一种银杏达莫注射制剂的检测方法
【技术领域】：
[0001] 本发明涉及一种银杏达莫注射制剂的检测方法，属于药物技术领域。 技术背景：
[0002] 也脑血管疾病如冠也病、脑血栓、高血压、脑梗塞等均是当今世界上最常见和危害 最大的疾病之一，也是危害我国人民健康的常见病、多发病，已成为人口死亡的主要原因之 一；据报告，近年来的发病率有逐年增高趋势，而且中、青年患者不断增加。银杏达莫注射液 是由银杏叶提取物与双嚼达莫制作而成的，收载于化学药品地方标准上升国家标准(第一 册)，标准号；WS-10001-(皿-0087)-2002。该产品能抗血小板聚集，属于冠状动脉扩张药，适 用于预防和治疗冠也病、血栓栓塞性疾病，其中银杏叶提取物中含有黄丽类、聰类、酷类、生 物碱等活性成分，能起到改善也肌和脑组织代谢、增加冠状动脉及脑血管血流，改善也肌和 脑组织等血供的作用，对于治疗也脑血管疾病如冠也病、也绞痛、也律失常、脑血栓、老年性 痴呆等有较好的疗效，同时可W提高机体免疫力，抵抗疾病发生。但是药物制剂必须要在保 证产品质量稳定可控安全的基础之上，才能不短的更新发展。
[0003] 文献"双定性双定量相似度法评价银杏达莫注射液的高效液相色谱指纹图谱"（孙 国祥等，色谱第25卷第4期，2007年7月）一文中公开了 W双定性相似度S和S、双定量相 似度C和P评价银杏达莫注射液的HPLC指纹图谱，W山奈酷、芦了、搬皮素、异鼠李素、银杏 内醋A、B和C为对照品，其中色谱条件为CenturySIL C18BDS柱，流动相A ;水冷1%醋酸)； B :己膳(含 1〇/〇 醋酸）。梯度洗脱，顺序为 〇-20min，0〇/〇-15〇/〇B ;20-35min，15〇/〇-22〇/〇B ;35-45min， 22〇/〇-26%B ;45-55min，26%-32%B ;55-70min，32%-55%B ;70-80min，55%-62%B。流速 1. OmL/ min,检测波长265皿，柱温30. 0 + 0. 15°C，洗脱时间80min。该检测方法虽然能较好地控制 银杏达莫注射液的质量，但分析评价方法复杂，且对产品的其他具体有效成分如白果内醋 等的分离、评价等还不完全。文献"银杏达莫注射液指纹图谱研究"（宋劲燕，科技情报开发 与经济第18卷第6期，2008年7月)一文中公开了对银杏叶提取物和注射剂的指纹图谱研 究，W芦下为对照品，其中色谱条件为十八焼基娃焼键合娃胶为填充剂，流动相A ;己膳；B : 0. 4%磯酸溶液(用H己胺调节抑至2. 5)。梯度洗脱，顺序为0-30min，85%-83%B ;30-40min， 83〇/〇-80%B ;40-60min，80%-75%B ;60-80min，75%-85%B。流速 1. 0血/min,检测波长 360nm，柱 温40. (TC，洗脱时间80min。该方法仅W芦下作为对照，对银杏叶提取物中的搬皮素等黄 丽类和银杏内醋A等聰类内醋不能很好的标定和指正，也无法评价其有效成分的含量。为 了更好的控制该制剂的质量，保证用药的安全性，更好的指导生产，使工艺控制更加严格合 理，使消费者能全面认识产品质地，需要不断研究和摸索出更有利于产品质量检测、明确具 体有效成分种类和含量的方法。
【发明内容】
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[0004] 本发明的目的是提供一种银杏达莫注射制剂的检测方法，该种方法针对如下产品 向相关的生产、检测机构提供检测的指标、检测的手段、技术方法等，W便更好的控制该制 剂的质量，保证用药的安全性，能够更好的指导生产，使生产工艺控制更加严格合理，使消 费者能全面认识产品质地，所针对的产品为：
[0005] 由银杏叶提取物20-100重量份、双嚼达莫2-10重量份组合制备而成的注射剂，包 括直接用于注射给药的注射液、需稀释后用于静脉滴注的注射用浓溶液、直接供静脉滴注 的葡萄糖静脉输液和氯化轴静脉输液W及用冷冻干燥法或喷雾干燥法制得的注射用无菌 粉末和无菌块状物。
[0006] 例如，所述的产品可W是市售的银杏达莫注射液，规格为5ml、10ml，由贵州益巧 制药、山西普德药业、通化谷红制药等3家公司生产；也可W是专利CN200510200678. 5,名 称为："银杏达莫冻干制剂及其制备方法"提供的制备方法制备的冻干剂型，也可W是专利 CN200810068921. 6,名称为；"银杏叶提取物与双嚼达莫的组合物制剂及其制备方法"提供 的制备方法制备的注射制剂。
[0007] 本发明是该样构成的：
[0008] 银杏达莫注射制剂的检测方法，包括W下内容：
[0009] 银杏达莫注射制剂的指纹图谱测试，包括W银杏叶提取物黄丽类成分特征为主的 指纹图谱和W银杏叶提取物聰类内醋成分特征为主的指纹图谱；
