1.一种快速识别不表达抗原细胞的免疫阴性荧光染色方法,其特征在于:所述方法至少包括:使用荧光剂对所有细胞的细胞核或者蛋白胺基等进行无差别荧光染色和使用荧光淬灭剂标记的抗体对细胞进行抗原识别。
2.如权利要求1所述的快速识别不表达抗原细胞的免疫阴性荧光染色方法,其特征在于:所述荧光剂包括细胞核荧光剂和细胞蛋白胺基荧光剂。
3.如权利要求2所述的快速识别不表达抗原细胞的免疫阴性荧光染色方法,其特征在于:所述荧光剂为所述细胞核荧光剂时,所述方法包括以下步骤:1)使用荧光剂对所有细胞的细胞核进行无差别荧光染色,2)使用荧光淬灭剂标记的抗体对细胞进行抗原识别,3)荧光淬灭剂洗脱,4)荧光显微镜观察;
或所述方法包括以下步骤:1)使用荧光淬灭剂标记的抗体对细胞进行抗原识别,2)荧光淬灭剂洗脱,3)使用荧光剂对所有细胞的细胞核进行无差别荧光染色,4)荧光显微镜观察。
4.如权利要求3所述的快速识别不表达抗原细胞的免疫阴性荧光染色方法,其特征在于:所述细胞核荧光剂为dapi。
5.如权利要求2所述的快速识别不表达抗原细胞的免疫阴性荧光染色方法,其特征在于:所述荧光剂为所述细胞蛋白胺基荧光剂时,所述免疫阴性荧光染色方法包括以下步骤:1)使用荧光剂对所有细胞的细胞蛋白胺基进行无差别荧光染色,2)荧光剂洗脱,3)使用荧光淬灭剂标记的抗体对细胞进行抗原识别,4)荧光淬灭剂洗脱,5)荧光显微镜观察。
6.如权利要求1所述的快速识别不表达抗原细胞的免疫阴性荧光染色方法,其特征在于:所述抗体为egfr抗体或cd45抗体。
7.如权利要求1所述的快速识别不表达抗原细胞的免疫阴性荧光染色方法,其特征在于:所述抗体与所述荧光淬灭剂按照质量比以1:0.01进行配比。
8.如权利要求7所述的快速识别不表达抗原细胞的免疫阴性荧光染色方法,其特征在于:所述荧光淬灭剂标记的抗体的制备方法包括:1)配制0—4℃1mg/ml抗体溶液备用;2)根据所述抗体抗体与荧光淬灭剂的质量比为1:0.01,称取所述荧光淬灭剂,配制成0.01mg/ml的荧光淬灭剂溶液;3)将所述抗体溶液与荧光淬灭剂溶液按照体积比1:1混合,充分搅拌后,在0—4℃冰箱中静置;4)所述荧光淬灭剂溶液与抗体溶液结合完毕后,将该溶液离心过滤,将上清液装入透析袋中透析;5)取上述透析袋内的溶液,加入缓冲液混合均匀后形成荧光淬灭剂-抗体溶液。
9.如权利要求8所述的快速识别不表达抗原细胞的免疫阴性荧光染色方法,其特征在于:所述步骤5)中的缓冲液为伯胺类缓冲液。
10.如权利要求3所述的快速识别不表达抗原细胞的免疫阴性荧光染色方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:1)将实验细胞进行离心,用1×pbs缓冲液吹悬,涂敷在载玻片上,并烘干;2)将烘干后的细胞载玻片,使用所述荧光淬灭剂标记的抗体覆盖细胞涂片区,进行抗体孵育;3)使用pbst缓冲液洗脱;4)使用所述细胞核荧光剂dapi覆盖细胞涂片区,并盖上盖玻片;5)荧光显微镜进行观察。