一种治疗水貂大肠杆菌病的肌肉注射液及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种治疗水貂大肠杆菌病的肌肉注射液，1000ml注射液中包含20g甘露醇，60g氯化钠，60?70g中药提取物；制成所述中药提取物的原料组成及重量份数为：椿皮8?12份，菠萝根叶6?15份，香茅10?16份，黄花败酱草10?15份，虎杖5?9份，大蓟根4?6份，野菊花10?15份，全栝楼4?8份，连翘9?12份，大蒜10?15份，山楂9?13份，马齿苋鲜品12?16份，车前子6?9份，白芷9?12份，杠板归4?6份，黑枸杞5?10份，苦参10?14份，炙甘草4?7份。该肌肉注射液安全无副作用，使用方便，可取得较好的杀菌消炎效果，同时补充营养，增强水貂自身免疫力，快速有效治疗该病。
【专利说明】
一种治疗水貂大肠杆菌病的肌肉注射液及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明属于兽药领域，特别涉及一种治疗水貂大肠杆菌病的肌肉注射液及其制备 方法。
【背景技术】
[0002] 水貂是一种半水栖动物，善于游泳、潜水，夏天更喜欢嬉水。水貂皮草属于细皮毛 裘皮，皮板优良，轻柔结实，毛绒丰厚，色泽光润，主要产于美洲和欧洲地区。用它制成的皮 草服装，雍容华贵，是理想的裘皮制品，有"裘中之王"的美称，因此又成为了人们富贵的象 征。在国外，被称为"软黄金"。貂皮具有"风吹皮毛毛更暖，雪落皮毛雪自消，雨落皮毛毛不 湿"的三大特点，具有很高的经济价值。水貂大肠杆菌病为一种急性传染病，是由大肠杆菌 引起的。本病多为自发感染，即肠道内的大肠杆菌在水貂机体抵抗力下降时会迅速繁殖，产 生毒力，引发致病。该病在发病初期多表现为食欲减退，精神不佳，体温升高，鼻镜干燥，粪 便稀软呈黄色或灰色，继而出现下痢，水样腹泻及血便，四肢无力，体质虚弱，弯腰弓背，肛 门周围粪便污染严重。水貂尤其是幼貂食物摄入营养不足，卫生欠佳，很容易患此病。采用 传统的口服、注射抗生素的方法防治该病，虽然可以起到一定的效果，但容易引起较强的抗 药性，且损害水貂自身免疫力，影响其正常生长发育。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于提供一种治疗水貂大肠杆菌病的肌肉注射液及其制备方法。该 肌肉注射液采用天然食材和中草药制成，安全无副作用，使用方便，可取得较好的杀菌消炎 效果，同时补充营养，增强水貂自身免疫力，快速有效治疗该病。
[0004] 为了实现上述目的，本发明提供的技术方案如下：
[0005] -种治疗水貂大肠杆菌病的肌肉注射液，1000 ml注射液中包含20g甘露醇，60g氯 化钠，60-70g中药提取物;制成所述中药提取物的原料组成及重量份数为:椿皮8-12份，菠 萝根叶6-15份，香茅10-16份，黄花败酱草10-15份，虎杖5-9份，大蓟根4-6份，野菊花10-15 份，全栝楼4-8份，连翘9-12份，大蒜10-15份，山楂9-13份，马齿苋鲜品12-16份，车前子6-9 份，白芷9-12份，杜板归4-6份，黑枸杞5-10份，苦参10-14份，炙甘草4-7份。
[0006] 进一步的，1000 ml注射液中包含20g甘露醇，60g氯化钠，60g中药提取物；制成所述 中药提取物的原料组成及重量份数为:椿皮8份，菠萝根叶6份，香茅10份，黄花败酱草10份， 虎杖5份，大蓟根4份，野菊花10份，全栝楼4份，连翘9份，大蒜10份，山楂9份，马齿苋鲜品12 份，车前子6份，白芷9份，杜板归4份，黑枸杞5份，苦参10份，炙甘草4份。
