专利名称：一种元胡止痛软胶囊的制备方法与质量检测方法
技术领域：
本发明涉及一种中药组合物制备方法与质量检测方法，具体涉及一种元胡止痛软 胶囊的制备方法及质量检测方法。
背景技术：
《中华人民共和国药典》(2005年版)一部中记载了元胡止痛片的一些技术内容， 如处方、制法、鉴别、含量测定、功能主治、用法用量等内容。现有的元胡止痛片服用量较大，本发明在现有技术的基础上，对现有技术的制备 方法进行了改进创新，制备成软胶囊剂型，提高了单位剂量的药物含量，可以大大地减少服 用量，而且具有起效快，生物利用度高，精制、美观、卫生、口感好等多项优点。
发明内容
本发明目的是提供一种元胡止痛软胶囊及其制备方法；本发明的另一目的是提供该药物的质量检测方法，以便有效地控制本发明药物的质量。本发明的目的是通过以下技术方案实现的—种元胡止痛软胶囊，其制备方法为延胡索(醋制)1000 1600重量份，白芷 500 800重量份，以上二味，粉碎，用70% 90%乙醇浸泡，加热回流提取1 3次，每次 1 3小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩，干燥，粉碎，过筛，与含蜂蜡的精制植物油充 分混勻，磨勻，过筛，制成软胶囊。上述制备方法的优选为延胡索(醋制)1333. 3重量份，白芷666. 7重量份，以上 二味，粉碎成粗粉，用80%乙醇浸泡12小时，加热回流提取二次，每次2小时，合并提取液， 滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1. 20 1. 30，减压干燥，粉碎，过筛，与含2%蜂蜡的精制 植物油充分混勻，经胶体磨磨勻，过筛，制成软胶囊。本发明提供的元胡止痛软胶囊，可以采用以下的质量检测方法进行质量控制取本品软胶囊内容物，加甲醇超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，加浓氨 试液调至碱性，用乙醚振摇提取，挥干乙醚提取液，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；另取 延胡索对照药材，同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液；照薄层色谱法检测，吸取上述 两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-二氯甲烷-甲醇比例为5 10 2 6 0.5 1.5为展开剂，置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置碘蒸气熏后，置 紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。这种质量检测方法优选的技术方案为取软胶囊内容物0. 5g，加甲醇50ml超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水 IOml使溶解，加浓氨试液调至碱性，用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液，挥干，残 渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药材溶液； 照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-二氯甲烷-甲醇比例为7. 5 4 1为展开剂，置氨 蒸气预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置碘蒸气熏10秒钟后，置365nm的紫外光灯下检 视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。本发明提供的元胡止痛软胶囊，还可以采用以下的质量检测方法进行质量控制照高效液相色谱法试验，(1)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水 比例为45 65 35 55为流动相，检测波长280 320nm;(2)供试品溶液制备取本品内容物0. 5 1. 5g，加石油醚5 15ml浸泡1 7 分钟，弃去石油醚液，残渣加乙酸乙酯10 20ml，超声处理10 30分钟，滤过，滤液蒸干， 用甲醇溶解并移至IOml的量瓶内，加甲醇至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，即为供试品溶液；(3)对照品溶液制备另取欧前胡素对照品，加甲醇制成每Iml含0. Img溶液，作 为对照品溶液；(4)测定法分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5 20μ 1，注入液相色谱仪测定。这种质量检测方法优选的技术方案为照高效液相色谱法试验，(1)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水 比例为55 45为流动相，检测波长300歷，柱温:30°C ；(2)供试品溶液制备取本品内容物lg，加石油醚IOml浸泡3 5分钟，弃去石油 醚液，残渣加乙酸乙酯15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，用甲醇溶解并移至IOml的 量瓶内，加甲醇至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，即为供试品溶液；(3)对照品溶液制备另取欧前胡素对照品，加甲醇制成每Iml含0. Img溶液，作 为对照品溶液；(4)测定法分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪测定；(5)测定结果供试品色谱中应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰。发明人对供试品、对照品及阴性供试品进行测定，检测结果见附图1，由图可见，该 方法稳定，灵敏度好，精确度高。