降解或检测甘油磷酸胆碱的酶学方法、产品及其应用与流程

文档序号:18922658发布日期:2019-10-19 03:44阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种检测甘油磷酸胆碱含量的方法,所述方法包括:

(a)提供待测样品;

(b)在适合酶反应的条件下,使甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶和碱性磷酸酶同时或先后与所述待测样品接触并完全反应;

(c)对步骤(b)所得反应产物中的无机磷进行定量;

(d)根据步骤(c)中所测定的无机磷含量确定所述待测样品中甘油磷酸胆碱的含量。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶选自下组:动物来源的甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶;植物来源的甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶;微生物来源的甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶选自下组:哺乳动物来源的GDE5;拟南芥(Arabidopsis thaliana)、白羽扇豆(Lupinus albus)以及烟草植物来源的甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶;来源于酿酒酵母、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、黑曲霉、米曲霉或金黄色葡萄球菌的甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶选自下组:枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌或大肠杆菌来源的甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶。

5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶为碱性甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶。

6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶是具有SEQ ID NO:2所示序列的甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶。

7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述碱性磷酸酶选自下组:动物来源的碱性磷酸酶;植物来源的碱性磷酸酶;微生物来源的碱性磷酸酶。

8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述碱性磷酸酶选自下组:牛小肠碱性磷酸酶CIAP;来源于芸豆(Phaseolus vulgaris L.)根部的碱性磷酸酶、豆类种子中的碱性磷酸酶;来自于地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)、产酶溶杆菌(Lysobacter enzymogenes)、汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)及米曲霉(Aspergillus oryzae)的碱性磷酸酶。

9.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述碱性磷酸酶为来源于选自下组的豆类种子中的碱性磷酸酶:豌豆(Pisum sativum)、鹰嘴豆(Cicer arietinum)或大豆(Glycine max)。

10.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述碱性磷酸酶为牛小肠碱性磷酸酶CIAP或地衣芽胞杆菌来源的碱性磷酸酶。

11.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(c)中的无机磷定量采用选自下组的方法进行:磷钼蓝分光光度法、放射性检测法、钼锑抗比色法、染料结合法、酶联-紫外分光光度法。

12.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(c)中的无机磷定量采用磷钼蓝分光光度法进行。

13.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法用于:甘油磷酸胆碱降解产物的生产;含有甘油磷酸胆碱或甘油磷酸胆碱降解产物的食品、保健品或药品的生产;甘油磷酸胆碱或甘油磷酸胆碱降解产物生产过程监控;含有甘油磷酸胆碱或甘油磷酸胆碱降解产物的食品、保健品、药品生产和/或存储过程中的质量和/或含量的监控。

14.一种用于检测甘油磷酸胆碱含量的试剂盒,所述试剂盒包含:

(i)酶组合物,其包含:甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶和碱性磷酸酶;

(ii)无机磷定量用试剂;

(iii)任选的,缓冲液、离子源、pH调节剂、溶剂、容器和/或包装、说明书中的一种或多种。

15.如权利要求14所述的试剂盒,其特征在于,所述甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶选自下组:动物来源的甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶;植物来源的甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶;微生物来源的甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶。

16.如权利要求14所述的试剂盒,其特征在于,所述甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶选自下组:哺乳动物来源的GDE5;拟南芥(Arabidopsis thaliana)、白羽扇豆(Lupinus albus)以及烟草植物来源的甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶;来源于酿酒酵母、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、黑曲霉、米曲霉、金黄色葡萄球菌的甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶。

17.如权利要求14所述的试剂盒,其特征在于,所述甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶选自下组:枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、大肠杆菌来源的甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶。

18.如权利要求14所述的试剂盒,其特征在于,所述甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶为碱性甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶。

19.如权利要求14所述的试剂盒,其特征在于,所述甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶是具有SEQ ID NO:2所示序列的甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶。

20.如权利要求14所述的试剂盒,其特征在于,所述碱性磷酸酶选自下组:动物来源的碱性磷酸酶;植物来源的碱性磷酸酶;微生物来源的碱性磷酸酶。

21.如权利要求14所述的试剂盒,其特征在于,所述碱性磷酸酶选自下组:牛小肠碱性磷酸酶CIAP;来源于芸豆(Phaseolus vulgaris L.)根部的碱性磷酸酶、豆类种子中的碱性磷酸酶;来自于地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)、产酶溶杆菌(Lysobacter enzymogenes)、汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)及米曲霉(Aspergillus oryzae)的碱性磷酸酶。

22.如权利要求14所述的试剂盒,其特征在于,所述碱性磷酸酶为来源于选自下组的豆类种子中的碱性磷酸酶:豌豆(Pisum sativum)、鹰嘴豆(Cicer arietinum)或大豆(Glycine max)。

23.如权利要求14所述的试剂盒,其特征在于,所述碱性磷酸酶为牛小肠碱性磷酸酶CIAP或地衣芽胞杆菌来源的碱性磷酸酶。

24.权利要求14-23中任一项所述的试剂盒的应用,其用于:甘油磷酸胆碱降解产物的生产;含有甘油磷酸胆碱或甘油磷酸胆碱降解产物的食品、保健品或药品的生产;甘油磷酸胆碱或甘油磷酸胆碱降解产物生产过程监控;含有甘油磷酸胆碱或甘油磷酸胆碱降解产物的食品、保健品、药品生产和/或存储过程中的质量和/或含量的监控。

25.如权利要求14-23中任一项所述的试剂盒的应用,其用于制备用于与甘油磷酸胆碱相关疾病或症状的诊断、治疗监测和/或治疗方案选择的产品。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1