)、第三制样器(Ac3)、第四制样器 (Ac4)、第五制样器(Ac5)、第七制样器(Ac7)和第八制样器 (Ac8)的柱201内液体分别注入固相蛋白质芯片101上板条113b 的规定芯池。从此固相蛋白质芯片下方(与上板条U3b对应的吸 移口 103)用负压吸移此标本(步骤S28)。由此，有荧光标记结 合的磷酸基的HistonHl就被固相化在固相蛋白质芯片101的多孔 质膜上。
接下来同上述表达量测定用试样的制备处理中的步骤Sll — 样清洗芯池(步骤S29)。
最后，反复向芯池内注入、排出消光用试剂六次(步骤S30)， 以使未与导入HistonHl的磷酸基结合的荧光标记消光(背景消 光)。
本实施方式的测定装置A如上所述，可以同时进行表达量测 定用试样的处理和活性测定用试样的处理，届时使用的是能够分别 吸移多个区域的固相蛋白质芯片101，因此能够高效短时间地进行 上述试样的处理。图18显示出表达量测定用试样和活性测定用试 样的各处理的流程，固相蛋白质芯片101的三个区域中，在二个区 域错开 一 定时间(比如2分钟)测定同样表达量测定用试样中的不 同二种蛋白质的表达量，在剩余的一个区域，在进行与上述二种蛋 白质对应的活性测定用试样处理中，进行"反应生成物固相化"以
后的处理(固相化之前的处理在柱内进行)。这样，通过在固相蛋 白质芯片101设置能分别吸移的数个区域，可以用一片固相蛋白质 芯片101同时进行处理顺序不同的表达量测定用试样处理和活性 测定用试样处理。并可用一片固相蛋白质芯片101同时进行同样表 达量测定用试样中的不同蛋白质的表达量测定处理。 (6)分析处理
如图19所示，根据检测器检测的荧光强度进行分析，作为该 分析结果，输出表达量和活性值。
首先，控制器77分别就CDK1的活性、CDK1的表达、CDK2 的活性、CDK2的表达、背景的活性和背景的表达，通过电子线路 板10从检测器4的集光系统各获得二个荧光强度(步骤S31)。
控制器77再针对各项目计算获取的二个荧光强度的平均值 (步骤S32)。
然后，从CDK1活性的荧光强度(平均值)减去背景活性(平 均值)，同时，从CDK2活性的荧光强度(平均值)减去背景活性 (平均值)，对CDK1活性和CDK2活性进行背景校正。X寸CDK1 表达和CDK2表达也同样进行背景校正(步骤S33)。
接下来，针对各个项目，用标准曲线取得表达量和活性值(步 骤S34)。此标准曲线是用于将荧光强度转换成表达量或活性值的 数据，当试剂批次变更时，需要用两种以上已知表达量或活性值的 标本预先制作，存储到控制器77的RAM91c。显示取得的表达量 和活性值(步骤S35)。 [用磁珠对活性测定用试样进行处理]
在上述实施方式中，处理活性测定用试样时使用的是由内置载 体的圆筒体构成的柱。本发明并不限于此，比如如下所述，也可使 用磁珠处理活性测定用试样。
图20 21是使用磁珠的活性测定单元的说明图，图20显示该
测定单元的酶反应处理器，图21显示同一单元的荧光标记反应处
理器。图示酶反应处理器和荧光标记反应处理器组成一组活性测定
单元，这一组相当于使用柱的实施方式中的一台制样器211。
图20所示酶反应处理器501具有设立在测定装置A的装置本 体20上面的支架502和固定在此支架502上面的固定块503。固 定块503上面开有可收纳反应容器504的竖长形孔505，该孔505 放置规定的反应容器504。固定块503底部有一竖长形凹部506， 与上述孔505的纵长方向平行，且靠近该孔505。此凹部506内配 置有连接气泵507的活塞508的电磁体509，此电磁体509可沿该 凹部506的纵长方向自由振动。气泵507固定在上述支架502的下 部。
图21所示荧光标记反应处理器511包括上面开有可收纳反应 容器519的竖长形孔512的固定块513和上面固定该固定块513 的支架514。此支架514的下面与上述固定块513对应的位置固定 有开有槽515的振动体516。此振动体516的槽515与固定在测定 装置A的装置本体20上面的板条状直线导向517咬合，上述固定 块513和支架514可通过上述振动体516沿直线导向517振动。
