糖尿病自身抗体免疫渗滤联检试剂盒的制作方法
【专利摘要】本实用新型公开了一种糖尿病自身抗体免疫渗滤联检试剂盒，包括盒体及与所述盒体连接的盒盖，还包括试剂瓶和反应板，所述盒体内设有用于固定所述试剂瓶和反应板的固定件，所述试剂瓶包括装有缓冲液的试剂瓶Ⅰ及装有胶体金标记物的试剂瓶Ⅱ，所述反应板包括板体及设有糖尿病自身免疫相关抗原固定区的抗原膜，所述抗原膜固定在所述板体中并且暴露出所述糖尿病自身免疫相关抗原固定区；本实用新型的糖尿病自身抗体免疫渗滤联检试剂盒，试剂瓶内试剂、反应板与人体血清的配合操作能够利用斑点金免疫渗滤法在同一条件下同时检测多种糖尿病自身抗体，其检测灵敏度高、操作简便、检测速度快、无需辅助仪器设备；本实用新型降低了检测成本，适于推广应用。
【专利说明】糖尿病自身抗体免疫渗滤联检试剂盒
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及一种糖尿病检测装置，特别涉及一种糖尿病自身抗体免疫渗滤联检试剂盒。
【背景技术】
[0002]糖尿病的发病机理包括胰岛素的绝对或相对缺乏，前者是I型糖尿病的特征，但多数2型糖尿病患者或早或晚也会进入胰岛素绝对缺乏阶段，且近年来2型糖尿病有发病年轻化的趋势，故两型糖尿病诊断和鉴别诊断逐渐成为临床较为困惑的问题。其中I型糖尿病主要由于胰岛β细胞自身免疫破坏引起，外周血中出现的针对胰岛β细胞相关分子的自身抗体作为免疫学检测指标，能够为I型糖尿病的分型诊断提供实验室证据。由于不同自身抗体各具特点，单个指标检测的敏感性和特异性各有缺陷，因此目前常采用多种自身抗体联合检测。但实验室常用的放射配体法或酶联免疫法主要适用于对单一指标的检测，且耗时长、操作复杂、需要特殊设备条件，对单个患者的各项指标分别检测后再综合判定结果导致工作量大且成本高，实际临床工作中不易开展。
[0003]试剂盒是用于盛放检测化学成分、药物残留、病毒种类等化学试剂的盒子。斑点金免疫渗滤试验是利用微孔膜的可滤过性，使抗原抗体反应和洗涤在一特殊的渗滤装置上以液体渗滤过膜的方式迅速完成，反应过程具有亲和层析的浓缩作用，可达到快速检测的目的。以胶体金作为示踪标记物使阳性结果在膜上呈现红色斑点，肉眼即可对检测结果进行判定，整个过程操作简便，无需任何设备仪器。目前国内外尚无将该方法应用于多种糖尿病自身抗体的联合检测。
[0004]因此，有必要开发一种糖尿病自身抗体免疫渗滤联检试剂盒，其内提供的试剂、部件能够利用斑点金免疫渗滤法在同一条件下同时检测多种糖尿病自身抗体，其检测灵敏度高、操作简便、检测速度快，无需辅助仪器设备。
实用新型内容
[0005]有鉴于此，本实用新型的目的在于提供一种糖尿病自身抗体免疫渗滤联检试剂盒，其内提供的试剂、部件能够利用斑点金免疫渗滤法在同一条件下同时检测多种糖尿病自身抗体，其检测灵敏度高、操作简便、检测速度快，无需辅助仪器设备。
[0006]本实用新型的糖尿病自身抗体免疫渗滤联检试剂盒，包括盒体及与所述盒体连接的盒盖，还包括试剂瓶和反应板，所述盒体内设有用于固定所述试剂瓶和反应板的固定件，所述试剂瓶包括装有缓冲液的试剂瓶I及装有胶体金标记物的试剂瓶II，所述反应板包括板体及设有糖尿病自身免疫相关抗原固定区的抗原膜，所述抗原膜固定在所述板体中并且暴露出所述糖尿病自身免疫相关抗原固定区。
[0007]进一步，所述抗原膜为硝酸纤维素膜，所述糖尿病自身免疫相关抗原固定区包括固相于所述抗原膜上的重组人胰岛素区、谷氨酸脱羧酶抗原区、蛋白酪氨酸磷酸酶抗原区及锌转运体-8抗原区。[0008]进一步，所述抗原膜上还设有质控区，所述质控区为固相于所述抗原膜上的羊抗鼠IgG区。
[0009]进一步，所述板体包括以可拆卸方式连接的上板和下板，所述上板和下板之间夹持所述抗原膜，所述上板设有贯穿其板身并用于向所述抗原膜滴加试剂和血清的滴入孔，所述抗原膜从所述滴入孔中暴露出所述糖尿病自身免疫相关抗原固定区和质控区。
[0010]进一步，所述上板和下板之间还设有过滤层和吸水层，所述过滤层位于所述抗原膜和吸水层之间。