本发明提供的元胡止痛软胶囊，还可以采用以下的质量检测方法进行质量控制采用高效液相色谱法进行含量测定(1)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-磷 酸盐缓冲溶液比例为20 40 60 80为流动相；检测波长为270 290nm ；本发明中磷酸盐缓冲溶液的配置方法为取磷酸氢二钠2. 0g，磷酸二氢钠8. Og, 加水使溶解成IOOOml ；(2)对照品溶液的制备精密称取延胡索乙素对照品适量，用甲醇制成每Iml含 10 50 μ g的溶液，即得对照品溶液；(3)供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，混勻，精密称定，精密加 入甲醇，称定重量，振摇，超声提取，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过， 取续滤液，即得供试品溶液；(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2 20μ 1，注入液相色谱仪，测定；这种质量检测方法优选的技术方案为采用高效液相色谱法进行含量测定(1)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-磷 酸盐缓冲溶液比例为38 62为流动相，检测波长为280nm，柱温30°C ；(2)对照品溶液的制备精密称取延胡索乙素对照品适量，用甲醇制成每Iml含 30 μ g的溶液，即得对照品溶液；(3)供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，混勻，取约0. 5 1. 5g，精 密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 75ml，称定重量，强力振摇3 10分钟，超声 提取5 15分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液，即得供 试品溶液；(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪， 测定，即得。此方法更为优选的技术方案为(1)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-磷 酸盐缓冲溶液比例为38 62为流动相，检测波长为280nm，柱温30°C，理论板数按延胡索 乙素峰计算应不得低于6500 ；(2)对照品溶液的制备精密称取延胡索乙素对照品适量，用甲醇制成每Iml含 30 μ g的溶液，即得对照品溶液；(3)供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，混勻，取约lg，精密称定， 置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，强力振摇5分钟，超声(250w，40KHz)提取 10分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液。(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪， 测定，即得；(5)测定结果本品每粒含延胡索以延胡索乙素(C21H25NO4)计，不得少于0. 25mg。发明人对本发明提供的技术方案进行了实验研究，用以证明本发明中药组合物的 治疗作用以及本发明质量控制方法的精密度、准确度、稳定性等。下述实验用于进一步说明 本发明的效果，但不限制本发明。对本发明组合物的实验研究实验一本发明元胡止痛软胶囊的镇痛实验1.试验目的通过镇痛实验，观察元胡止痛软胶囊的镇痛作用，评价其效果，为临床应用提供药 效学依据。2.试验材料2. 1试验动物ICR小鼠，体重20士2g，雌雄均用；SD大鼠，体重200士20g，雌雄各半。由南京军区 总医院提供，合格证SCXK(苏)2003-0004。2. 2药物与试剂本发明实施例1的元胡止痛软胶囊，规格5. Og生药/0. 5g/粒；
元胡止痛片，来源陕西省恒心堂制药有限公司，0. 3g/粒；元胡止痛胶囊，来源惠州九惠药业有限公司，0. 3g/粒；布洛芬胶囊，来源湖南康尔佳药业集团，规格0. 2g/粒；冰乙酸，来源北京恒通化工有限公司，规格500ml/瓶。3.试验方法与结果3.1小鼠醋酸扭体实验3. 1. 1方法选用ICR雄性小鼠80只，随机分为8组空白对照组，元胡止痛软胶囊 中剂量组(0. 27g生药/kg)，元胡止痛软胶囊高剂量组(0. 54g生药/kg)，布洛芬组(0. 054g 生药/kg)，元胡止痛胶囊中剂量组(0. 27g生药/kg)，元胡止痛胶囊高剂量组(0. 54g生药 /kg)，元胡止痛片中剂量组(0. 27g生药/kg)，元胡止痛片高剂量组(0. 54g生药/kg)，每组 10只。所有动物在实验前禁食12h，饮水不限。按0.2ml/10g体重灌胃给药。给药后60min 小鼠腹腔注射0. 6%醋酸，每只0. 2ml。观察小鼠的扭体反应，以腹部收缩、伸展后肢或臀部 抬高为扭体反应阳性。注射醋酸后5min开始记录20min内小鼠扭体的次数。3. 1. 2结果元胡止痛软胶囊各剂量组均有明显抑制小鼠扭体的作用。见表1。表1.元胡止痛软胶囊给药小鼠醋酸扭体反应结果(η = 10，χ士 s) 与至白对照组比较广ρ <0.013. 2大鼠甩尾法镇痛实验3. 2. 1方法取SD大鼠，雌雄各半，体重200士20g。以55士 1°C恒温水浴为热致 痛源。大鼠固定后，将其尾尖部(5cm)放入热水中，记录大鼠尾部入水到缩离水面的时间， 3min后再测一次，挑选缩尾反应时间在3 IOs以内的大鼠80只，随机分为8组空白对 照组，元胡止痛软胶囊中剂量组(0. 27g生药/kg)，元胡止痛软胶囊高剂量组(0. 54g生药/ kg)，布洛芬组(0. 054g生药/kg)，元胡止痛胶囊中剂量组(0. 27g生药/kg)，元胡止痛胶囊 高剂量组(0. 54g生药/kg)，元胡止痛片中剂量组(0. 27g生药/kg)，元胡止痛片高剂量组 (0. 54g生药/kg)，每组10只。按2ml/100g体重灌胃给药，于给药后60min再次测定大鼠 的甩尾时间，比较给药前后各组甩尾时间的差异。3. 2. 2结果结果表明，空白对照组个别大鼠在给药后偶有出现缩尾反应延长现 象。元胡止痛软胶囊组出现的镇痛有效数随剂量的加大而增多。见表2。表2.元胡止痛软胶囊大鼠甩尾试验镇痛结果(n = 10,i±s )
