一种尿液中苯乙醛酸的液相色谱串联质谱测定方法
【专利摘要】一种尿液中苯乙醛酸的液相色谱串联质谱测定方法，其特征在于：包括样品经稀释后直接引入液相色谱-电喷雾电离-串联质谱仪进行测定，可快速、准确检测出尿液中苯乙醛酸的含量水平。本发明为全新的尿液中苯乙醛酸含量的测定方法，采用外表法定量分析物；串联质谱法更好的提高了方法的选择性与准确性。通过色谱柱以及洗脱条件的选择与优化，较好的提高了色谱分离过程，缩短了色谱分析的时间。
【专利说明】一种尿液中苯乙醛酸的液相色谱串联质谱测定方法
[0001]
【技术领域】
[0002]本发明属于尿液样本的理化检验【技术领域】，具体说是一种采用液相色谱-电喷雾电离-串联质谱仪测定尿液中苯乙醛酸含量的方法。
【背景技术】
[0003]苯乙烯是塑料橡胶工业的重要原料，用以制造各种塑料树脂，合成橡胶，含有苯乙烯的塑料橡胶制品广泛用于日常生活和工业生产，如各种包装材料、隔热材料、一次性饭盒、纸杯、管道、容器等。苯乙烯还存在于卷烟烟气中。苯乙烯主要以气体形式通过呼吸道，或通过皮肤接触进入人体，短时间接触高浓度苯乙烯可引起咳嗽、咽痛等呼吸道刺激症状；长时间接触苯乙烯可引起肺组织结构损害，从而使人易患肺炎、肺气肿等疾病。国际癌症研究组织将其列为Group 2A，即对人类为很可能致癌物，对动物则为确定之致癌物。吸入体内的苯乙烯在CYP2B6和CYP2E酶的作用下代谢为苯乙烯7，8-氧化物，苯乙烯7，8-氧化物在环氧化物酶的作用下进一步代谢为苯乙醛酸和苯乙醇酸，苯乙醛酸的结构式如下，目前已经被用作苯乙烯暴露的生物标志物。
【权利要求】
1.一种尿液中苯乙醛酸的液相色谱串联质谱测定方法，其特征在于:包括以下工艺步骤: a、收集志愿者尿液； b、样品前处理:室温下解冻尿液样品，混合均匀后，经过0.22 μ m的滤膜过滤，取200μ L的尿液,加入0.80 mL纯水,取2 μ L滤液弓丨入LC-MS/MS分离分析； C、标准工作液的配制:用纯水配制不同浓度的苯乙醛酸标准工作溶液； d、液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定，吸取配制好的不同浓度的苯乙醛酸标准工作溶液，注入LC-MS/MS系统，苯乙醛酸的线性回归方程为y=l.49 X 104x+3.81 X 103，其中Y代表分析物的峰面积，X表示尿液中目标分析物的浓度，相关系数大于0.999，对样品待测液进行测定，测得分析物与内标峰面积的比值，代入一元线性回归方程，求得样品待测液中分析物的含量。
2.根据权利要求1所述的尿液中苯乙醛酸的液相色谱串联质谱测定方法，其特征在于:苯乙醛酸标准工作溶液的浓度分别为1，2，5，10，50和100 ng/mL。
3.根据权利要求1所述的尿液中苯乙醛酸的液相色谱串联质谱测定方法，其特征在于:选取了 Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18 色谱柱，规格 150 mmX 2.1 mm, 3.5 Mm,初始流动相体系选取50%溶剂A:水溶液和50%溶剂B:甲醇溶液，等度洗脱，流动相流速为400μ L/min,分析时间为10 min,进样量为2 μ L。
4.根据权利要求1所述的尿液中苯乙醛酸的液相色谱串联质谱测定方法，其特征在于:串联质谱检测器的条件:电喷雾离子源，多反应监测负离子扫描方式；电喷雾电压:`4500V,雾化气:50 psi,气帘气:35 psi,辅助加热气:30 psi，射入电压:9 V，驻留时间:`100 ms ο
【文档编号】G01N30/88GK103852549SQ201410095003
【公开日】2014年6月11日 申请日期:2014年3月14日 优先权日:2014年3月14日
【发明者】张小涛, 杨进, 刘勇, 侯宏卫, 胡清源, 王安, 吴帅宾, 陈欢, 刘彤, 韩书磊 申请人:国家烟草质量监督检验中心, 中国科学院合肥物质科学研究院