[0007] 进一步的，1000 ml注射液中包含20g甘露醇，60g氯化钠，65g中药提取物；制成所述 中药提取物的原料组成及重量份数为:椿皮10份，菠萝根叶12份，香茅13份，黄花败酱草12 份，虎杖7份，大蓟根5份，野菊花12份，全栝楼6份，连翘10份，大蒜12份，山楂11份，马齿苋鲜 品14份，车前子7份，白芷10份，杜板归5份，黑枸杞7份，苦参12份，炙甘草6份。
[0008] 进一步的，1000 ml注射液中包含20g甘露醇，60g氯化钠，70g中药提取物；制成所述 中药提取物的原料组成及重量份数为:椿皮12份，菠萝根叶15份，香茅16份，黄花败酱草15 份，虎杖9份，大蓟根6份，野菊花15份，全栝楼8份，连翘12份，大蒜15份，山楂13份，马齿苋鲜 品16份，车前子9份，白芷12份，杜板归6份，黑枸杞10份，苦参14份，炙甘草7份。
[0009]本发明还公开了所述的一种治疗水貂大肠杆菌病的肌肉注射液的制备方法，其特 征在于，包括以下步骤：
[0010] (1)椿皮、菠萝根叶、香茅、黄花败酱草、虎杖、大蓟根、野菊花、全栝楼、连翘、大蒜、 山楂、车前子、白、杜板归、苦参、炙甘草粉碎得1 〇〇目混合粉末，所得混合粉末加入总质量 倍数5倍的水浸泡1小时，文火煎煮1小时，煎煮后过500目过滤网得滤液，再次加入混合粉末 总质量倍数5倍的水浸泡0.5小时，文火煎煮1小时后过500目过滤网得滤液，合并两次所得 滤液冷却至室温，备用；
[0011] (2)马齿苋鲜品、大蒜、黑枸杞洗净后加入步骤（1)所得滤液浸泡1小时后研磨成 浆，静置3小时后过200目过滤网得滤液；
[0012] ⑶步骤⑵所得滤液低温浓缩(30°C以下）至相对密度为1.32±0.02(30°C)的稠 膏，所得稠膏真空冷冻干燥，所得固体超微粉碎得1000目粉末即为中药提取物；
[0013] (4)称取适量的步骤（3)所得的中药提取物，加入20g甘露醇和60g氯化钠，加入 200ml注射用水搅拌使其溶解，进一步加注射用水至混合溶液总体积1000ml，将混合溶液加 入匀质机中进行匀质，匀质温度15±2°C，时间13±2分钟得匀质液体，调节pH值为7.0,再进 一步用0.22μπι滤器精滤得滤液；
[0014] (5)对步骤(4)所得滤液紫外灭菌25 ± 5分钟，将所得液体分装成2ml/支的肌肉注 射液即得。
[0015] 使用方法：患病水貂每日肌肉注射本发明注射液1次，每次注射2ml，5日为一个疗 程。
[0016] 本发明所选取原料具有以下特性：
[0017] 椿皮：性寒，味苦、涩，具有清热燥湿，收敛止带，止泻，止血之功效，常用于赤白带 下，湿热泻痢，久泻久痢，便血，崩漏；
[0018] 菠萝根叶：消食和胃，止泻，主夏日暑泻，消化不良，胃脘胀痛；
[0019] 香茅：辛，温，祛风除湿，消肿止痛，用于风湿疼痛，头痛，胃痛，腹痛，腹泻，月经不 调，产后水肿，跌打淤血肿痛；
[0020] 黄花败酱草:清热解毒，凉血，消痈排脓，祛瘀止痛，用于肠痈，肺痈高热，咳吐脓 血，热毒疮疔，疮疖痛肿，胸腹疼痛，阑尾炎，肠炎、痢疾，产后腹痛，痛经，败酱草有抗病毒， 抗肿瘤，利胆，利尿，促肝细胞再生等作用，败酱有一定的抗菌作用，对内毒素有明显的减毒 作用，黄花败酱具有明显的镇静、催眠作用，比西方古典的镇静剂缬草强一倍以上，其镇静、 催眠功效的有效成分主要为挥发油，败酱烯、异败酱烯，败酱皂苷也有镇静、催眠作用，黄花 败酱有显著的升高白细胞和增强巨噬细胞的吞噬作用；
