明，该方法重复性好、准确度高。此外，本发 明中建立的方法对其他药材、药材提取物及其制剂中鞣质的含量测定也提供了很好的借鉴 作用。
【附图说明】
[0025] 图1是本发明的没食子酸线性关系图。
【具体实施方式】
[0026] 为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面通过具体实施例对 本发明作进一步的详细说明，这些实施例仅用于阐述本发明，而不是限制本发明的保护范 围。
[0027] 本发明提供的含量测定方法中所用九节茶提取物及其制剂由广州白云山敬修堂 药业股份有限公司提供，其他试剂均为市售。干酪素为化学纯，分别由洛阳市化学试剂厂、 汕头市西陇化工厂及广东环凯微生物科技有限公司提供，没食子酸对照品由中国药品生物 制品检定所提供，批号110831-200302。水为超纯水，其它试剂为分析纯。主要仪器有日本 岛津公司UV-2450型紫外分光光度计，KQ-600DE型数控超声波清洗仪（昆山市超声仪器有 限公司），Precisa404A、92SM-202A型电子分析天平等。
[0028] 实施例1:
[0029] 不同生产厂家的干酪素对九节茶提取物中鞣质含量测定结果的影响：
[0030] 一种九节茶提取物的检测方法，包括如下步骤（以下步骤应避光操作）：
[0031] 1)对照品溶液的制备：精密称取没食子酸对照品50. 10mg，置100ml棕色量瓶中， 加水溶解并稀释至刻度，精密量取5ml，置50ml棕色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得浓 度为0. 05010mg/ml的没食子酸对照品溶液。
[0032]2)标准曲线的制备：精密量取上述对照品溶液0. 5ml、1. 0ml、2. 0ml、3. 0ml、 4. 0ml、5. 0ml，分别置25ml棕色量瓶中，各加入磷钼钨酸试液lml，再分别加水11. 5ml、 1lml、10ml、9ml、8ml、7ml，用29 %碳酸钠溶液稀释至刻度，摇勾，放置30分钟以相应的试剂 为空白，照紫外-可见分光光度法，在760nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度 为横坐标，绘制标准曲线。回归方程为Y= 0. 1183X+0. 0472,r= 0.9995,结果表明，没食 子酸对照品浓度在1. 0020yg/ml?10. 020yg/ml之间与其吸光度呈良好的线性关系。见 附图1。
[0033] 3)供试品溶液的制备：取九节茶提取物粉末约0. 25g，精密称定，置具塞锥形瓶 中，加水250ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀， 静置（使固体物沉淀），滤过，弃去初滤液50ml，精密量取续滤液20ml，置100ml棕色量瓶 中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。
[0034] 4)供试品溶液中总酚的测定：精密量取供试品溶液2ml，置25ml棕色量瓶中，加入 磷钼钨酸试液lml，加水10ml，用浓度为29%的碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置30分钟 以相应的试剂为空白，按照紫外-可见分光光度法，在760nm的波长处测定吸光度，从标准 曲线中读出供试品溶液中没食子酸的量（mg)，计算，即得总酚的含量；
[0035] 5)供试品溶液中不被吸附的多酚的测定：精密量取供试品溶液25ml，加至已盛有 〇. 6g干酪素极细粉的100ml具塞锥形瓶中，密塞，置30°C水浴中保温1小时，时时振摇，取 出，放冷，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液2ml，置25ml棕色量瓶中，加入磷钼钨酸 试液lml，加水10ml，用浓度为29 %的碳酸钠溶液稀释至刻度，摇勾，放置30分钟以相应的 试剂为空白，按照紫外-可见分光光度法，在760nm的波长处测定吸光度，从标准曲线中读 出供试品溶液中没食子酸的量（mg)，计算，即得不被吸附的多酚的含量；
[0036] 6)供试品中鞣质含量的计算：根据供试品溶液稀释倍数分别计算出供试品中的 总酚量和不被吸附的多酚量，再按下式计算供试品中鞣质的含量：鞣质含量=总酚量一不 被吸附的多酚量。
[0037] 试验结果显示，同一批九节茶提取物采用不同生产厂家生产的干酪素（不同生产 厂家生产的干酪素粒度差别很大）测得的鞣质的含量偏差很大，使用粒度为"极细粉"的干 酪素时，测定结果明显高于使用粒度为"中粉"的干酪素，表明该测定法中所使用的试剂"干 酪素"对鞣质的含量测定结果影响较大。见表1。