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与空白对照组比较广ρ < 0. 014.结论本发明元胡止痛软胶囊具有较好的镇痛作用，并且其效果要优于元胡止 痛胶囊和元胡止痛片。实验二 对本发明质量检测方法的研究与说明1、仪器、试剂及对照品AgilentllOO高效液相色谱仪；MWD紫外检测器；本发明元胡止痛软胶囊；延胡索 乙素对照品(中国药品生物制品检定所)；乙腈(色谱纯)，水(超纯水)，其余试剂均为分 析纯。2、色谱条件色谱柱C18柱流动相经研究，选择乙腈-磷酸盐缓冲液比例为38 62作为流动相；磷酸盐缓 冲液为取磷酸氢二钠2. 0g，磷酸二氢钠8. 0g，加水使溶解成1000ml，即得；测定波长经研究，测定波长定为280nm。柱温30°C。3、系统适应性研究经研究，理论塔板数不得低于6500。4、供试品溶液的制备(1)提取方法与提取溶剂的确定经研究表明，以甲醇振摇超声的方法能将样品中延胡索乙素较完全地提取，所以 确定用甲醇振摇超声的方法做为提取方法。(2)溶剂用量的确定经研究，溶剂的用量为50ml。(3)提取时间的确定取本品内容物，混勻，取3份，每份约lg，精密称定，分别加甲醇50ml，称定重量，振 摇5min，超声(250w，40KHz)提取5min、10min、20min，放冷，称重，用甲醇补足减失重量，滤 过，取续滤液，用微孔滤膜(0. 45 μ m)滤过，取续滤液，进样10μ 1，测定延胡索乙素的含量， 结果表明，超声提取IOmin时能将样品中延胡索乙素提取完全，故选择提取时间为IOmin. 结果见下表
表3提取时间的考察 5、对照品溶液、供试品溶液及阴性供试品溶液的制备(1)对照品溶液的制备经研究，对照品溶液的制备方法为取延胡索乙素对照品适量，加甲醇制成每Iml 含30 μ g的溶液，即得。(2)供试品溶液的制备经研究，供试品溶液的制备方法为取本品装量差异项下的内容物，混勻，取 约lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，强力振摇5分钟，超声 (250w,40KHz)提取10分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤 液作为供试品溶液。6、线性关系研究精密称取延胡索乙素对照品13. 48mg，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻 度，摇勻，得浓度为134. 8 μ g/ml的标准品储备液，分别精密吸取上述溶液0. 5ml，Iml，2ml， 4ml，8ml，10ml，置IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇勻，即得。分别进样10 μ 1，以进样浓 度为横坐标(X)，峰面积为纵坐标(Y)，绘制标准曲线。结果表明延胡索乙素在6.74yg/ ml 134. 8 μ g/ml范围内呈良好线性关系，回归方程为Y = 8. 7783X+2. 9507，r = 1，结果 见下表及附图2 表4标准曲线的测定 7、精密度试验精密吸取对照品溶液(26. 96 μ g/ml) 10 μ 1，重复进样6次，测得峰面积积分值，计 算RSD = 1.0%。见表下表。表5精密度试验 8、稳定性试验取本品内容物，按供试品溶液制备方法制备供试品溶液，精密吸取供试品溶液 10 μ 1，分别第0、1、2、4、8、12小时进样一次，共进样6次，测得峰面积积分值，计算RSD = 0.98%，结果表明，延胡索乙素峰面积在12小时内基本稳定。见表下表。表6稳定性试验 9、重复性试验取本品内容物，按供试品溶液制备方法制备，平行试验6份，测定，结果延胡索乙 素平均含量为0. 63mg/粒，RSD = 1. 90%。结果见下表。表7重复性试验 10、加样回收率试验取已知含量的样品六份，各0. 5g，分别精密加入延胡索乙素对照品溶液(0. 65mg/ ml) 1ml，按供试品溶液制备方法制备供试品溶液，测定。结果见下表。表8加样回收率试验 实验三元胡止痛软胶囊治疗肝胃气滞型胃痛的临床疗效观察为了观察本发明元胡止痛软胶囊在治疗肝胃气滞型胃痛的临床疗效，为临床应用 提供依据。1.资料100例患者均有肝胃气滞的证候，临床表现为胃脘痞胀疼痛或攻窜胁背，嗳气频 作，舌苔薄白，脉弦等。年龄15岁以上17例，25岁以上31例，35岁以上28例，45岁以上 14例，55岁以上10例。男性44例，女性56例。病程最短为3天，最长为1年。分为治疗 组和对照组各50例。2.治疗及观察方法2.1治疗方法治疗组以本发明元胡止痛软胶囊治疗，口服，一次2粒，一日3次；对照组以元胡止痛片治疗，口服，一次6片，一日3次。治疗组与对照组均连续治疗3周后进行疗效评定。2. 2疗效标准显效临床症状基本消失，情绪稳定，心情舒畅；有效临床症状有明显改善，情绪较畅，但时有波动；无效临床症状及情绪状态无改善。2.3统计方法统计分析应用u检验。3.结果
