专利名称：确定西罗莫司稳定性的方法和制备其稳定形式的工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及确定西罗莫司(sirolimus)或西罗莫司类似物的结晶性(结晶度， crystallinity)的测定方法。本发明也涉及该化验方法预测西罗莫司或西罗莫司类似物的稳定性的应用。本发明还涉及制备西罗莫司或西罗莫司类似物的稳定形式的工艺。
背景技术：
西罗莫司也就是已知的雷帕霉素(rapamycin)，是一种免疫抑制剂。西罗莫司以 Rapamune 销售。西罗莫司也用于支架的涂层从而减小再狭窄率。西罗莫司的几种衍生物已被证实具有免疫抑制活性、对肿瘤生长的抑制作用和/或再狭窄率的减小。例如，西罗莫司酯化物(坦罗莫司，temsirolimus)，其是西罗莫司与3-羟基-2-(羟甲基)-2-甲基丙酸的42-酯(sirolimus 42-ester)，已被证实对肿瘤生长具有显著抑制效果，且以 Toricel 销售。另一种衍生物，依维莫司(everolimus) (40-0-(羟乙基)-西罗莫司)已被证实具有免疫抑制活性和抗肿瘤活性。其在市场上以Certican 作为免疫抑制剂销售。西罗莫司的几种这样的衍生物在市场上销售或处在不同的开发阶段。西罗莫司含三烯基团，三烯基团易被氧化而导致其降解。已经发现非晶(无定形， amorphous)形式的西罗莫司快速降解，而晶体形式西罗莫司基本是稳定的。因此，控制西罗莫司晶化(结晶化，crystallization)后获得的产物中非晶形式的含量很重要。此外， 具有能够预测西罗莫司结晶性的测定方法很重要，结晶性与贮存期(shelf life)有关。 US20070128731公开了一种利用差示扫描量热计(DSC)测量雷帕霉素化合物的颗粒质量的方法，包括分析包含雷帕霉素化合物的样品的热流信号；以及比较所述样品的热流信号和预定标准的热流信号；其中所述颗粒质量与所述样品的所述热流信号的熔化温度成比例。 在这个发明的一个方面，DSC用于测量雷帕霉素化合物的结晶性。基于DSC的方法具有某些缺点。这种方法不能应用于在线(on-line)或联机 (in-line)结晶性测量。这样的测量在晶化期间对于确保理想的结晶性是期望的。因此，需要测量西罗莫司或西罗莫司类似物的结晶性的替代测定方法。开发比基于DSC的方法更快的方法也是期望的。已经报道了用于西罗莫司及其类似物的各种晶化系统，这些系统得到的产物具有可变的结晶性。US20070128731公开了一种用于制备晶体雷帕霉素的方法，其涉及加热在乙酸乙酯中的雷帕霉素溶液，过滤该溶液，将温度保持在约到约57°C，以恒定速度在60 分钟内加入庚烷，保温30分钟，减小搅拌速率，以约5°C /h的速率冷却到约40°C，进一步以约7. 50C /h的速率冷却到约25°C，进一步以至少约9°C /h的速率冷却到约7°C到8°C，保持该温度约池，最后过滤产物。该程序预期产生高度结晶的雷帕霉素。这是一种复杂的方法，其涉及加热、以恒定速率加入庚烷、减小搅拌速率和以变化的速率降低温度。人们熟知搅拌是规模相关的，因此，该工艺在不同的规模要求再优化。不同速率的冷却步骤要求工艺控制器。因此需要产生高结晶性西罗莫司或西罗莫司类似物的更简单的工艺。
发明内容
本发明的主要目的是提供一种确定西罗莫司稳定性的测定方法。本发明的另一个目的是提供一种晶化西罗莫司或其类似物的方法。因此，本发明涉及利用近红外光谱学测量西罗莫司或西罗莫司类似物的结晶性的方法，以及晶化西罗莫司或西罗莫司类似物的方法，包括取在溶剂中的西罗莫司或西罗莫司类似物的溶液，以受控方式加入反溶剂(抗溶剂，anti-solvent)，可选地，将该溶液保持一定时间，和过滤上述混合物从而获得晶体西罗莫司或西罗莫司类似物。