与上述直线导向517平行配置有气泵518，此气泵518的活塞 前端连接上述支架514的一下垂角514a。此结构使固定块513可 以随上述活塞的运动沿上述直线导向517振动。
下面，按照图22所示流程，说明用图20~21所示活性测定单 元制备活性测定用试样的处理实例。
首先，用分装设备3的吸移管向图20所示酶反应处理器501 的反应容器504注入含固定有CDK1 (或CDK2)抗体的磁珠的免 疫沉降前缓冲剂。再关闭电磁体509、关闭气泵507，将电磁体509 向下移动，以除去液体成份。然后打开电磁体509后，打开气泵 507，上移电磁体509。在此状态下用分装设备3吸移并废弃反应 容器504内的液体(步骤S51)。
下一步进行免疫沉降(抗体与CDK反应)(步骤S52)。先 用分装设备3的吸移管从放置在第一试剂放置器5的一个标本容器 中吸移活性值测定用标本，注入上述反应容器504。打开电磁体509 后向气泵507输送压縮空气，使该电磁体509上移(动作A)。在 关闭电磁体509后，关闭气泵507，使该电磁体509下移(动作B)。 反复进行动作A和动作B数十分钟到数小时。这样，磁珠就会在 反应容器504的壁表面上下移动，搅拌该反应容器504内的液体。 通过搅拌，标本中的CDK1 (CDK2)抗原可以高效地被固化在磁 珠表面的抗体捕捉。
接下来，进行清洗，以除去标本中的不要成份(步骤S53)。 首先，关闭电磁体509，关闭气泵507，使该电磁体509向下移动。 再打开电磁体509，之后打开气泵507，使该电磁体509上移。在 此状态下，用分装设备3吸移并废弃反应容器504中的液体。
接着，用分装设备3将酶反应前缓冲剂1注入反应容器504(步 骤S54)。关闭电磁体509后，关闭气泵507，使该电磁体509向下移动(动作C)。再打开电磁体509，之后打开气泵507，使该 电磁体509上移(动作D)。反复数次动作C和动作D。
然后，关闭电磁体509，关闭气泵507，使该电磁体509向下 移动。打开电磁体509之后，打开气泵507，使该电磁体509上移。 再用分装设备3吸移并废弃反应容器504中的液体。
再关闭电磁体509，关闭气泵507，使该电磁体509向下移动。 用分装设备3将酶反应前缓冲剂2注入反应容器504 (步骤S55)。 打开电磁体509之后，打开气泵507，使该电磁体509上移(动作 E)。再关闭电磁体509之后，关闭气泵507，使该电磁体509向 下移动(动作F)。反复数次动作E和动作F。
然后，关闭电磁体509，关闭气泵507，使该电磁体509向下 移动。打开电磁体509之后，打开气泵507，使该电磁体509上移。 再用分装设备3吸移并废弃反应容器504中的液体。
接下来，将基质试剂注入反应容器504，引起酶反应(步骤 S56)。先关闭电磁体509，关闭气泵507，使该电磁体509向下移 动。然后用分装设备3向反应容器504中注入基质试剂。打开电磁 体509之后，打开气泵507，使该电磁体509上移(动作G)。再 关闭电磁体509，关闭气泵507，使该电磁体509向下移动(动作 H)。重复动作G和动作H数十分钟到数小时。
然后，先关闭电磁体509，关闭气泵507，使该电磁体509向 下移动。再打开电磁体509之后，打开气泵507，使该电磁体509 上移，用分装设备3吸移一定量反应容器504中的液体，注入图 21所示荧光标记反应处理器511的反应容器519。
接下来，将荧光标记用试剂注入反应容器519，使之产生荧光
标记反应(步骤S57)。首先用分装设备3向反应容器519注入荧 光标记用试剂。
然后，反复开/关气泵518数十分钟，使固定有反应容器519 的固定块513沿直线导向517来回移动，以此搅拌该反应容器519 内的液体。经过一定时间后，关闭气泵518，停止上述搅拌动作。
