本发明主要涉及果蔬检测领域，尤其涉及一种检测果蔬多菌灵农药残留的方法。
背景技术：
多菌灵又名棉萎灵，为高效低毒内吸性杀虫剂，有内吸治疗和保护作用，是一种广谱杀菌剂，对多种作物由真菌引起的病害有防治效果，广泛用于果树、蔬菜、粮棉和林木病害的防治，尤其对子囊菌纲的某病原菌和半知菌类引起的病害有较好的防效。目前，大型农贸批发市场农残快速检测试剂盒只针对果蔬中有机磷和氨基甲酸酯类农药的快速检测。因此，需发明一种快速准确检测多菌灵的方法迫在眉睫。
技术实现要素：
为克服目前不能快速准确检测果蔬中多菌灵农药残留的缺点，本发明提供了一种快速定性定量检测果蔬中多菌灵农药残留的方法。
本发明一种检测果蔬多菌灵农药残留的方法包括以下步骤：
(1)样品处理：将待测果蔬按4分法切碎后置于食品搅拌机中搅拌成浆糊状；
(2)振荡：用电子天平称取搅拌成浆糊状后的样品10g加入到50ml的离心管中，然后在所述离心管中加入5g无水氯化钠，再在所述离心管中加入25ml乙腈，盖上所述离心管盖子，最后把所述离心管固定在振荡摇床振荡20min；
(3)离心：把振荡后的所述离心管固定到离心机里进行离心处理；
(4)浓缩：从所述离心管里吸取5ml乙腈提取液放入到氮吹管中，在氮吹仪作用下把所述乙腈提取液吹至近干；
(5)净化：往吹至近干的氮吹管中加入5ml0.1mol/l盐酸在漩涡混合器的作用下溶解残渣2min后，分2次待过柱：将mcx小柱依次用3ml甲醇、3ml水预洗；待液面到达填料表面时，迅速加入提取液，再用3ml水、3ml甲醇淋洗，不收集；最后用3ml5％氨水-甲醇溶液洗脱，挤干、收集；
(6)定容：在氮吹仪作用下吹至近干后，加入1ml流动相后漩涡混合,把溶解的液体过0.2μm滤膜过滤处理；
(7)色谱分析：过滤后的液体在超高效液相色谱仪的色谱条件下进行色谱分析，根据色谱分析软件可计算出果蔬中多菌灵的含量。
优选地，在所述第(2)步振荡过程中，在所述离心管中加入陶瓷均质子。
优选地，在所述第(3)步离心过程中，设定的离心参数为离心转速：5000r/min；时间：5min。
优选地，在所述第(4)步浓缩过程中，所述氮吹仪设置的温度为50℃。
优选地，在所述第(6)步定容过程中，所述流动相的参数为甲醇：水(v/v)＝60:40。
优选地，在所述第(7)步色谱分析过程中，所述超高效液相色谱仪包括荧光检测器和紫外检测器，所述荧光检测器与所述紫外检测器串联同时进行分析，其以所述荧光检测器为主，所述紫外检测器为辅助定性。
优选地，在所述第(7)步色谱分析过程中，所述超高效液相色谱仪的参数为色谱柱：agilenteclipseplusrrhd1.8μm2.1×50mm；流动相为甲醇：水(v/v)＝60:40；流速：0.2ml/min；检测波长：紫外286nm，荧光激发波长286nm、发射波长315nm；进样量：10μl。
优选地，一种检测果蔬多菌灵农药残留的方法测定的果蔬中多菌灵含量最低检出限为0.004mg/kg；多菌灵含量定量限为0.020mg/kg。
优选地，在所述第(6)步定容过程中，所述氮吹仪设置的温度为50℃。
与现有技术相比，本发明一种检测果蔬多菌灵农药残留的方法采用超高效液相色谱仪节约了试剂，减少有机试剂对环境的污染；同时具有样品前处理操作简单、准确性高和快速等特点，较高的灵敏度和精密度满足实际样品检测的需要，适用于果蔬样品中多菌灵残留快速、批量检测的工作要求，可以作为常规残留检测方法使用。
具体实施方式
为了使本发明的目的，技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施实例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本发明一种检测果蔬多菌灵农药残留的方法包括以下步骤：