图1示出了对于具有可变结晶性的西罗莫司获得的OTR谱的二阶导数。图2示出了作为西罗莫司结晶性的函数在4973. GcnT1波数处的二阶导数值。
具体实施例方式本发明涉及利用近红外光谱学测量西罗莫司或西罗莫司类似物的结晶性的方法。在本发明的另一个实施方式中，该方法包括测量西罗莫司或西罗莫司类似物的 NIR光谱以及将其与它的各个标准的OTR光谱进行比较。在本发明的另一个实施方式中，西罗莫司或西罗莫司类似物的OTR光谱及它的各个标准利用变换进行处理。在本发明的另一个实施方式中，变换是OTR光谱的一阶导数。在本发明的又一个实施方式中，变换是OTR光谱的二阶导数。在本发明的再一个实施方式中，该方法用于测量粉末形式的西罗莫司或西罗莫司类似物的结晶性。在本发明的再一个实施方式中，该方法用于测量浆料或悬浮液形式的西罗莫司或西罗莫司类似物的结晶性。在本发明的再一个实施方式中，该方法在西罗莫司或西罗莫司类似物的晶化期间使用。在本发明的再一个实施方式中，该方法用作晶化期间的工艺控制工具。在本发明的再一个实施方式中，测量的结晶性用于预测西罗莫司或西罗莫司类似物的稳定性。本发明涉及一种用于晶化西罗莫司或西罗莫司类似物的方法，包括取在溶剂中的西罗莫司或西罗莫司类似物的溶液，以受控方式加入反溶剂，可选地，将该溶液保持一定时间，以及过滤上述混合物从而获得晶体西罗莫司或西罗莫司类似物。在本发明的另一个实施方式中，溶剂选自丙酮、乙腈、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、异丙醇、丁醇、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、二甲基甲酰胺、和二甲亚砜、或它们的混合物。在本发明的又一个实施方式中，反溶剂选自水、戊烷、己烷、环己烷、二乙醚、和正庚烷、或它们的混合物。本发明涉及利用近红外(NIR)光谱学确定西罗莫司或西罗莫司类似物的结晶性。 本发明还涉及这种测定方法用来预测西罗莫司或西罗莫司类似物的稳定性的应用。本发明进一步涉及一种晶化西罗莫司或西罗莫司类似物的工艺。术语“西罗莫司类似物”或“西罗莫司的类似物”是指结构类似于西罗莫司的化合物。这些包括通过化学或生物改性西罗莫司而制备的西罗莫司衍生物。这些还包括西罗莫司的副产物和代谢产物。一些非限制性实例包括西罗莫司酯化物或CCI-779(在 US5362718中描述)、依维莫司(在US6440990中描述)、左他莫司(zotarolimus)、去甲基雷帕霉素(demethylrapamycin)(在US5849730、US5776943中描述)、去甲氧基雷帕霉素 (desmethoxyrapamycin)禾口司可-雷中白霄素(seco-rapamycin)。术语“结晶性”或“结晶度”是指固体中的结构有序度。在晶体中，原子或分子以规则、周期性方式排列。材料可包含晶体区和非晶区的混合物。结晶性是材料中晶体区含量百分数的指示。本发明涉及利用近红外(NIR)光谱学确定西罗莫司结晶性。该方法也可用于确定西罗莫司衍生物的结晶性。由于结晶度涉及西罗莫司或西罗莫司衍生物的稳定性，所以基于NIR的方法也用于预测这种稳定性。这种OTR光谱学方法相比于US20070U8731中公开的基于DSC的方法的优点在于，OTR光谱学方法是相对快速的技术。此外，在利用OTR光谱学方法的分析中，样品不被破坏。此外，与基于DSC的方法不同，基于NIR的方法能够用于其中晶体连同溶剂一起存在的系统，且因此这种方法能够容易地应用于西罗莫司或其类似物晶化期间的在线、联机或现场(at-line)监控晶体质量。用于确定西罗莫司结晶性的OTR光谱学方法涉及测量西罗莫司的肌R光谱和将该光谱与西罗莫司标准进行比较。这里，西罗莫司标准是指高度结晶的西罗莫司样品。在进行比较之前，光谱可利用各种已知的变换进行处理。这里，术语“变换”是指一个或多个对 OTR光谱实施的数学运算。例如，可求该光谱的一阶或二阶导数。可在一个或多个波数处进行试验样品和标准的OTR信号或其变换的比较。在一个实例中，西罗莫司的结晶性能够计算如下
