专利名称：生物传感器的制作方法
技术领域：
本发明涉及生物传感器，特别是中性脂肪浓度测定用生物传感器。特别是，本发明涉及能够利用酶反应迅速定量生物试样等特定材料中特定成分的浓度的生物传感器，特别涉及中性脂肪浓度测定用生物传感器。
背景技术：
近年，生物传感器被用于医疗等领域。生物传感器的测定对象为从低分子到高分子的各种各样的化学物质，为了应对各种测定对象，正在进行具备各种机能的生物传感器的开发。目前，不必对生物试样以及食品中所含的特定成分(底物)进行稀释、搅拌等操作就能简单定量的生物传感器已广为人知。例如，已经提出如下生物传感器在绝缘性基板上 形成至少具有工作电极和对电极的电极系统，在该电极系统上设有用亲水性聚合物等固定剂固定氧化还原酶以及电子受体而成的酶反应层，接着在该酶反应层上设置过滤层(血球去除层)，进一步，在该过滤层上包被壳体而一体化。这个生物传感器按照以下的方法定量试样中的底物浓度。首先，将血液等试样溶液滴加到过滤层，其过滤液渗透到酶反应层。从而氧化还原酶以及电子受体溶解至试样溶液中，底物和酶之间发生酶反应。通过该酶反应底物被氧化，同时电子受体被还原。酶反应终止后，将已被还原的电子受体电化学氧化，通过此时得到的氧化电流值求出试样溶液中的底物浓度。例如，作为用生物传感器测定中性脂肪的方法，如下定量试样中的中性脂肪的方法已广为人知。首先，试样溶液中包含的中性脂肪被例如脂蛋白脂肪酶(LPL)分解为游离脂肪酸和甘油。此处生成的甘油，可以如下式(I)和下式(2)所示的那样通过使用甘油激酶(GK)和甘油-3-磷酸氧化酶(GPO)或者甘油-3-磷酸脱氢酶(GPDH)来定量。S卩，可以通过测定如下式所示的、氧化型电子受体的减少、还原型电子受体的增加或者磷酸二羟丙酮的量来定量甘油。特别是，可以通过电化学地测定还原型电子受体的增加量来定量甘油。[化I]
权利要求
1.一种生物传感器，所述生物传感器具有绝缘性基板、形成在上述绝缘性基板上的至少包含工作电极和对电极的电极系统、以及形成在上述电极系统上的试样供给部， 所述试样供给部具备包含第一反应层和第二反应层的反应层， 第一反应层形成在上述电极系统上，至少包含含有作为辅基的吡咯喹啉醌(PQQ)、黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)、 或黄素单核苷酸(FMN)的氧化还原酶； 第二反应层是通过在上述第一反应层上涂布包含脂质分解酶的溶液形成的。
2.根据权利要求I所述的生物传感器，上述试样供给部进一步包含电子传递体。
3.根据权利要求2所述的生物传感器，上述电子传递体配置在第二反应层，或者 按照与上述第一反应层和第二反应层分离的方式，在上述试样供给部进一步设置具有电子传递体的第三反应层。
4.根据权利要求I 3中任一项所述的生物传感器，上述氧化还原酶为包含作为辅基的吡咯喹啉醌(PQQ)的多元醇脱氢酶。
5.根据权利要求3或4中任一项所述的生物传感器，上述第一反应层、第二反应层或第三反应层进一步包含表面活性剂。
6.根据权利要求3 5中任一项所述的生物传感器，上述第一反应层、第二反应层或第三反应层进一步包含亲水性高分子。
7.根据权利要求3 6中任一项所述的生物传感器，上述第一反应层、第二反应层或第三反应层进一步包含糖和蛋白质中的至少一种。
全文摘要
本发明提供一种能在短时间内测定试样中的葡萄糖、中性脂肪等特定成分的浓度的生物传感器。所述生物传感器具有绝缘性基板、形成在上述绝缘性基板上的至少包含工作电极和对电极的电极系统、以及形成在上述电极系统上的试样供给部，所述试样供给部具备包含第一反应层和第二反应层的反应层，第一反应层形成在上述电极系统上，包含含有作为辅基的吡咯喹啉醌(PQQ)、黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)、或黄素单核苷酸(FMN)的氧化还原酶；第二反应层是通过在上述第一反应层上涂布包含脂质分解酶的溶液形成的。
文档编号G01N27/327GK102959392SQ20118001794
公开日2013年3月6日 申请日期2011年3月30日 优先权日2010年3月31日
发明者西胁直秀, 宫本翔一, 稻川显嗣, 村濑博宣 申请人:Cci株式会社, 究极酵素国际股份有限公司