两组分别治疗3周后，治疗组总有效率94. 0%，对照组74. 0%，结果见表9。经统计学处理，两组比较差异有高度显著性(U = 2. 73，P < 0. 01)。表9两组肝胃气滞型胃痛治疗结果 4.结论通过上述100例临床观察分析，本发明元胡止痛软胶囊在治疗肝胃气滞型胃痛 时，患病症状明显缓解，显效率达50%，有效率为44%，说明元胡止痛软胶囊具有治疗肝胃 气滞型胃痛的作用，可广泛用于肝胃气滞型胃痛的治疗，并且疗效明显优于元胡止痛片，具 有重要的临床价值。本发明的有意效果1、采用本发明的技术将药物制成软胶囊剂型，增加了药物的稳定性，提高原剂型 的疗效，处方中白芷含有挥发性的活性成分，而现有技术制成的片剂及相关剂型，挥发性成 分易挥发损失，影响药物应有的疗效。2、采用本发明的技术将药物制成软胶囊剂型，应用范围广，纯中药制剂，不含糖， 便于老年人及糖尿病患者服用。3、采用本发明的技术将药物制成软胶囊剂型，起效快，生物利用度高，所包含的药 物是以分散体的形式存在，与基质充分分散，进入胃肠迅速崩解而被人体吸收，达到有效血 药浓度而显效。4、精制、美观，中药提取物，需进行精制，杂质含量低。5、一次成型，软胶囊是全封闭剂型，减少了污染的机会，保证了药品的卫生学质 量，片剂为全粉末制剂，卫生学指标难以保证。6、口感好，掩盖了药物中挥发性成分的不良气味和不适的嗅味，便于服用。7、服用量少，携带方便，而现有技术元胡止痛片或胶囊等，服用量大，患者不易接 受，采用本发明的技术，制成软胶囊后，服用量减少，易于产品推广。8、现有技术中有采用薄层色谱法对欧前胡素进行鉴别的技术方案，但是该技术方 案中要喷以磷钼酸试液或其他显色剂，并加热显色，由于显色剂性质不稳定、加热温度差 异、显色不均勻等情况，都有可能影响对鉴别结果的判断；因此，本发明克服了现有技术的 缺陷，利用液相色谱技术，采用高效液相色谱法进行鉴别，该方法稳定，灵敏度高，重现性 好，且阴性无干扰。9、本发明含量测定方法中供试品溶液的制备方法步骤较为简化，可以减少中间步 骤造成的损失及缩短检验周期，采用高效液相色谱法重现性、准确性、精密度、灵敏度都很 好，受外界影响因素较少。
附图1 欧前胡素液相色谱图附图2 延胡索乙素标准曲线
具体实施例方式实施例1 处方延胡索(醋制)1333. 3g，白芷666. 7g制法以上二味，粉碎成粗粉，用80%乙醇浸泡12小时，加热回流提取二次，每次 2小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1. 30 1. 32的浸膏，与适量精制食 用植物油及辅料适量，混勻，过筛，压制成软胶囊1000粒，即得；鉴别(1)取本品内容物0.5g，加甲醇50ml超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残 渣加水IOml使溶解，加浓氨试液调至碱性，用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液，挥 干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药材 溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5ul， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-二氯甲烷-甲醇比例为7. 5 4 1为展开剂， 置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置碘蒸气熏10秒钟后，置紫外光灯(365nm) 下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2)照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水比例为55 45为流动相， 检测波长300nm，柱温30°C ；取本品内容物lg，加石油醚(60 90°C ) IOml浸泡3 5分钟，弃去石油醚液，残 渣加乙酸乙酯15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，用甲醇溶解并移至IOml的量瓶内， 加甲醇至刻度，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取欧前胡素对照品，加甲醇制成每Iml含0. Img溶液，作为对照品溶液；分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪测定；供试品色谱中应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰。含量测定延胡索照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-磷酸 盐缓冲液比例为38 62为流动相；检测波长280nm;柱温30°C;理论板数按延胡索乙素峰 计算应不得低于6500 ；磷酸盐缓冲液制备方法为取磷酸氢二钠2. 0g，磷酸二氢钠8. 0g，加水使溶解成 1000ml,即得；对照品溶液的制备精密称取延胡索乙素对照品适量，用甲醇制成每Iml含30 μ g 的溶液；供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，混勻，取约lg，精密称定，置 具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，强力振摇5分钟，超声(250w，40KHz)提取10 分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测 定，即得；本品每粒含延胡索以延胡索乙素(C21H25NO4)计，不得少于0. 25mg ；功能与主治理气、活血，止痛；用于气滞血瘀的胃痛、胁痛，头痛及痛经等；用法与用量口服，一次2粒，一日3次；