[0011]进一步，所述滴入孔为圆孔，所述糖尿病自身免疫相关抗原固定区为与所述滴入孔对应的圆形区域，所述重组人胰岛素区、谷氨酸脱羧酶抗原区、蛋白酪氨酸磷酸酶抗原区及锌转运体-8抗原区分别沿所述糖尿病自身免疫相关抗原固定区的周向均匀设置，并且所述质控区的中心与所述糖尿病自身免疫相关抗原固定区的中心重合。
[0012]进一步，所述固定件包括海绵托和硬纸托，所述海绵托上开有用于固定所述反应板的凹槽，所述硬纸托设有用于固定所述试剂瓶的下凹瓶位。
[0013]进一步，所述盒体和盒盖的内设有相吸并使所述盒盖封闭所述盒体的磁力件。
[0014]本实用新型的有益效果:本实用新型的糖尿病自身抗体免疫渗滤联检试剂盒,试剂瓶内试剂、反应板与人体血清的配合操作能够利用斑点金免疫渗滤法在同一条件下同时检测多种糖尿病自身抗体，其检测灵敏度高、操作简便、检测速度快，无需辅助仪器设备；本实用新型结构简单、使用方便，大大降低了检测成本，适于推广应用。
【专利附图】
【附图说明】
[0015]下面结合附图和实施例对本实用新型作进一步描述:
[0016]图1为本实用新型的结构示意图；
[0017]图2为本实用新型的反应板的结构示意图；
[0018]图3为图2的A-A视图；
[0019]图4为本实用新型的抗原膜的结构示意图。
【具体实施方式】
[0020]图1为本实用新型的结构示意图，图2为本实用新型的反应板的结构示意图，图3为图2的A-A视图，图4为本实用新型的抗原膜的结构示意图，如图所示:本实施例的糖尿病自身抗体免疫渗滤联检试剂盒，包括盒体I及与所述盒体I连接的盒盖2,还包括试剂瓶和反应板3，所述盒体I内设有用于固定所述试剂瓶和反应板3的固定件，所述试剂瓶包括装有缓冲液的试剂瓶I 41及装有胶体金标记物的试剂瓶II 42，所述反应板3包括板体31及设有糖尿病自身免疫相关抗原固定区5的抗原膜32，所述抗原膜32固定在所述板体31中并且暴露出所述糖尿病自身免疫相关抗原固定区5 ;盒体1、盒盖2采用硬质纸板或者塑料制成，其外表面均设有防水层，防止进水；试剂瓶用于贮存检测所需的试剂，设有锥形尖嘴以便于滴加试剂；试剂瓶I 41中的缓冲液用于湿润抗原膜32及洗膜，缓冲液采用PBST ；试剂瓶II 42中的胶体金标记物则用于反应显色；反应板3为检测部件，其中抗原膜32上固定有各种糖尿病自身免疫抗体相应的靶抗原，板体31则用于固定抗原膜32 ;糖尿病自身免疫相关抗原固定区5为抗原膜32上的反应发生区域，即抗原固定点；当人体血清中存在与相关抗原特异性结合的抗体时，则出现显色反应；本试剂盒能够利用斑点金免疫渗滤法在同一条件下同时检测多种糖尿病自身抗体，其检测灵敏度高、操作简便、检测速度快。
[0021]本实施例中，所述抗原膜32为硝酸纤维素膜，所述糖尿病自身免疫相关抗原固定区5包括固相于所述抗原膜32上的重组人胰岛素区51、谷氨酸脱羧酶抗原区52、蛋白酪氨酸磷酸酶抗原区53及锌转运体-8抗原区54 ;硝酸纤维素膜用作抗原承载体，反应性好，来源稳定，安全性高；糖尿病自身免疫相关抗原固定区5上的抗原均对应多种糖尿病自身抗体，同时检测可减少工作量、降低成本；各抗原可通过固相操作形成检测点，具体地说，即将抗原点样后静置，然后浸入含脱脂奶粉的缓冲液中低温封闭，洗膜后自然晾干即可形成抗原固定层。
[0022]本实施例中，所述抗原膜32上还设有质控区6，所述质控区6为固相于所述抗原膜32上的羊抗鼠IgG区；质控区6用于判断抗原膜32的效力状态，其形成方法与糖尿病自身免疫相关抗原固定区5相同；当质控区6没有出现显色反应时，抗原膜32失效，避免造成检测的误判。
[0023]本实施例中，所述板体31包括以可拆卸方式连接的上板31a和下板31b，所述上板31a和下板31b之间夹持所述抗原膜32，所述上板31a设有贯穿其板身并用于向所述抗原膜32滴加试剂和血清的滴入孔33，所述抗原膜32从所述滴入孔33中暴露出所述糖尿病自身免疫相关抗原固定区5和质控区6 ;可拆卸连接方式可选用现有的各种连接如螺接、卡接、扣接等，本实施例的上板31a下表面设有凸起，下板31b上表面内凹形成与凸起过盈配合的连接孔，便于拆卸、安装，使板体31能够回收利用，降低生产成本。
[0024]本实施例中，所述上板31a和下板31b之间还设有过滤层71和吸水层72，所述过滤层71位于所述抗原膜32和吸水层72之间；过滤层71可使用粗滤纸，吸水层72可为包含在粗滤纸中的吸水材料，以增强反应时抗原膜32的滤渗功能。
