一种正相液相色谱‑串联质谱法检测口含烟中烟碱旋光异构体的方法与流程

文档序号:12784726阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种正相液相色谱-串联质谱法检测口含烟中烟碱旋光异构体的方法,其特征在于:首先对口含烟中的烟碱进行提取,采用手性色谱柱实现烟碱旋光异构体的分离,柱后高压输液泵引入异丙醇并进行分流,结合串联质谱进行分析测定,具体步骤如下:

a、口含烟中烟碱的萃取:

首先对口含烟进行预处理,称取处理后的口含烟样品0.1~0.5g,加入1~5 mL 5.0%NaOH溶液,静置5~30 min,准确加入含有内标的正己烷溶液10~50 mL,超声萃取5~30 min,取上层清液过有机相滤膜,有机相滤膜上加有1~3.0 g无水硫酸钠,净化后的样品溶液进正相液相色谱-串联质谱分析;

b、样品的分析:

液相色谱条件:采用正相液相色谱-串联质谱分析,所用色谱柱为手性色谱柱;柱温:30 oC;流动相A:含有碱性添加剂的正己烷,流动相B:异丙醇;等度洗脱;流速0.5~1.0 mL/min;进样体积10 μL,分析时间为17 min;

柱后加入异丙醇及分流:在柱后通过三通阀连接,采用安捷伦高压输液泵引入异丙醇,控制异丙醇流速,同时,采用离子源上配置的三通阀进行柱后分流,通过控制PEEK管的长度,控制分流比;

离子源:电喷雾电离源(ESI);扫描方式:正离子扫描;检测方式:多反应监测MRM;电喷雾电压:5000 V;气帘气压力:30 psi;辅助气1压力:70 psi;辅助气2压力:70 psi;离子源温度:550 oC。

2.根据权利要求1所述的检测口含烟中烟碱旋光异构体的方法,其特征在于:所述口含烟包括以下类型口含烟:袋装口含烟、含化型口含烟、胶基型口含烟;所述口含烟预处理方式如下:袋装口含烟直接剪碎,含化型口含烟碾磨成粉,胶基型口含烟碾成片状并剪碎。

3.根据权利要求1所述的检测口含烟中烟碱旋光异构体的方法,其特征在于:步骤a中,采用外消旋的d3-烟碱为内标,d3-S-(-)-烟碱和d3-R-(+)-烟碱合并计算,浓度范围为1~10 mg/mL。

4.根据权利要求1所述的检测口含烟中烟碱旋光异构体的方法,其特征在于:步骤b中,所述的手性色谱柱为大赛璐手性色谱柱CHIRALPAK® IC,规格为4.6 mm×250 mm,i.d. 5 µm。

5.根据权利要求1所述的检测口含烟中烟碱旋光异构体的方法,其特征在于:所述碱性流动相添加剂为二乙胺,添加量为正己烷质量的0.02%~0.2%。

6.根据权利要求1所述的检测口含烟中烟碱旋光异构体的方法,其特征在于:所述的等度洗脱条件为A: B = 95:5。

7.根据权利要求1所述的检测口含烟中烟碱旋光异构体的方法,其特征在于:柱后加入异丙醇流速为0.1~1.0 mL/min。

8.根据权利要求1所述的检测口含烟中烟碱旋光异构体的方法,其特征在于:柱后分流比例为1:3~1:5。

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