#样品在某个波数处的TVT^言号的二阶导数
^r00 “标准在该相同波数处的信号的二阶导数X该方法能够容易地以类似方式用于西罗莫司类似物。在另一个实例中，可通过绘制具有可变结晶性的西罗莫司样品的OTR信号或变换的OTR信号(在某个波数处)而制备校准曲线。这些样品可通过以不同比例混合晶体西罗莫司和非晶西罗莫司而制备。然后获得校准曲线的最佳拟合，且最佳拟合方程的方程可用于确定试验样品的结晶性。在又一个实例中，多重线性回归(MLR)、主成分分析(PCA)或主成分回归(PCR)可用于从NIR数据来预测结晶性。基于NIR的方法也能够容易地应用于在西罗莫司或西罗莫司类似物晶化工艺期间测量它们的结晶性。在一个实例中，OTR探针可插入结晶器中，且作为时间函数的OTR信号数据能够用来预测西罗莫司的结晶性。基于OTR光谱学的方法也能够用作西罗莫司或西罗莫司类似物晶化期间的工艺控制工具。由于结晶度涉及西罗莫司或西罗莫司类似物的稳定性，NIR方法能够用于西罗莫司或西罗莫司类似物的预测。本发明也涉及一种获得具有高结晶性的西罗莫司或西罗莫司类似物的晶化工艺。该工艺涉及在溶剂中溶解西罗莫司，然后在等温条件下以受控方式加入反溶剂。术语“受控方式”意味着反溶剂是以一定速率加入的，该速率小于临界加入速率。以大于临界速率加入会导致产物的结晶性较低。用于晶化的溶剂可选自丙酮、乙腈、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、异丙醇、丁醇、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、二甲基甲酰胺、和二甲亚砜、或它们的混合物。用于晶化的反溶剂可选自水、戊烷、己烷、环己烷、二乙醚、和正庚烷、或它们的混合物。晶化可以在0 到60°C的温度下进行。溶剂中西罗莫司或西罗莫司类似物的浓度可在5g/L直至其在晶化温度下在该溶剂中的溶解度的范围内。优选地，该浓度为50g/L至250g/L。反溶剂加入的临界速率依赖于溶剂、西罗莫司或西罗莫司类似物的初始浓度以及温度。这能够通过在给定条件下改变添加速率的实验来确定。添加速率(在其之下获得高结晶性西罗莫司或西罗莫司类似物)是临界添加速率。该工艺相对于在US20070U8731中给出的晶化工艺的优点是，该工艺是更简单的易于可缩放的等温工艺，且在恒定搅拌速率下进行。以下实施例进一步举例说明本发明，当应当理解，本发明不受本文中公开的具体细节限制。实施例实施例1用于确定西罗莫司结晶性的OTR光谱学非晶西罗莫司和晶体西罗莫司以不同比例混合。所得样品的OTR光谱利用OTR分光光度计测量。该光谱通过求该光谱的二阶导数进行处理(参见图1)。具有不同结晶性的西罗莫司样品在4973. 6cm—1波数处的二阶导数值(T”)相对于结晶性进行绘图。该数据的线性回归得到如下等式T” = 0. 1975X 结晶性 +0. OlllR2 = 0. 9981为了确定试验样品的结晶性，测量该样品的OTR光谱并获得其二阶导数。将在 4973. ecnT1波数处的二阶导数代入上面的等式，从而获得试验样品的结晶性，测得结晶性为 99%。实施例2西罗莫司晶化将含15g西罗莫司的130ml的乙酸乙酯层投入650ml搅拌容器中。该溶液的温度保持在约25°C。在搅拌下以0. 54ml/min的速率向该溶液加入^Oml的正庚烷。