检测水产品中四溴双酚A、十溴联苯醚和六溴环十二烷三类溴系阻燃剂含量的方法与流程

技术特征：

1.一种检测水产品中四溴双酚A、十溴联苯醚和六溴环十二烷三类溴系阻燃剂含量的方法，其特征在于：包括以下步骤，建立加速溶剂萃取-快速液相色谱-串联质谱测定水产品中四溴双酚A、十溴联苯醚和六溴环十二烷三类溴系阻燃剂含量，将需检测水产样品经C₁₈色谱柱分离，以水和甲醇为流动相进行梯度洗脱，质谱多反应监测模式检测，基质标准校正，外标法定量测定，确证。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述质谱多反应监测模式：利用流动注射泵连续进样，在负离子模式下进行全扫描，以选择适配的分子离子峰和电离方式。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述质谱多反应监测模式，为负离子电喷雾模式；ΔEMV600V，干燥气体温度为300℃；干燥气体流量为7L/min；雾化器压力为30psi；鞘气温度为300℃；鞘气流量为10L/min；毛细管电压为2000V；喷嘴电压为1900V。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：色谱条件：Waters ACQUITY UPLC BEH-C₁₈色谱柱，色谱柱规格为：2.1mm×100mm，1.7μm；色谱柱控制为40℃；进样量为10μL；流速为0.3mL/min；流动相A为水，流动相B为甲醇。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：样品预处理：

一)制样，称取约100g试样，切成小块后再用研磨机粉碎；

二)提取，称取粉碎好的1g试样于定性滤纸中，试样称处要求准确到0.01g，包好后置于萃取池中进行加速溶剂萃取，萃取剂为丙酮-正己烷溶液，样品池温度120℃，压力10.3MPa，加热时间5min，静态萃取时间10min，氮气吹扫时间100秒，循环次数为3次，冲洗样品池的体积为20％，萃取结束后，萃取液在40℃以下减压浓缩至近干，用正己烷定容至3mL，待净化；

三)净化，将C₁₈色谱柱依次用2mL二氯甲烷和2mL甲醇活化后，将试样溶液过柱，先用12mL正己烷淋洗，再用5mL甲醇洗脱，收集洗脱液，氮气吹干后加入甲醇与水混合比为1∶1的溶液定容至1mL，搅拌均匀，经0.22μm针头过滤器过滤，供快速液相色谱-串联质谱测定。

6.根据权利要求1至5中任一所述的方法，其特征在于：所述加速溶剂萃取，根据检测样品的物理性质，通过加入浓度为100μg/kg溶液回收实验，并选择丙酮和正己烷为提取溶剂，丙酮与正己烷的混合体积比为＝1∶1。

7.根据权利要求1至5中任一所述的方法，其特征在于：标准溶液的配置：用电子天平分别准确称取四溴双酚A、十溴联苯醚、六溴环十二烷，所述六溴环十二烷于100mL容量瓶中，以1∶1体积比的甲醇与水为溶剂准确配制1000μg/mL储备液，使用时用甲醇与水溶液逐级稀释至所需浓度，储备液于4℃下避光储存，所述储备液最长存放时为1个月，所述六溴环十二烷有三种异构体，分别为：α-HBCD、β-HBCD、γ-HBCD。

8.根据权利要求1至5中任一所述的方法，其特征在于：标准曲线绘制，与精密度关系：分别量取储备液适量，用以1∶1体积比的甲醇与水的溶液稀释至浓度为1.0，2.0，5.0，10，50和100μg/L的标准工作液，自动进样10μL，进行HPLC-MS/MS分析，以水产品待测物在选择反应监测MRM模式下的峰面积Y对相应的水产品待测物质量浓度X，X的单位为μg/L)使用外标法绘制标准曲线，并将10μg/L的标准工作液，连续重复进样6次，计算峰面积的相对标准偏差，结果见下表1：从表可知，水产品待测物质量浓度为1.0～100.0μg/L时线性良好，相关系数r≥0.9988，满足定量分析的要求，

表1 5种水产品待测物的线性范围、回归方程、相关系数r和峰面积的RSD

上述的MRM指的是：质谱多反应监测，所述的HPLC-MS/MS指的是：超快速液相色谱-串联质谱，峰面积的RSD是指波形图里面波峰与X轴所包围的面积。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：样品的测定：选取进入市场的22种水产品，进行随机抽样检测，如果未发现阳性样品，接着将以水产品加工品作为采集对象，扩大筛查范围；回收率、检出限与定量限的确定，根据3倍，10倍信噪比分别确定检出限，定量限，在阴性样品基质中添加5，50和100μg/kg三中浓度的混合标准溶液，按样品预处的方法进行处理，每种浓度水平重复测定6次，得到5种目标物的回收率，检出限与定量限见下表2。目标物的检出限为1.0μg/kg和2.0μg/kg，定量限为3.0μg/kg和5.0μg/kg；且在3个不同加入标准溶液浓度的水平下5种目标物的回收率在83.6％～95.9％范围内，完全满足国内外水产品中四溴双酚A、十溴联苯醚和六溴环十二烷三类溴系阻燃剂检测的要求，

表2 水产品中5种目标物的加标回收率，RSD_s，检出限和定量限

所述22种水产品为：白蟹、富贵虾、小黄鱼、大黄鱼、龙头鱼、黄姑鱼、梅童鱼、鮸鱼、玉秃、鲳鱼、带鱼、青占鱼、马鲛鱼、鳓鱼、鲭鱼、鱿鱼、乌贼、海带、海蜇、海地瓜、蛏子和文蛤。所述RSDs即指：峰面积的RSD是指波形图里面波峰与X轴所包围的面积。