[0021] 虎杖:味微苦，性微寒，具有利湿退黄，清热解毒，散瘀止痛，止咳化痰的功效，用于 湿热黄疸，淋浊，带下，风湿痹痛，痈肿疮毒，水火烫伤，经闭，症瘕，趺打损伤，肺热咳嗽，虎 杖煎液对金黄色葡萄球菌、卡他球菌、甲型或乙型链球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌有抑制作用；
[0022] 大蓟根：甘，凉，凉血止血，散瘀消肿，主治衄血，咯血，吐血，尿血，功能性子宫出 血，产后出血，肝炎，肾炎，乳腺炎，跌打损伤，大蓟具有抗菌作用，体外实验大蓟根煎剂或全 草蒸馏液，在1:4000浓度时能抑制人型结核杆菌的生长，本品对脑膜炎球菌、白喉杆菌均有 抑制作用；
[0023] 野菊花:味苦、辛、凉，清热解毒，疏风散热，散瘀，明目，降血压，防治流行性脑脊髓 膜炎，预防流行性感冒、感冒，治疗高血压、肝炎、痢疾、痈疖疗疮都有明显效果，野菊花含菊 醇、野菊花内酯、氨基酸、微量元素以及樟烯、樟脑、柠檬烯等多种活性成分，这些物质对常 见的流感病毒、金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌等十分有效；
[0024] 全栝楼:甘、微苦、寒，有解热止渴、利尿、镇咳祛痰等作用，在体外对大肠杆菌、宋 内氏痢疾杆菌、变形杆菌等有某些抑制作用；
[0025] 连翘:清热解毒，消肿散结，疏散风热，现代医学研究证实，连翘浓缩煎剂在体外有 抗菌作用，可抑制伤寒杆菌、副伤寒杆菌、大肠杆菌、痢疾杆菌、白喉杆菌及霍乱弧菌、葡萄 球菌、链球菌等；
[0026]大蒜:温，辛、甘，温中健胃，消食理气，解毒杀虫，消肿止痛，止泻止痢，治肺，驱虫， 还有温脾暖胃，治痈疽肿毒，白秃癣疮，痢疾泄泻，肺痨顿咳，蛔虫蛲虫，饮食积滞，脘腹冷 痛，水肿胀满，大蒜中含硫化合物具有奇强的抗菌消炎作用，对多种球菌、杆菌、真菌和病毒 等均有抑制和杀灭作用，是当前发现的天然植物中抗菌作用最强的一种，大蒜所含的大蒜 素与维生素 Bl结合在一起，能很好的发挥消除疲劳、恢复体力的作用；
[0027] 山楂：山楂含丰富的维生素、山楂酸、柠檬酸、黄酮类等，能生津止渴，亦可入药，酸 甘，微温，消食健胃，行气散瘀，驱绦虫，治肉食积滞，癥瘕，痰饮，吞酸，肠风，腰痛，恶露不 尽，小儿乳食停滞，胃烷胀满，泻痢腹痛，瘀血经闭，产后瘀阻，心腹刺痛，疝气疼痛，高血脂 症，山楂对痢疾杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌、绿脓杆菌等有抗菌作用；
[0028] 马齿苋:性寒，味甘酸，入心、肝、脾、大肠经，具有收湿止痒、清热消肿、清热解毒， 利水去湿，散血消肿，除尘杀菌，消炎止痛，止血凉血的作用，马齿苋对痢疾杆菌、伤寒杆菌 和大肠杆菌有较强的抑制作用，可用于各种炎症的辅助治疗，素有"天然抗生素"之称，同时 马齿苋还富含维生素 C，维生素 C具有很好的抗氧化作用可以美白滋养皮肤，现代医学发现， 马齿苋有较高的营养价值和药用价值，除了含有常规的蛋白质、维生素和矿物质等营养元 素外，马齿苋还含有独特的生物活性成分，能够增强人体上皮细胞的活性，有助于促进溃疡 而的愈合；
[0029] 车前子:甘，寒，利水，清热，明目，祛痰，治小便不通，淋浊，带下，尿血，暑湿泻痢， 咳嗽多痰，湿痹，目赤障翳，车前子含多量黏液，黏液中含酸性黏多糖车前聚糖、维生素 A、 BI;
