专利名称：人sCD14-ST的分析方法
技术领域：
本发明涉及作为败血症诊断的标志物而已知的人s⑶14-ST的分析方法。需要说明的是，本说明书中的“分析”包括判定是否存在作为分析对象物质的人SCD14-ST的“检测”和定量或半定量地确定分析对象物质的量的“测定”。
背景技术：
⑶14分子作为通过识别在单核细胞的膜表面上表达的糖蛋白的一组抗体鉴定的蛋白，在1986年第3届白细胞分型研讨会(Leukocyte Typing Conference)上被命名。1990年，Wright等人明确了该⑶14分子是作为内毒素的LPS的受体(非专利文献I)。通过cDNA分析明确了 该⑶14分子是分子量为53 55kDa的糖蛋白，mRNA为约I. 4kb的大小，由356个氨基酸组成(非专利文献2)。 已知在人⑶14分子中，除膜结合型⑶14之外还有可溶型⑶14，在血中存在分子量不同的多种可溶型CD14。作为这样的可溶型CD14，已知有约55kDa和49kDa的两种可溶型CD14 (可溶型高分子量CD14)、约13kDa的可溶型低分子量CD14亚型(以下称作人s⑶14-ST)，人s⑶14-ST作为败血症的诊断标志物，在临床上有用(专利文献I)。关于该人SCD14-ST，专利文献I中公开了 当反复进行血清样本的冷冻融解、或者在室温下长时间放置时，假设血清样本中的人SCD14-ST分解而无法测定的情形；或者，假设血清样本中的高分子量CD14分解成人SCD14-ST或与其接近的结构，测定结果出错的情形(段落“0151”)。另一方面，专利文献I中还公开了 人s⑶14-ST通过弹性硬蛋白酶等蛋白酶分解产生全长的⑶14 ;产生的人s⑶14-ST在生物体内(血清中)至少以可以检测的程度稳定存在(段落“0126”)。如上所述，在专利文献I中，虽然假设通过血清样本的冷冻融解或者室温下的长时间放置，测定结果会出错的情形，但并没有唤起特殊处理的记载，而这是关于普通样本保管条件的内容。专利文献I不过是公开了人SCD14-ST在生物体内血清中是稳定的。现有技术文献 非专利文献
非专利文献I工> 7 (Science)”(美国)，1990年，第249卷，第1431-1433页；
非专利文献2:“又夕夕 7 '> 7 F寸一子(Nucleic Acids
Research) ”(英国)，1988 年，第 16 卷，第 4173 页；
专利文献
专利文献I :日本专利第4040666号说明书。
发明内容
发明所要解决的课题
如上所述，虽然已知人s⑶14-ST在血清中比较稳定地存在，但包括血浆样本或全血样本在内，在潜心开发人sCD14-ST的更准确的分析方法中，本发明人意外发现使用全血样本时，对人S⑶14-ST的测定值有影响。本发明鉴于上述状况而设，其课题在于提供即使在使用全血样本的情况下，也可以准确地测定人s⑶14-ST的分析方法。解决课题的方法
上述课题可以通过本发明的人SCD14-ST的分析方法来解决，所述分析方法的特征在于自采取全血样本起6小时以内分析上述样本中的人s⑶14-ST。在本说明书中，“人sCD14-ST，，(别名为Pres印sin ( 7。H > )(注册商标))是指日本专利第4040666号说明书中记载的“第I方案的可溶性⑶14抗原”，更具体而言，是指具有下述I) 3)的性质的可溶性CD14抗原
1)非还原条件下在SDS-PAGE中分子量为13±2kDa；
2)N末端序列具有SEQ ID NO: I的氨基酸序列；以及
3)与以由SEQID NO: 2中记载的16个氨基酸残基组成的肽为抗原制作的抗体特异性结合，
权利要求
1.人SCD14-ST的分析方法，其特征在于自采集全血样本起6小时以内分析上述样本中的人SCD14-ST。
2.权利要求I所述的人SCD14-ST的分析方法，其中，自采集全血样本起4小时以内分析上述样本中的人s⑶14-ST。
3.权利要求I或2所述的人SCD14-ST的分析方法，其中，对全血样本直接进行分析。
4.权利要求I 3中任一项所述的人s⑶14-ST的分析方法，其中，使用肝素采血管或EDTA采血管进行全血样本的采集。
全文摘要
本发明提供即使在使用全血样本的情况下也可以准确地测定人sCD14-ST的分析方法。在上述分析方法中，自采集全血样本起6小时以内分析上述样本中的人sCD14-ST。
文档编号G01N33/68GK102713636SQ201180007385
公开日2012年10月3日 申请日期2011年1月28日 优先权日2010年1月29日
发明者冈村佳和, 横井宏行 申请人:三菱化学美迪恩斯株式会社, 持田制药株式会社