[0010] 银杏达莫注射制剂的含量测定，包括W银杏叶提取物黄丽类成分特征为主的含 量测定，具体表现为搬皮素、山奈素、异鼠李素的含量；和W银杏叶提取物聰类内醋成分特 征为主的含量测定，具体表现为银杏内醋A、B、C和白果内醋的含量。
[0011] 其中，指纹图谱检测方法包括如下内容：
[0012] a、采用高效液相色谱法测试W银杏叶提取物黄丽类成分特征为主的指纹图谱：
[0013] (1)供试品溶液的制备；取待测银杏达莫注射制剂适量，注射液挥干水分，冻干粉 直接置于甲醇-25%盐酸溶液的混合液中，加热回流后放冷，过滤后，取续滤液作为供试品 溶液；
[0014] (2)对照品溶液的制备；取适量银杏叶药材中的主要活性成分对照品，包括芦下、 山奈酷芸香糖巧、异鼠李素芸香糖巧、山奈素、搬皮素、异鼠李素，用水或甲醇或己醇溶解， 定容至合适浓度，作为对照品溶液；
[0015] (3)色谱条件：色谱柱采用十八焼基娃焼键合娃胶为填料；流动相A为己膳，流 动相B为0. 1 %?2 %磯酸溶液，梯度洗脱，流速为0.9?l.Oml/min、检测波长为254? 360皿、柱温为30-4(TC，记录时间为80-90min ;
[0016] (4)标准指纹图谱的制定；W上述方法作为制定W银杏叶提取物黄丽类成分特征 为主的指纹图谱的测试手段；依据10批或10批W上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图 谱，W确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述 标准指纹图谱中，共有峰有15?30个；
[0017] (5) w(l)?（3)所述方法作为待测银杏达莫注射制剂中W银杏叶提取物黄丽类 成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；
[0018] (6)将待测银杏达莫注射制剂的指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列 要求的部分或全部：
[0019] I.计算待测银杏达莫注射制剂的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为 0. 90 ?1. 00 ;
[0020] II.待测银杏达莫注射制剂指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的 10% ；
[0021] III.待测银杏达莫注射制剂指纹图谱中有5%?50%的共有峰面积的比值与标 准指纹图谱中各共有峰面积的比值比较，其差值不得大于±50% ;
[0022] b、采用高效液相色谱法测试W银杏叶提取物聰类内醋成分特征为主的指纹图 谱：
[0023] (1)供试品溶液的制备；取待测银杏达莫注射制剂适量，冻干粉加水溶解，注射液 直接加1%?4%盐酸溶液，用己酸己醋萃取3-4次，分取己酸己醋液，用1%?10%醋酸轴溶 液洗涂，分取醋酸轴液，再用己酸己醋洗涂，分取己酸己醋洗液，用水洗涂1-2次，分取水洗 液，用己酸己醋洗涂，合并己酸己醋液，回收己酸己醋至干，残渣加甲醇使溶解，摇匀，作为 供试品溶液；
[0024] (2)对照品溶液的制备；取银杏内醋A，B，C及白果内醋适量，用甲醇或己醇溶解， 定容至合适浓度，作为对照品溶液；
[002引（3)色谱条件泡谱柱采用十八焼基娃焼键合娃胶为填料；流动相A为甲醇，流动 相B为四氨巧喃；水=5-15:80-70的溶液，梯度洗脱，流速为0. 7?0. 9ml/min，蒸发光散射 检测器检测，柱温在25?35C范围内，记录时间为60-70min ;
[0026] (4)标准指纹图谱的制定；W上述方法作为制定W银杏叶提取物聰类内醋类成分 特征为主的指纹图谱的测试手段；依据10批或10批W上供试品所测得的图谱，制定标准指 纹图谱，W确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间， 所述标准指纹图谱中，共有峰有3?20个；
[0027] (5) W(l)?（3)所述方法作为待测银杏达莫注射制剂中W银杏叶提取物聰类内 醋类成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；
[0028] (6)将待测银杏达莫注射制剂的指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列 要求的部分或全部：
[0029] I.计算待测银杏达莫注射制剂的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为 0. 90 ?1. 00 ;
[0030] II