[0030] 白芷:祛风散寒，通窍止痛，消肿排脓，燥湿止带，利血脉，祛风散寒，除湿通络，现 代医学研究证实，白芷对大肠杆菌、痢疾杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、绿脓杆菌、 霍乱弧菌、人型结核杆菌等均有抑制作用；
[0031] 扛板归：酸苦，平，利水消肿，清热，活血，解毒，治水肿，黄疸，泄泻，疟疾，痢疾，百 日咳，淋池，丹毒，瘰疬，湿疹，挤癣；
[0032] 黑枸杞:味甘、性平，藏医用于治疗心热病、心脏病、降低胆固醇、兴奋大脑神经、增 强免疫功能、防治癌症、抗衰老、美容养颜、月经不调、停经等且药效显著，且富含蛋白质、月旨 肪、糖类、游离氨基酸、有机酸、矿物质、微量元素、生物碱、维生素 C、B1、B2、钙、镁、铜、锌、 锰、铁、铅、镍、镉、钴、铬、钾、钠等各种营养成分，黑枸杞富含原花青素，是目前国际上公认 的清除人体内自由基最有效的天然抗氧化剂，原花青素可以强化毛细血管、动脉与静脉血 管，它有消肿化淤的功效，毛细血管的阻力减少和渗透性改善，使细胞更容易吸收养分与排 除废物，原花青素可以清除细胞膜中水溶性和脂溶性的自由基，因此，抑制了释放某些酶去 伤害毛细血管壁的过程，原花青素抑制产生组胺需要的酶，防止生成组胺，从而减轻发炎；
[0033] 苦参：味苦，性寒，清热燥湿，抗菌杀虫，利尿，用于热痢，便血，黄疸尿闭，赤白带 下，阴肿阴痒，湿疹，湿疮，皮肤瘙痒，疥癣麻风，外治滴虫性阴道炎；
[0034] 炙甘草:含有甘草甜素、甘草次酸、甘草多糖等多种化学成分，具有抗炎及抗变态 反应作用，可调节机体免疫功能，抗肿瘤和止痛作用，因此炙甘草的主要功效是和中缓急， 润肺，解毒，调和诸药。
[0035] 水貂大肠杆菌病为一种急性传染病，是由大肠杆菌引起的。本病多为自发感染，BP 肠道内的大肠杆菌在水貂机体抵抗力下降时会迅速繁殖，产生毒力，引发致病。水貂若食物 摄入营养不足，则体质较弱，抵抗力较差，很容易患大肠杆菌病，严重的甚至会引起幼貂死 亡。采用抗生素类药物治疗该病，不仅会引起抗药性，且损害幼貂自身免疫力，愈后水貂更 易感应各种传染疾病，不利于水貂健康生长发育，本发明的肌肉注射液采用纯中草药制剂， 安全无毒副作用，不易产生耐药性，原料中，椿皮、黄花败酱草、虎杖、大蓟根、野菊花、全栝 楼、连翘、马齿苋、车前子合用清热解毒的作用，清除体内湿热瘀毒有效调节机体;黄花败酱 草、虎杖、大蓟根、野菊花、全栝楼、连翘、大蒜、山楂、马齿苋、白芷、苦参合用可以起到很好 的抗菌抑菌消炎作用，可有效杀灭致病菌，防治该病;椿皮、菠萝根叶、香茅、黄花败酱草、大 蒜、山楂、扛板归合用可以有效缓解泻痢症状，减轻患貂痛苦；山楂和大蒜可以起到开胃健 脾的作用，改善水貂厌食症状，促进其饮食，以加快水貂摄入营养，提供自身免疫力，促进康 复，黄花败酱草、全栝楼、马齿苋、车前子、扛板归、苦参合用可以起到排毒利尿的作用，可以 有效帮助肾脏代谢，促进毒素排出，减轻肾脏负担，促进水貂体内有害物质的排出，加快水 貂康复;炙甘草不仅能够起到抗菌消炎的作用，还可以起到调和诸药，促进药效的作用。所 选原料配伍得当，安全无毒副作用，不会产生抗药性，各原料协同作用，具有清热解毒、抗菌 消炎、止泻痢、开胃健脾、排毒利尿的功效，可以有效缓解水貂病症，治疗大肠杆菌病。发明 人还认为，治疗该病的重点并不简单的限于根据病症对症下药治疗该病，还在于增强水貂 体质，提高其自身免疫力，以增强其抗病能力。所选原料营养丰富，香茅、大蒜、山楂、马齿苋 鲜品、车前子、黑枸杞等富含多种蛋白质、氨基酸、维生素、矿物质和微量元素等营养物质， 可充分补充患貂身体所需营养，增强患貂体质，提高其自身免疫力，以增强其抗病能力。对 于有厌食症状的患貂，相较于口服制剂，注射剂更加方便使用，可以更好的补充水貂所需营 养，通过补充水貂机体缺乏的维生素 A可提高呼吸、消化等的免疫力，同时补充维生素 E可提 高机体抗感染的能力，还可以补充维生素 C使机体组织变得紧密从而可以抵御外邪增加抵 抗力的，大蒜所含的大蒜素与车前子、黑枸杞富含的B族维生素结合在一起，能很好的发挥 消除疲劳、恢复体力的作用，以增强水貂体质，增强其抵抗力，促进身体恢复。