[0025]本实施例中，所述滴入孔33为圆孔，所述糖尿病自身免疫相关抗原固定区5为与所述滴入孔33对应的圆形区域，所述重组人胰岛素区51、谷氨酸脱羧酶抗原区52、蛋白酪氨酸磷酸酶抗原区53及锌转运体-8抗原区54分别沿所述糖尿病自身免疫相关抗原固定区的周向均匀设置，并且所述质控区6的中心与所述糖尿病自身免疫相关抗原固定区5的中心重合；均匀分布的糖尿病自身免疫相关抗原固定区5与质控区6有利于对显色反应的观察。
[0026]本实施例中，所述固定件包括海绵托81和硬纸托82，所述海绵托81上开有用于固定所述反应板3的凹槽81a，所述硬纸托82设有用于固定所述试剂瓶的下凹瓶位(图中未示出)；海绵托81还具有减震功能，避免反应板3因碰撞而导致抗原膜32移位；硬纸托82具有一定的吸水性，能够吸收从试剂瓶中漏出的试剂液体。
[0027]本实施例中，所述盒体I和盒盖2的内设有相吸并使所述盒盖2封闭所述盒体I的磁力件9 ;磁力件9可以是两磁铁，也可以是磁铁与导磁体的结合，便于盒盖2的关闭和打开。
[0028]最后说明的是，以上实施例仅用以说明本实用新型的技术方案而非限制，
[0029]尽管参照较佳实施例对本实用新型进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本实用新型的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本实用新型技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本实用新型的权利要求范围当中。
【权利要求】
1.一种糖尿病自身抗体免疫渗滤联检试剂盒，包括盒体及与所述盒体连接的盒盖，其特征在于:还包括试剂瓶和反应板，所述盒体内设有用于固定所述试剂瓶和反应板的固定件，所述试剂瓶包括装有缓冲液的试剂瓶I及装有胶体金标记物的试剂瓶II，所述反应板包括板体及设有糖尿病自身免疫相关抗原固定区的抗原膜，所述抗原膜固定在所述板体中并且暴露出所述糖尿病自身免疫相关抗原固定区。
2.根据权利要求1所述的糖尿病自身抗体免疫渗滤联检试剂盒，其特征在于:所述抗原膜为硝酸纤维素膜，所述糖尿病自身免疫相关抗原固定区包括固相于所述抗原膜上的重组人胰岛素区、谷氨酸脱羧酶抗原区、蛋白酪氨酸磷酸酶抗原区及锌转运体-8抗原区。
3.根据权利要求2所述的糖尿病自身抗体免疫渗滤联检试剂盒，其特征在于:所述抗原膜上还设有质控区，所述质控区为固相于所述抗原膜上的羊抗鼠IgG区。
4.根据权利要求3所述的糖尿病自身抗体免疫渗滤联检试剂盒,其特征在于:所述板体包括以可拆卸方式连接的上板和下板，所述上板和下板之间夹持所述抗原膜，所述上板设有贯穿其板身并用于向所述抗原膜滴加试剂和血清的滴入孔，所述抗原膜从所述滴入孔中暴露出所述糖尿病自身免疫相关抗原固定区和质控区。
5.根据权利要求4所述的糖尿病自身抗体免疫渗滤联检试剂盒,其特征在于:所述上板和下板之间还设有过滤层和吸水层，所述过滤层位于所述抗原膜和吸水层之间。
6.根据权利要求5所述的糖尿病自身抗体免疫渗滤联检试剂盒，其特征在于:所述滴入孔为圆孔，所述糖尿病自身免疫相关抗原固定区为与所述滴入孔对应的圆形区域，所述重组人胰岛素区、谷氨酸脱羧酶抗原区、蛋白酪氨酸磷酸酶抗原区及锌转运体-8抗原区分别沿所述糖尿病自身免疫相关抗原固定区的周向均匀设置，并且所述质控区的中心与所述糖尿病自身免疫相关抗原固定区的中心重合。
7.根据权利要求6所述的糖尿病自身抗体免疫渗滤联检试剂盒，其特征在于:所述固定件包括海绵托和硬纸托，所述海绵托上开有用于固定所述反应板的凹槽，所述硬纸托设有用于固定所述试剂瓶的下凹瓶位。
8.根据权利要求7所述的糖尿病自身抗体免疫渗滤联检试剂盒,其特征在于:所述盒体和盒盖的内设有相吸并使所述盒盖封闭所述盒体的磁力件。
【文档编号】G01N33/558GK203672887SQ201420028525
【公开日】2014年6月25日 申请日期:2014年1月17日 优先权日:2014年1月17日
【发明者】陈兵, 李涛, 吴绮楠 申请人:中国人民解放军第三军医大学第一附属医院