专利名称：液体样品解析电喷雾质谱desi-ms电离方法
技术领域：
本发明涉及一种液体样品解析电喷雾质谱DESI-MS电离方法。
背景技术：
大气压质谱电离技术是近几年发展起来的一类新的电离技术，它允许在大气压条件下电离样品且样品预处理简单，包括解析电喷雾电离DESI、直接实时电离DART、解析大气压化学电离DAPCI等，解析电喷雾电离DESI是其中一种有代表性的电离方法，通常解析电喷雾质谱DESI-MS用于分析固体样品，可用于极性化合物样品和生物样品包括生物大分子的检测和结构分析。文献Direct Analysis of Liquid Samples by Desorption Electrospray Ioniz ation-MassSpectrometry(DESI-MS)(Zhixin Miao and Hao Chen, Journal of the America Society for MassSpectrometry. 2009,20,10-19)首次报道了解析电喷雾质谱 DESI-MS 直接用于分析液体样品，这种液体样品解析电喷雾质谱DESI-MS较传统的固体样品解析电喷雾质谱DESI-MS分析的质量范围更宽，不需要色谱预分离和处理，减少了样品干燥的步骤， 而且有较好的盐容忍度；和传统的电喷雾质谱ESI-MS比较，背景氧化/还原更弱。但这种液体样品解析电喷雾质谱DESI-MS分析极性化合物样品和生物样品溶液时的接口仍然需要将液体样品从毛细管流出到一面板上，然后采用高速电喷雾电离ESSI探针吹扫，分析组分被吹扫反弹、然后被解析或电离并导入质谱分析，存在位置难以调节、电离效率较低的问题。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是现有液体样品解析电喷雾质谱电离方法需要将液体样品置于一面板，样品被高速电喷雾电离ESSI探针吹扫反弹的方式解析或电离，存在位置难以调节、电离效率较低的问题，提供一种新的液体样品解析电喷雾质谱DESI-MS电离方法。该方法具有装置简单、操作方便、电离效率高、抗盐抑制效应好的优点。为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下一种液体样品解析电喷雾质谱DESI-MS电离方法，由高速电喷雾电离ESSI探针(1)产生的高速携带电荷的喷雾溶剂将输送液体样品的毛细管(10)样品出口流出的液体样品直接解析或电离后进入质谱检测器(11)检测。上述技术方案中，高速电喷雾电离ESSI探针的高压电源(4)电压为士(3000 5000)伏，高速喷雾气体为氮气，压力为110 200Psi。探针棒(7)的溶剂出口和输送液体样品的毛细管(10)样品出口以及质谱检测器(11)的进样口(12)位于同一直线上。本发明的液体样品解析电喷雾质谱DESI-MS电离方法分析极性化合物样品和生物样品溶液时，由高速电喷雾电离ESSI探针(1)的高速携带电荷的喷雾溶剂直接解析或电离从输送液体样品的毛细管(10)流出的液体样品，从而将液体样品中需要分析的组分如蛋白质等解析或者电离产生离子，将其转移到气相形成气相干离子，并导入质谱检测器(11)进行分析，无须现有液体样品解析电喷雾DESI电离装置所用的反射面板，提高了电离效率，而且位置容易调节。由于高速电喷雾电离ESSI探针⑴和液体样品输送泵(9)输送的液体样品分离，可以采用不同的溶剂体系，高速电喷雾电离ESSI探针(1)的溶剂可以对液体样品组分具有萃取和选择的作用，因而具有更高的盐容忍度。液体样品解析电喷雾质谱DESI-MS电离装置可以方便地和其它样品分离或前处理装置如高效液相色谱HPLC、毛细管电泳CE、电化学电池EC等联用。采用本发明液体样品解析电喷雾质谱DESI-MS电离方法分析20 μ M的蛋白质 β-Iactoglobulin Α(分子量MW 18. 4kDa)样品，能够得到+11 +18价的系列准分子离子峰，+18价离子峰的信号强度达到8. OX IO4Cps ；分析1. OmM的多巴胺Dopamine (分子量丽153Da)含有IOmM氯化钠盐的水溶液样品，高速电喷雾电离ESSI探针的溶剂采用含有