在加入结束后，将该混合物在搅拌下保持12小时。过滤形成的晶体并在真空下干燥48小时。根据实施例1中描述的方法通过OTR光谱学分析这些晶体。测得晶体的结晶度为100%。实施例3西罗莫司晶化在25°C下将IOg西罗莫司溶解在68ml的乙腈中。在搅拌下以0. 425ml/min的速率向该溶液中加入2(Mml的水。在加入结束后，将该混合物在搅拌下保持12小时。过滤形成的晶体并在真空下干燥M小时。根据实施例1中描述的方法通过OTR光谱学分析晶体。 测得晶体的结晶度为97%。实施例4西罗莫司晶化取含有5g西罗莫司的IOg西罗莫司乙酸乙酯溶液。以0. lml/min的速率向该溶液中加入20ml 二乙醚。将该混合物在搅拌下保持12小时。过滤形成的晶体并在真空下干燥对小时。根据实施例1中描述的方法通过NIR光谱学分析晶体。测得晶体的结晶度为 98%。
权利要求
1.一种利用近红外光谱学来测量西罗莫司或西罗莫司类似物的结晶性的方法。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述方法包括测量西罗莫司或西罗莫司类似物的OTR光谱并将其与它的各个标准的OTR光谱进行比较。
3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述西罗莫司或西罗莫司类似物以及它的各个标准的OTR光谱利用变换进行处理。
4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述变换是所述OTR光谱的一阶导数。
5.根据权利要求3所述的方法，其中，所述变换是所述OTR光谱的二阶导数。
6.根据权利要求1所述的方法，其中，所述方法用于测量粉末形式的西罗莫司或西罗莫司类似物的结晶性。
7.根据权利要求1所述的方法，其中，所述方法用于测量浆料或悬浮液形式的西罗莫司或西罗莫司类似物的结晶性。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述方法在西罗莫司或西罗莫司类似物的晶化期间使用。
9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述方法用作晶化期间的工艺控制工具。
10.根据权利要求1所述的方法，其中，所测量的结晶性用于预测西罗莫司或西罗莫司类似物的稳定性。
11.一种用于晶化西罗莫司或西罗莫司类似物的方法，包括a)取在溶剂中的西罗莫司或西罗莫司类似物的溶液；b)以受控方式加入反溶剂；c)可选地，将所述溶液保持一定时间；以及d)过滤上述混合物从而获得晶体西罗莫司或西罗莫司类似物。
12.根据权利要求11所述的方法，其中，所述溶剂选自丙酮、乙腈、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、异丙醇、丁醇、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、二甲基甲酰胺、和二甲亚砜、或它们的混合物。
13.根据权利要求11所述的方法，其中，所述反溶剂选自水、戊烷、己烷、环己烷、二乙醚、和正庚烷、或它们的混合物。
全文摘要
本发明为在确定西罗莫司的结晶性中涉及的问题提供解决方案。更具体地，本发明成功使用近红外(NIR)光谱学提供确定西罗莫司或其类似物的结晶性的方法。而且，本发明提供用于晶化西罗莫司或其类似物的方法。
文档编号G01J3/28GK102282457SQ200980154915
公开日2011年12月14日 申请日期2009年3月6日 优先权日2009年1月21日
发明者尼丁·索帕拉·帕蒂尔, 昂卡尔·普拉卡什·桑坦, 阿米特·阿南特拉·帕坦勒, 雷克什·拜亚拉姆·门德 申请人:拜康有限公司