[0038]表1不同生产厂家（粒度）的干酪素对九节茶提取物中鞣质的含量测定结果的影 响
【主权项】
1. 一种九节茶提取物及其制剂的检测方法，其特征在于，包括如下步骤： 1) 对照品溶液的制备；精密称取没食子酸对照品50mg，置100ml栋色量瓶中，加水溶 解并稀释至刻度，精密量取5ml，置50ml栋色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶 液，每1ml对照品溶液中含没食子酸0. 05mg ; 2) 标准曲线的制备；精密量取对照品溶液0. 5ml、l. 0ml、2. 0ml、3. 0ml、4. 0ml、5. 0ml， 分别置25ml栋色量瓶中，各加入磯钢鹤酸试液1ml，再分别加水11. 5ml、11ml、10ml、9ml、 8ml、7ml，用浓度为29 %的碳酸钢溶液稀释至刻度，摇匀，放置30分钟W相应的试剂为空 白，按照紫外-可见分光光度法，在760nm的波长处测定吸光度，W吸光度为纵坐标，浓度为 横坐标，绘制标准曲线； 3) 供试品溶液的制备；取定量的九节茶提取物或W九节茶提取物制成的固体制剂粉 末，精密称定，置具塞锥形瓶中，加水250ml，称定重量，经过提取，放冷，再称定重量，用水补 足减失的重量，摇匀，静置使固体物沉淀，滤过，弃去初滤液50ml，精密量取续滤液20ml，置 100ml栋色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。 4) 供试品溶液中总酪的测定；精密量取供试品溶液2ml，置25ml栋色量瓶中，加入磯钢 鹤酸试液1ml，加水10ml，用浓度为29 %的碳酸钢溶液稀释至刻度，摇匀，放置30分钟W相 应的试剂为空白，按照紫外-可见分光光度法，在760nm的波长处测定吸光度，由步骤2)的 标准曲线中读出供试品溶液中没食子酸的量（mg)，计算，即得总酪的含量； 5) 供试品溶液中不被吸附的多酪的测定；精密量取供试品溶液25ml，加至已盛有0.6g 干酪素极细粉的100ml具塞锥形瓶中，密塞，置30°C水浴中保温1小时，时时振摇，取出，放 冷，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液2ml，置25ml栋色量瓶中，加入磯钢鹤酸试液 1ml，加水10ml，用浓度为29 %的碳酸钢溶液稀释至刻度，摇匀，放置30分钟W相应的试剂 为空白，按照紫外-可见分光光度法，在760nm的波长处测定吸光度，由步骤2)的标准曲线 中读出供试品溶液中没食子酸的量（mg)，计算，即得不被吸附的多酪的含量； 6) 供试品中踩质含量的计算；根据供试品溶液稀释倍数分别计算出供试品中的总酪 量和不被吸附的多酪量，再按下式计算供试品中踩质的含量：踩质含量=总酪量一不被吸 附的多酪量。
2. 根据权利要求1所述的九节茶提取物及其制剂的检测方法，其特征在于：在步骤5) 中，所述的干酪素极细粉是指能全部通过八号筛，并含能通过九号筛不少于95%的干酪素 粉末。
3. 根据权利要求1所述的九节茶提取物及其制剂的检测方法，其特征在于：在步骤3) 中，所述的九节茶提取物及其制剂的粉末取样量为0. 25g。
4. 根据权利要求1所述的九节茶提取物及其制剂的检测方法，其特征在于：在步骤3) 中，所述的提取方法为加热回流提取或加热超声处理。
5. 根据权利要求4所述的九节茶提取物及其制剂的检测方法，其特征在于：在步骤3) 中，加热回流提取的时间为0. 5-1小时。
6. 根据权利要求4所述的九节茶提取物及其制剂的检测方法，其特征在于：在步骤3) 中，加热超声处理的时间为1-2小时。
【专利摘要】本发明公开了一种九节茶提取物及其制剂的检测方法，包括如下步骤：1)对照品溶液的制备；2)标准曲线的制备：量取对照品溶液,测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；3)供试品溶液的制备；4)量取供试品溶液，测定吸光度，由标准曲线中读出供试品溶液中没食子酸的量，计算，即得总酚的含量；5)量取供试品溶液，测定吸光度，由标准曲线中读出供试品溶液中没食子酸的量，计算，即得不被吸附的多酚的含量；6)供试品中鞣质含量的计算。本发明能很好地控制九节茶提取物及其制剂的质量，进一步提高了其质量控制标准，保证其质量的稳定、均一、可控。该方法进一步提高了鞣质的提取效率和结果的准确度，节省了检验工时。
【IPC分类】G01N21-31
【公开号】CN104535513
【申请号】CN201410803162
【发明人】王文楚, 彭红英, 陆颂规, 江涛, 陈雪华, 刘敏珊, 杨滨宾, 陈晓坚, 程君璐
【申请人】广州白云山敬修堂药业股份有限公司
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2014年12月17日