(1)样品处理：将待测果蔬按4分法切碎后置于食品搅拌机中搅拌成浆糊状；
(2)振荡：用电子天平称取搅拌成浆糊状后的样品10g于50ml的离心管中，在所述离心管中加入陶瓷均质子，所述陶瓷均质子的作用是为了防止盐结块；然后在所述离心管中加入5g无水氯化钠；再在所述离心管中加入25ml乙腈，盖上所述离心管盖子，最后把所述离心管固定在振荡摇床振荡20min，振荡的作用就是使所述离心管中的试剂充分接触提取反应；
(3)离心：把振荡后的所述离心管固定到离心机里进行离心处理，同时设定离心参数为离心转速：5000r/min，时间：5min，离心的作用是使乙腈和水分层；
(4)浓缩：从所述离心管里吸取5ml乙腈提取液放入到氮吹管中，在设置为50℃氮吹仪作用下把所述乙腈提取液吹至近干；
(5)净化：往吹至近干的氮吹管中加入5ml0.1mol/l盐酸在漩涡混合器的作用下溶解残渣2min后，分2次待过柱：将mcx小柱依次用3ml甲醇、3ml水预洗，待液面到达填料表面时，迅速加入盐酸溶解液，再用3ml水、3ml甲醇淋洗，不收集。最后用3ml5％氨水-甲醇溶液洗脱，挤干、收集；
(6)定容：在设置为50℃氮吹仪作用下吹至近干后，加入1ml流动相为甲醇:水(v/v)＝60:40后漩涡混合,把溶解的液体过0.2μm滤膜过滤处理；
(7)色谱分析：过滤后的液体在超高效液相色谱仪的色谱条件下进行色谱分析，根据色谱分析软件可计算出果蔬中多菌灵的含量；所述超高效液相色谱仪包括荧光检测器和紫外检测器,所述荧光检测器与所述紫外检测器串联同时进行分析，其以所述荧光检测器为主，所述紫外检测器为辅助定性，双检测器独立检测提高了检测准确性，减少了假阳性的误检。所述超高效液相色谱仪的参数为色谱柱：agilenteclipseplusrrhd1.8μm2.1×50mm；流动相为甲醇：水(v/v)＝60:40；流速：0.2ml/min；检测波长：紫外286nm，荧光激发波长286nm、发射波长315nm进样量：10μl。
通过以上步骤方法测定的果蔬中多菌灵含量，多菌灵含量最低检出限为0.004mg/kg，多菌灵含量定量限为0.020mg/kg。
本发明一种检测果蔬多菌灵农药残留的方法采用超高效液相色谱仪配合紫外-荧光检测器进行分析，以荧光检测器为主，紫外检测器为辅助定性，双检测器独立检测提高了检测准确性，减少了假阳性的误检。色谱柱采用了小内径柱，提高柱效能更好的分离色谱峰，缩短了检测分析时间，多菌灵保留时间为紫外2.572min、荧光2.260min，大大提高检测工作效率。本发明一种检测果蔬多菌灵农药残留的方法流动相流速0.2ml/min，节约试剂，减少有机试剂对环境的污染，通过简化样品前处理过程、选择合适的固相萃取小柱及流动相，以达到回收率高、检出限低的要求，本发明一种检测果蔬多菌灵农药残留的方法具有操作简单、重复性好的特点，紫外-荧光检测器响应值高，定性、定量准确，满足批量样品检测的工作要求。
与现有技术相比，本发明一种检测果蔬多菌灵农药残留的方法通过溶剂提取、样品净化等前处理方法建立了超高效液相色谱法测定果蔬中多菌灵农药残留。本发明一种检测果蔬多菌灵农药残留的方法采用超高效液相色谱仪节约了试剂，减少有机试剂对环境的污染；同时具有样品前处理操作简单、准确性高和快速等特点，较高的灵敏度和精密度满足实际样品检测的需要，适用于果蔬样品中多菌灵残留快速、批量检测的工作要求，可以作为常规残留检测方法使用。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的原则之内所作的任何修改，等同替换和改进等均应包含本发明的保护范围之内。