下一步是将反应停止试剂注入反应容器519，停止标记反应 (步骤S58)。首先，用分装设备3向反应容器519注入反应停止 试剂。
然后，反复开/关气泵518数十分钟，使固定有反应容器519 的固定块513沿直线导向517来回移动，以此搅拌该反应容器519 内的液体。经过一定时间后，关闭气泵518，停止上述搅拌动作。
用分装设备3从反应容器519向固相蛋白质芯片101的规定芯 池分装荧光标记的反应生成物后，从下方吸移该固相蛋白质芯片 101 (步骤S59)。由此，含有荧光标记结合的磷酸基的HistonHl 固化在固相蛋白质芯片101的多孔质膜上。
接下来，同上述表达量测定用试样的制备处理中的步骤Sll 一样，洗净芯池(步骤S60)。
最后，反复向芯池内分装、排出消光用试剂六次(步骤S61)， 以对没有与导入HistonHl的磷酸基结合的荧光标记进行消光(背 景消光)。
以上仅就处理一项一个标本的单元的处理顺序进行了说明。进 行多项多个标本处理时，需要将图20所示酶反应处理器和图21 所示荧光标记反应处理器成组配置标本数X项目数。
此时，为了縮小这些单元在装置内所占面积，最好在图21所
示荧光标记反应处理器的固定块513上多开几个孔512，使固定块 513能固定数个反应容器519。另一方面，对于图20所示酶反应处 理器，考虑到需要在不同时机搅拌各个反应容器504，以进行B/F 分离，并分别控制电磁体，以及不让磁力影响到其他反应容器504 内的磁珠，最好不要在一个固定块503上放置数个反应容器504。
上述实施方式的固相蛋白质芯片其多孔质膜夹在上下板条之 间，也可以将多孔质膜粘固在开有数个贯通孔的一片板条底面，形 成数个芯池。此时，为了可以独立吸移数个区域，在上述固相蛋白 质芯片中粘附有多孔质膜的一面配置吸移设备，该吸移设备有与区 域数相应数量的独立分区，能独立吸移各分区。各分区紧贴板条底 面，使该分区的开口边缘密封地罩住所对应的整个区域。
前述的详细说明及附图是通过文字解释和图示来进行的，其目 的不在于限定权利要求的保护范围。本说明书中的具体实施方式
的 各个变种对于普通技术人员来说显而易见，并处于权利要求及其等 同技术的保护范围内。
权利要求
1.一种用于在多孔质膜上形成固相蛋白质的固相蛋白质芯片，包括底板，有开有数个贯通孔的第一区域和开有数个贯通孔的第二区域；第一多孔质膜；第一板条，有与第一区域相对而设并开有多个贯通孔的第三区域，第一多孔质膜夹在该第三区域和第一区域之间；第二多孔质膜；第二板条，有与第二区域相对而设并开有数个贯通孔的第四区域，第二多孔质膜夹在第四区域和第二区域之间。
2. 根据权利要求1所述固相蛋白质芯片，其特征在于 第一板条配置在底板上，使第三区域上的各贯通孔和第一多孔质膜形成芯池；第二板条配置在底板上，使第四区域上的各贯通孔和第二多孔 质膜形成芯池。
3. 根据权利要求1所述固相蛋白质芯片，其特征在于 第一板条配置在底板上，使第一区域的各贯通孔和第三区域的各贯通孔为同轴配置；第二板条配置在底板上，使第二区域的各贯通孔和第四区域的 各贯通孔为同轴配置。
4. 根据权利要求1所述固相蛋白质芯片，其特征在于-第一板条有一用于区分第一区域和第二区域的第一凸部。
5. 根据权利要求4所述固相蛋白质芯片，其特征在于第一凸部为垄状。
6. 根据权利要求5所述固相蛋白质芯片，其特征在于 底板还有一垄状第二凸部，将包括第一区域和第二区域在内的区域四周围住。
7. 根据权利要求6所述固相蛋白质芯片，其特征在于 第一板条和第二板条分别具有与底板的第二凸部咬合的槽。
8. 根据权利要求6所述固相蛋白质芯片，其特征在于 第一凸部和第二凸部连为一体。
9. 根据权利要求6所述固相蛋白质芯片，其特征在于 第一凸部和第二凸部在底板上形成放置多孔质膜的区域。
10. 根据权利要求1所述固相蛋白质芯片，其特征在于还有第一滤膜和第二滤膜；第一多孔质膜和第一滤膜夹在第三区域和第一区域之间； 第二多孔质膜和第二滤膜夹在第四区域和第二区域之间。