规格每粒装0.5g。实施例2:处方延胡索(醋制)IOOOg,白芷800g制法以上二味，粉碎成粗粉，用70%乙醇浸泡24小时，加热回流提取1次，每次 3小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1. 20 1. 25的浸膏，与适量精制食 用植物油及辅料适量，混勻，过筛，压制成软胶囊1000粒，即得；鉴别(1)取本品内容物0.5g，加甲醇50ml超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残 渣加水IOml使溶解，加浓氨试液调至碱性，用乙醚振摇提取2次，每次10ml，合并乙醚液，挥 干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药材 溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5ul， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-二氯甲烷-甲醇比例为5 2 0.5为展开剂， 置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置碘蒸气熏15秒钟后，置紫外光灯(365nm) 下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2)照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)试验，用十八烷基硅 烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水比例为45 35为流动相，检测波长290nm，柱温30°C ；取本品内容物0. 5g，加石油醚(60 90°C )5ml浸泡2分钟，弃去石油醚液，残渣 加乙酸乙酯10ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，用甲醇溶解并移至IOml的量瓶内，加 甲醇至刻度，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取欧前胡素对照品，加甲醇制成每Iml含0. Img溶液，作为对照品溶液；分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5μ 1，注入液相色谱仪测定；供试品色谱中应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰。含量测定延胡索照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-磷酸 盐缓冲液比例为20 60为流动相；检测波长270nm;柱温30°C;理论板数按延胡索乙素峰 计算应不得低于6500 ；对照品溶液的制备精密称取延胡索乙素对照品适量，用甲醇制成每Iml含15μ g 的溶液；供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，混勻，取约0.5g，精密称定， 置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，强力振摇4分钟，超声(250w，40KHz)提取 6分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 μ 1，注入液相色谱仪，测定， 即得；本品每粒含延胡索以延胡索乙素(C21H25NO4)计，不得少于0. 25mg ；功能与主治理气、活血，止痛；用于气滞血瘀的胃痛、胁痛，头痛及痛经等；用法与用量口服，一次2粒，一日3次；规格每粒装0.5g。实施例3:处方延胡索(醋制)1600g,白芷500g制法以上二味，粉碎成粗粉，用90%乙醇浸泡16小时，加热回流提取3次，每次2. 5小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1. 30 1. 35的浸膏，与适量精制 食用植物油及辅料适量，混勻，过筛，压制成软胶囊1000粒，即得；鉴别(1)取本品内容物0.5g，加甲醇50ml超声处理40分钟，滤过，滤液蒸干，残 渣加水15ml使溶解，加浓氨试液调至碱性，用乙醚振摇提取2次，每次10ml，合并乙醚液，挥 干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药材 溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5ul， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-二氯甲烷-甲醇比例为10 6 1.5为展开剂， 置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置碘蒸气熏12秒钟后，置紫外光灯(365nm) 下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2)照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)试验，用十八烷基硅 烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水比例为65 55为流动相，检测波长310nm，柱温30°C ；取本品内容物1.5g，加石油醚(60 90°C ) 15ml浸泡6分钟，弃去石油醚液，残渣 加乙酸乙酯20ml，超声处理25分钟，滤过，滤液蒸干，用甲醇溶解并移至IOml的量瓶内，加 甲醇至刻度，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取欧前胡素对照品，加甲醇制成每Iml含0. Img溶液，作为对照品溶液；分别吸取对照品溶液与供试品溶液各20 μ 1，注入液相色谱仪测定；供试品色谱中应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰。含量测定延胡索照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-磷酸 盐缓冲液比例为40 78为流动相；检测波长280nm;柱温30°C;理论板数按延胡索乙素峰 计算应不得低于6500 ；对照品溶液的制备精密称取延胡索乙素对照品适量，用甲醇制成每Iml含40 μ g 的溶液；供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，混勻，取约1.5g，精密称定， 置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，强力振摇10分钟，超声(250w，40KHz)提 取15分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶 液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各15μ 1，注入液相色谱仪，测 定，即得；本品每粒含延胡索以延胡索乙素(C21H25NO4)计，不得少于0. 