[0036] 本发明的有益效果为：提供一种治疗水貂大肠杆菌病的肌肉注射液及其制备方 法。该肌肉注射液采用天然食材和中草药制成，安全无副作用，使用方便，可取得较好的杀 菌消炎效果，同时补充营养，增强水貂自身免疫力，快速有效治疗该病。具体而言：
[0037] (1)本发明的肌肉注射液采用纯中草药制剂，安全无毒副作用，不易产生耐药性， 原料中，椿皮、黄花败酱草、虎杖、大蓟根、野菊花、全栝楼、连翘、马齿苋、车前子合用清热解 毒的作用，清除体内湿热瘀毒有效调节机体;黄花败酱草、虎杖、大蓟根、野菊花、全栝楼、连 翘、大蒜、山楂、马齿苋、白芷、苦参合用可以起到很好的抗菌抑菌消炎作用，可有效杀灭致 病菌，防治该病;椿皮、菠萝根叶、香茅、黄花败酱草、大蒜、山楂、扛板归合用可以有效缓解 泻痢症状，减轻患貂痛苦；山楂和大蒜可以起到开胃健脾的作用，改善水貂厌食症状，促进 其饮食，以加快水貂摄入营养，提供自身免疫力，促进康复，黄花败酱草、全栝楼、马齿苋、车 前子、扛板归、苦参合用可以起到排毒利尿的作用，可以有效帮助肾脏代谢，促进毒素排出， 减轻肾脏负担，促进水貂体内有害物质的排出，加快水貂康复;炙甘草不仅能够起到抗菌消 炎的作用，还可以起到调和诸药，促进药效的作用。所选原料配伍得当，安全无毒副作用，不 会产生抗药性，各原料协同作用，具有清热解毒、抗菌消炎、止泻痢、开胃健脾、排毒利尿的 功效，可以有效缓解水貂病症，治疗大肠杆菌病。
[0038] (2)发明人还认为，治疗该病的重点并不简单的限于根据病症对症下药治疗该病， 还在于增强水貂体质，提高其自身免疫力，以增强其抗病能力。所选原料营养丰富，香茅、大 蒜、山楂、马齿苋鲜品、车前子、黑枸杞等富含多种蛋白质、氨基酸、维生素、矿物质和微量元 素等营养物质，可充分补充患貂身体所需营养，增强患貂体质，提高其自身免疫力，以增强 其抗病能力。对于有厌食症状的患貂，相较于口服制剂，注射剂更加方便使用，可以更好的 补充水貂所需营养，通过补充水貂机体缺乏的维生素 A可提高呼吸、消化等的免疫力，同时 补充维生素 E可提高机体抗感染的能力，还可以补充维生素 C使机体组织变得紧密从而可以 抵御外邪增加抵抗力的，大蒜所含的大蒜素与车前子、黑枸杞富含的B族维生素结合在一 起，能很好的发挥消除疲劳、恢复体力的作用，以增强水貂体质，增强其抵抗力，促进身体恢 复。
【具体实施方式】
[0039]根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实 施例所描述的具体的物料配比、工艺条件及其结果仅用于说明本发明而不应当也不会限制 权利要求书中所详细描述的本发明。
[0040] 实施例1
[00411 一种治疗水貂大肠杆菌病的肌肉注射液，1000 ml注射液中包含20g甘露醇，60g氯 化钠，60g中药提取物;制成所述中药提取物的原料组成及重量份数为:椿皮8份，菠萝根叶6 份，香茅10份，黄花败酱草10份，虎杖5份，大蓟根4份，野菊花10份，全栝楼4份，连翘9份，大 蒜10份，山楂9份，马齿苋鲜品12份，车前子6份，白芷9份，杜板归4份，黑枸杞5份，苦参10份， 炙甘草4份。