的乙酸的水/甲醇(体积比1 1)，依然能获得良好的Dopamine质子化的准分子离子峰[M+H] + (m/zl54)和脱掉[NH3]的碎片峰[M_NH3+H]+，准分子离子峰[M+H] + (m/zl54)质谱信号强度达到 9. 0X104cps ；分析 3，4-dihydrophenylacetic acid (分子量 MW 168Da)， 在负离子模式下得到失去质子的准分子离子峰[Μ-ΗΓΟιι/ζ 167)和脱掉[C00H]的碎片峰 [M-C00H]-(m/z 123)，准分子离子峰[M-H]-(m/z 167)的信号强度达到2. 5X 104cps，本发明的电离方法不仅适用于生物大分子的分析，具有良好的盐容忍度，而且能够自由选择正负离子模式。在相同的质谱条件下，采用本发明液体样品解析电喷雾质谱DESI-MS电离方法得到的谷胱甘肽Glutathione (GSH，分子量丽307Da)准分子离子峰[GSH+H]+强度为 1. lX107cps，而采用现有的液体样品解析电喷雾电离方法DESI-MS(文献方法)得到的谷胱甘肽Glutathione准分子离子峰强度1.2X 105cps，质谱信号强度比本发明方法得到的信号强度低2个数量级。采用本发明方法设备简单、操作方便、电离效率高、抗盐抑制效应好， 取得了较好的技术效果。
图1为本发明液体样品解析电喷雾质谱DESI-MS电离装置的流程示意图。图2为采用本发明液体样品解析电喷雾质谱DESI-MS电离方法分析蛋白质 β-Iactoglobulin A得到的质谱图。图3为采用本发明液体样品解析电喷雾质谱(DESI-MS)电离方法分析多巴胺 Dopamine得到的质谱图。图4为采用本发明液体样品解析电喷雾质谱DESI-MS电离方法分析3， 4-dihydrophenylacetic acid采用负离子模式得到的质谱图。图5为采用本发明液体样品解析电喷雾质谱DESI-MS电离方法分析谷胱甘肽Glutathione得到的质谱图，图6为相同条件下，采用现有液体样品解析电喷雾质谱 DESI-MS电离方法分析谷胱甘肽Glutathione得到的质谱图。图1中1为高速电喷雾电离ESSI探针、2为高速电喷雾电离ESSI探针的溶剂入口，3为高速电喷雾电离ESSI探针输送溶剂的毛细管，4为高速电喷雾电离ESSI探针的高压电源，5为高电压接地，6为高速喷雾气体(氮气)，7为输送溶剂的探针棒，8为输送高压气体的夹套，9为液体样品输送泵，10为输送液体样品的毛细管，11为质谱检测器，12为质谱检测器的入口。
本发明的工作流程为采用输液泵从高速电喷雾电离ESSI探针1的溶剂入口 4输入溶剂，从探针棒7的电喷雾出口流出，高压电源4施加高电压，高速喷雾气体6输入高压气体，输送溶剂的探针棒7的出口产生高速携带电荷的雾状液滴；待分析的液体样品由输送液体样品的毛细管出口 10流出，进入高速电喷雾电离ESSI探针1的电喷雾出口 10的下方，被高速电喷雾电离ESSI探针1的高速携带电荷的雾状液滴解析或电离形成离子，并被其转移到气相形成气相干离子，然后进入质谱检测器11的入口 12进行检测。下面通过实施例对本发明作进一步阐述。
具体实施例方式实施例1采用本发明液体样品解析电喷雾质谱DESI-MS电离方法分析蛋白质 β-Iactoglobulin Α(分子量MW 18. 4kDa)，仪器条件见下表1，质谱图见图2。表1分析β -Iactoglobulin A的质谱仪器条件
权利要求
1.一种液体样品解析电喷雾质谱DESI-MS电离方法，由高速电喷雾电离ESSI探针(1) 产生的高速携带电荷的喷雾溶剂将输送液体样品的毛细管(10)样品出口流出的液体样品直接解析或电离后进入质谱检测器(11)检测。
2.根据权利要求1所述的液体样品解析电喷雾质谱DESI-MS电离方法，其特征在于高速电喷雾电离ESSI探针的高压电源(4)电压为士(3000 5000)伏，高速喷雾气体为氮气， 压力为110 200Psio
3.根据权利要求1所述的液体样品解析电喷雾质谱DESI-MS电离方法，其特征在于探针棒⑵的溶剂出口和输送液体样品的毛细管(10)样品出口以及质谱检测器(11)的进样口(12)位于同一直线上。
全文摘要
本发明涉及一种液体样品解析电喷雾质谱DESI-MS电离方法，主要解决现有液体样品解析电喷雾质谱电离方法需要将液体样品置于一面板，样品被高速电喷雾电离ESSI探针吹扫反弹的方式解析或电离，存在位置难以调节、电离效率较低的问题。本发明通过采用液体样品解析电喷雾质谱DESI-MS电离方法，由高速电喷雾电离ESSI探针(1)产生的高速携带电荷的喷雾溶剂将输送液体样品的毛细管(10)样品出口流出的液体样品直接解析或电离后进入质谱检测器(11)检测的技术方案较好地解决了该问题，可用于质谱分析的工业生产中。
文档编号G01N27/68GK102262127SQ201010183180
公开日2011年11月30日 申请日期2010年5月26日 优先权日2010年5月26日
发明者李继文 申请人:中国石油化工股份有限公司, 中国石油化工股份有限公司上海石油化工研究院