25mg ；功能与主治理气、活血，止痛；用于气滞血瘀的胃痛、胁痛，头痛及痛经等；用法与用量口服，一次2粒，一日3次；规格每粒装0. 5g。实施例4 处方延胡索(醋制)1200g，白芷800g制法以上二味，粉碎成粗粉，用75 %乙醇浸泡8小时，加热回流提取二次，每次 2. 5小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1. 30 1. 35的浸膏，与适量精制 食用植物油及辅料适量，混勻，过筛，压制成软胶囊1000粒，即得；鉴别(1)取本品内容物0.5g，加甲醇50ml超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残
15渣加水IOml使溶解，加浓氨试液调至碱性，用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液， 挥干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药 材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各 5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-二氯甲烷-甲醇比例为7 4.5 1.2为 展开剂，置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置碘蒸气熏12秒钟后，置紫外光灯 (365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2)照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)试验，用十八烷基硅 烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水比例为55 45为流动相，检测波长300nm，柱温30°C ；取本品内容物lg，加石油醚(65°C ) IOml浸泡5分钟，弃去石油醚液，残渣加乙酸 乙酯10ml，超声处理25分钟，滤过，滤液蒸干，用甲醇溶解并移至IOml的量瓶内，加甲醇至 刻度，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取欧前胡素对照品，加甲醇制成每Iml含0. Img溶液，作为对照品溶液；分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5μ 1，注入液相色谱仪测定；供试品色谱中应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰。含量测定延胡索照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-磷酸 盐缓冲液比例为40 65为流动相；检测波长280nm;柱温35°C;理论板数按延胡索乙素峰 计算应不得低于6500 ；磷酸盐缓冲液制备方法为取磷酸氢二钠2. 0g，磷酸二氢钠8. 0g，加水使溶解成 1000ml,即得；对照品溶液的制备精密称取延胡索乙素对照品适量，用甲醇制成每Iml含35 μ g 的溶液；供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，混勻，取约lg，精密称定，置 具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，强力振摇5分钟，超声(250w，40KHz)提取15 分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 μ 1，注入液相色谱仪，测定， 即得；本品每粒含延胡索以延胡索乙素(C21H25NO4)计，不得少于0. 25mg ；功能与主治理气、活血，止痛；用于气滞血瘀的胃痛、胁痛，头痛及痛经等；用法与用量口服，一次2粒，一日3次；规格每粒装0. 5g。实施例5 处方延胡索(醋制)1333. 3g，白芷666. 7g制法以上二味，粉碎成粗粉，用75%乙醇浸泡10小时，加热回流提取3次，每次 1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.31的浸膏，与适量精制食用植 物油及辅料适量，混勻，过筛，压制成软胶囊1000粒，即得；鉴别(1)取本品内容物0.5g，加甲醇50ml超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残 渣加水IOml使溶解，加浓氨试液调至碱性，用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液，挥 干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5ul， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-二氯甲烷-甲醇比例为8 4 1.5为展开剂， 置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置碘蒸气熏10秒钟后，置紫外光灯(365nm) 下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2)照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)试验，用十八烷基硅 烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水比例为55 45为流动相，检测波长300nm，柱温30°C ；取本品内容物lg，加石油醚(70°C ) IOml浸泡4分钟，弃去石油醚液，残渣加乙酸 乙酯15ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，用甲醇溶解并移至IOml的量瓶内，加甲醇至 刻度，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取欧前胡素对照品，加甲醇制成每Iml含0. Img溶液，作为对照品溶液；分别吸取对照品溶液与供试品溶液各20 μ 1，注入液相色谱仪测定；供试品色谱中应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰。含量测定延胡索照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-磷酸 盐缓冲液比例为35 55为流动相；检测波长280nm;柱温30°C;理论板数按延胡索乙素峰 计算应不得低于6500 ；磷酸盐缓冲液制备方法为取磷酸氢二钠2. Og,磷酸二氢钠8. Og,加水使溶解成 1000ml,即得；对照品溶液的制备精密称取延胡索乙素对照品适量，用甲醇制成每Iml含30 μ g 的溶液；供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，混勻，取约lg，精密称定，置 具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，强力振摇8分钟，超声(250w，40KHz)提取15 分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各15μ 1，注入液相色谱仪，测 定，即得；本品每粒含延胡索以延胡索乙素(C21H25NO4)计，不得少于0. 25mg ；功能与主治理气、活血，止痛；用于气滞血瘀的胃痛、胁痛，头痛及痛经等；用法与用量口服，一次2粒，一日3次；规格每粒装0. 5g。
1权利要求
一种元胡止痛软胶囊，其特征在于该药物的制备方法为延胡索(醋制)1000～1600重量份，白芷500～800重量份，以上二味，粉碎，用70％～90％乙醇浸泡，加热回流提取1～3次，每次1～3小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩，干燥，粉碎，过筛，与含蜂蜡的精制植物油充分混匀，磨匀，过筛，制成软胶囊。
2.如权利要求1所述的元胡止痛软胶囊的制备方法为，其特征为延胡索(醋 制)1333. 3重量份，白芷666. 7重量份，以上二味，粉碎成粗粉，用80%乙醇浸泡12小时，加 热回流提取二次，每次2小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1. 20 1. 35， 减压干燥，粉碎，过筛，与含2%蜂蜡的精制植物油充分混勻，经胶体磨磨勻，过筛，制成软胶囊。
3.如权利要求1或2所述的元胡止痛软胶囊，其特征在于该药物可以采用以下质量检 测方法进行质量控制取本品软胶囊内容物，加甲醇超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加水使 溶解，加浓氨试液调至碱性，用乙醚振摇提取，挥干乙醚提取液，残渣加甲醇溶解，作为供试 品溶液；另取延胡索对照药材，同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液；照薄层色谱法 检测，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-二氯甲烷-甲醇比例 为5 10 2 6 0.5 1.5为展开剂，置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干， 置碘蒸气熏后，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相 同颜色的斑点。
4.如权利要求3所述的元胡止痛软胶囊的质量检测方法，其特征为取软胶囊内容物 0. 5g，加甲醇50ml超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水IOml使溶解，加浓氨试液 调至碱性，用乙醚振摇提取3次，每次IOml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇Iml使溶解，作 为供试品溶液；另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取 上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-二氯甲烷-甲醇比例为 7.5 4 1为展开剂，置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置碘蒸气熏10秒钟 后，置365nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同 颜色的斑点。
5.如权利要求1或2所述的元胡止痛软胶囊，其特征在于该药物可以采用以下质量检 测方法进行质量控制照高效液相色谱法试验(1)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水比例 为45 65 35 55为流动相，检测波长280 320nm;(2)供试品溶液制备取本品内容物0.5 1. 5g，加石油醚5 15ml浸泡1 7分钟， 弃去石油醚液，残渣加乙酸乙酯10 20ml，超声处理10 30分钟，滤过，滤液蒸干，用甲醇 溶解并移至IOml的量瓶内，加甲醇至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，即为供试品溶液；(3)对照品溶液制备另取欧前胡素对照品，加甲醇制成每Iml含0.Img溶液，作为对 照品溶液；(4)测定法分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5 20μ1，注入液相色谱仪测定。