[0042] 该肌肉注射液的制备方法，包括以下步骤：
[0043] (1)椿皮、菠萝根叶、香茅、黄花败酱草、虎杖、大蓟根、野菊花、全栝楼、连翘、大蒜、 山楂、车前子、白、杜板归、苦参、炙甘草粉碎得1 〇〇目混合粉末，所得混合粉末加入总质量 倍数5倍的水浸泡1小时，文火煎煮1小时，煎煮后过500目过滤网得滤液，再次加入混合粉末 总质量倍数5倍的水浸泡0.5小时，文火煎煮1小时后过500目过滤网得滤液，合并两次所得 滤液冷却至室温，备用；
[0044] (2)马齿苋鲜品、大蒜、黑枸杞洗净后加入步骤（1)所得滤液浸泡1小时后研磨成 浆，静置3小时后过200目过滤网得滤液；
[0045] (3)步骤(2)所得滤液低温浓缩(30°C以下）至相对密度为1.32±0.02(30°C)的稠 膏，所得稠膏真空冷冻干燥，所得固体超微粉碎得1000目粉末即为中药提取物；
[0046] (4)称取适量的步骤（3)所得的中药提取物，加入20g甘露醇和60g氯化钠，加入 200ml注射用水搅拌使其溶解，进一步加注射用水至混合溶液总体积1000ml，将混合溶液加 入匀质机中进行匀质，匀质温度15±2°C，时间13±2分钟得匀质液体，调节pH值为7.0,再进 一步用0.22μπι滤器精滤得滤液；
[0047] (5)对步骤(4)所得滤液紫外灭菌25 ± 5分钟，将所得液体分装成2ml/支的肌肉注 射液即得。
[0048]使用方法：患病水貂每日肌肉注射本发明注射液1次，每次注射2ml，5日为一个疗 程。
[0049] 实施例2
[0050] 一种治疗水貂大肠杆菌病的肌肉注射液，1000 ml注射液中包含20g甘露醇，60g氯 化钠，65g中药提取物;制成所述中药提取物的原料组成及重量份数为:椿皮10份，菠萝根叶 12份，香茅13份，黄花败酱草12份，虎杖7份，大蓟根5份，野菊花12份，全栝楼6份，连翘10份， 大蒜12份，山楂11份，马齿苋鲜品14份，车前子7份，白芷10份，杜板归5份，黑枸杞7份，苦参 12份，炙甘草6份。
[0051 ]实施例2的肌肉注射液的制备方法和使用方法与实施例1相同。
[0052] 实施例3
[0053] 4.一种治疗水貂大肠杆菌病的肌肉注射液，1000 ml注射液中包含20g甘露醇，60g 氯化钠，70g中药提取物;制成所述中药提取物的原料组成及重量份数为:椿皮12份，菠萝根 叶15份，香茅16份，黄花败酱草15份，虎杖9份，大蓟根6份，野菊花15份，全栝楼8份，连翘12 份，大蒜15份，山楂13份，马齿苋鲜品16份，车前子9份，白芷12份，杠板归6份，黑枸杞10份， 苦参14份，炙甘草7份。
[0054]实施例3的肌肉注射液的制备方法和使用方法与实施例1相同。
[0055]实施例4抗菌实验
[0056] 1、实验菌种:大肠埃希氏菌(ATCC25922)
[0057] 2、菌种培养基:营养琼脂培养基和营养肉汤培养基。
[0058] 3、抑菌实验分三个实验组和一个对照组，实验组分别使用实施例1至3的肌肉注射 液，其中，实验组A为实施例1的肌肉注射液，实验组B为实施例2的肌肉注射液，实验组C为实 施例3的肌肉注射液，对照组使用生理盐水。
[0059] 4、具体实验步骤：
[0060] (1)药敏感片制备:双圈牌定性滤纸用打孔器制成直径6_的圆纸片放入清洁干燥 的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎，121°C高压灭菌30min，再经100°C烘干，密闭保存 备用。在无菌条件下分别将纸片浸泡于实施例1至3的肌肉注射液和生理盐水中2h，待液体 完全被纸片吸收后，取出滤纸片，室温下晾干制成药敏片备用，每种液体各制备5片药敏感 片；