11. 根据权利要求1所述固相蛋白质芯片，其特征在于 在第一多孔质膜上形成表达量测定用固相蛋白质； 在第二多孔质膜上形成活性值测定用固相蛋白质。
12. 根据权利要求11所述固相蛋白质芯片，其特征在于 蛋白质为含在生物试样中的蛋白质。
13. 根据权利要求12所述固相蛋白质芯片，其特征在于 生物试样为癌组织。
14. 根据权利要求11所述固相蛋白质芯片，其特征在于 蛋白质为周期素依赖性激酶。
15. —种固相蛋白质形成装置，包括固相蛋白质芯片固定器，固定用于在多孔质膜上形成固相蛋白 质的固相蛋白质芯片；第一吸移设备，与固定在固相蛋白质芯片固定器上的固相蛋白质芯片第一区域相对而设；第二吸移设备，与固定在固相蛋白质芯片固定器上的固相蛋白 质芯片第二区域相对而设；以及吸移驱动器，有选择地驱动第一吸移设备和第二吸移设备；其中，固相蛋白质芯片包括底板，有开有数个贯通孔的第一区域和开有数个贯通孔的第二 区域；第一多孔质膜；第一板条，有与第一区域相对而设并开有多个贯通孔的第三区 域，第一多孔质膜夹在该第三区域和第一区域之间； 第二多孔质膜；第二板条，有与第二区域相对而设并开有数个贯通孔的第四区 域，第二多孔质膜夹在第四区域和第二区域之间。
16. 根据权利要求15所述固相蛋白质形成装置，其特征在于 在第一多孔质膜上形成表达量测定用固相蛋白质； 在第二多孔质膜上形成活性值测定用固相蛋白质。
17. 根据权利要求16所述固相蛋白质形成装置，其特征在于: 还包括盛放溶解生物试样所得的第一试样和第一试样中待测蛋白质 基质的盛放装置；用第一试样和基质制备活性测定用第二试样的制样器；向第三区域的贯通孔分装第一试样、向第四区域的贯通孔分装 第二试样的分装设备。
18. 根据权利要求17所述固相蛋白质形成装置，其特征在于 盛放设备可盛放与待测蛋白质特异性结合的第一标记物和与待测蛋白质与基质的反应生成物特异性结合的第二标记物； 制样器用第一试样、基质和第二标记物制备第二试样； 分装设备向装有第一试样的第三区域贯通孔分装第一标记物，向第四区域的贯通孔分装制样器制备的第二试样。
19. 一种测定蛋白质的表达量和活性值的测定装置，包括 固相蛋白质形成装置；测定装置，通过测定在第一多孔质膜上形成的表达量测定用固 相来测定待测蛋白质表达量、通过测定在第二多孔质膜上形成的活 性测定用固相来测定待测蛋白质活性值；其中，固相蛋白质形成装置包括固相蛋白质芯片固定器，固定用于在多孔质膜上形成固相蛋白 质的固相蛋白质芯片；第一吸移设备，与固定在固相蛋白质芯片固定器上的固相蛋白 质芯片第一区域相对而设；第二吸移设备，与固定在固相蛋白质芯片固定器上的固相蛋白 质芯片第二区域相对而设；以及吸移驱动器，有选择地驱动第一吸移设备和第二吸移设备；及固相蛋白质芯片，包括底板，有开有数个贯通孔的第一区域和开有数个贯通孔的第二 区域；第一多孔质膜；第一板条，有与第一区域相对而设并开有多个贯通孔的第三区 域，第一多孔质膜夹在该第三区域和第一区域之间； 第二多孔质膜；第二板条，有与第二区域相对而设并开有数个贯通孔的第四区 域，第二多孔质膜夹在第四区域和第二区域之间。
全文摘要
本发明提供一种在多孔质膜上形成固相蛋白质的固相蛋白质芯片，该固相蛋白质芯片包括有开有数个贯通孔的第一区域和开有数个贯通孔的第二区域的底板；第一多孔质膜；第一板条，与底板的第一区域相对而设，有与第一区域相对并开有多个贯通孔的第三区域、第一多孔质膜夹在第一区域和第三区域之间；第二多孔质膜；第二板条，与底板的第二区域相对而设，具有与第二区域相对并开有多个贯通孔的第四区域、第二多孔质膜夹在第四区域和第二区域之间。用此固相芯片可以减少固化所需时耗，缩小由于注入时间差带来的每芯池的蛋白质试样状态的差异。
文档编号G01N33/53GK101201352SQ20071019907
公开日2008年6月18日 申请日期2007年12月12日 优先权日2006年12月13日
发明者小林弘典 申请人:希森美康株式会社