6.如权利要求5所述的元胡止痛软胶囊的质量检测方法，其特征为照高效液相色谱 法试验，(1)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水比例 为55 45为流动相，检测波长300nm，柱温30°C ；(2)供试品溶液制备取本品内容物lg，加石油醚IOml浸泡3 5分钟，弃去石油醚 液，残渣加乙酸乙酯15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，用甲醇溶解并移至IOml的量 瓶内，加甲醇至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，即为供试品溶液；(3)对照品溶液制备另取欧前胡素对照品，加甲醇制成每Iml含0.Img溶液，作为对 照品溶液；(4)测定法分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪测定；(5)测定结果供试品色谱中应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰。
7.如权利要求1或2所述的元胡止痛软胶囊，其特征在于该药物可以采用以下质量检 测方法进行质量控制采用高效液相色谱法进行含量测定，本软胶囊每粒含延胡索以延胡 索乙素(C21H25NO4)计，不得少于0. 25mg。
8.如权利要求7所述的元胡止痛软胶囊的质量检测方法，其特征为采用高效液相色 谱法进行含量测定(1)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-磷酸盐 缓冲溶液比例为20 40 60 80为流动相；检测波长为270 290nm ；(2)对照品溶液的制备精密称取延胡索乙素对照品适量，用甲醇制成每Iml含10 50 μ g的溶液，即得对照品溶液；(3)供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，混勻，精密称定，精密加入甲 醇，称定重量，振摇，超声提取，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续 滤液，即得供试品溶液；(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2 20μ1，注入液相色谱仪，测定。
9.如权利要求8所述的元胡止痛软胶囊的质量检测方法，其特征为采用高效液相色 谱法进行含量测定(1)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈_磷酸盐 缓冲溶液比例为30 40 70 80为流动相，检测波长为280nm，柱温30°C ；(2)对照品溶液的制备精密称取延胡索乙素对照品适量，用甲醇制成每Iml含20 40 μ g的溶液，即得对照品溶液；(3)供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，混勻，取约0.5 1. 5g，精密称 定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 75ml，称定重量，强力振摇3 10分钟，超声提取 5 15分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液，即得供试品 溶液；(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 15μ1，注入液相色谱仪，测 定，即得。
10.如权利要求9所述的元胡止痛软胶囊的质量检测方法，其特征为采用高效液相色 谱法进行含量测定(1)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈_磷酸盐 缓冲溶液比例为38 62为流动相，检测波长为280nm，柱温30°C，理论板数按延胡索乙素 峰计算应不得低于6500 ；(2)对照品溶液的制备精密称取延胡索乙素对照品适量，用甲醇制成每Iml含30μg的溶液，即得对照品溶液；(3)供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，混勻，取约lg，精密称定，置具 塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，强力振摇5分钟，超声(250w，40KHz)提取10分 钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液；(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定， 即得；(5)测定结果本品每粒含延胡索以延胡索乙素(C21H25NO4)计，不得少于0.25mg。
全文摘要
本发明属于中药领域，提供了一种元胡止痛软胶囊药物的制备方法及质量检测方法。该药物的制备方法为延胡索(醋制)1000～1500重量份，白芷500～800重量份，以上二味，粉碎，用70％～90％乙醇浸泡，加热回流提取1～3次，每次1～3小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩，干燥，粉碎，过筛，与含蜂蜡的精制植物油充分混匀，磨匀，过筛，制成软胶囊。本发明还提供了采用薄层色谱法进行鉴别、高效液相色谱法进行鉴别与含量测定的检测方法用于控制质量，这些方法可以有效地控制元胡止痛软胶囊的质量。
文档编号G01N30/90GK101890077SQ20091020355
公开日2010年11月24日 申请日期2009年5月20日 优先权日2009年5月20日
发明者刘涛, 尚强, 徐连明, 毕宇安, 王振中, 萧伟, 邹艳萍, 陈凤龙, 韩兆忠 申请人:江苏康缘药业股份有限公司