[0061 ] (2)制备菌液:大肠埃希氏菌(ATCC25922)置于IOml营养肉汤培养基中，37°C培养 18h;取培养液Iml加入9ml的0.9%无菌氯化钠溶液，采用10倍递增稀释法，将菌液分别稀释 至105~106cfu/ml，备用；
[0062] (3)将上述步骤(2)制得的试验菌液均匀接种于甘露醇氯化钠琼脂平板上，室温下 静置5min，将步骤(1)中制得的20片药敏感片平铺在接种的琼脂平板上，将平板倒置放入培 养箱中37°C培养24h后，测量各药敏片的抑菌圈直径(mm)，计算各组的抑菌圈直径平均值， 以上操作均为无菌操作。
[0063] 5、试验观察测量：
[0064]观察:无抑菌圈以表示；
[0065] 抑菌圈直径< IOmm为轻度抑菌，以"+"表示；
[0066] 抑菌圈直径10~14mm为中度抑菌，以"++"表示；
[0067] 抑菌圈直径> 14mm为高度抑菌，以"+++"表示；
[0069] 实验结果表明，本发明的饲料添加剂对水貂大肠杆菌病的致病菌具有较强的的抑 制作用，可起到较好的杀菌抑菌，可起到防治该病的效果。
[0070] 实施例5应用实施例
[0071]为了验证本发明的肌肉注射液的疗效，选择了 40只患有大肠杆菌病的水貂进行试 验，患貂表现为食欲不振，精神不佳，体温升高，鼻镜干燥，粪便稀软呈黄色或灰色，多少出 现下痢，水样腹泻及血便，肛门周围粪。将患貂随机均分为3个实验组和1个对照组，实验组1 至3分别使用实施例1至3的肌肉注射液，每日肌肉注射本发明注射液1次，每次注射2ml，5日 为一个疗程，对照组水貂注射等量的生理盐水，5天观察药物作用效果，疗效评价标准如下： [0072]痊愈:临床症状消失，采食和精神恢复正常；
[0073] 好转:临床症状减轻，食欲和精神有所恢复；
[0074] 无效:病症无变化，或加重，或幼貂死亡。
[0075]实验结果统计如下：
[0078] 由以上实验结果可以看出，本发明的肌肉注射液可以有效治疗水貂大肠杆菌病， 所有患貂在使用期间均无不良反应，即该肌肉注射液配方安全有效，无毒副作用。
[0079] 以上实施方式只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的 人了解本
【发明内容】
并加以实施，并不能以此限制本发明的保护范围，凡根据本发明精神实 质所做的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围内。
【主权项】
1. 一种治疗水貂大肠杆菌病的肌肉注射液，其特征在于：1000ml注射液中包含20g甘露 醇，60g氯化钠，60-70g中药提取物;制成所述中药提取物的原料组成及重量份数为:椿皮δ-?〗 份 ，菠萝根叶 6-15 份 ，香茅 10-16 份 ，黄花败酱草 10-15 份，虎杖 5-9 份， 大蓟根 4-6 份，野菊 花10-15份，全栝楼4-8份，连翘9-12份，大蒜10-15份，山楂9-13份，马齿苋鲜品12-16份，车 前子6-9份，白芷9-12份，杠板归4-6份，黑枸杞5-10份，苦参10-14份，炙甘草4-7份。2. 如权利要求1所述的一种治疗水貂大肠杆菌病的肌肉注射液，其特征在于：1000ml注 射液中包含20g甘露醇，60g氯化钠，60g中药提取物；制成所述中药提取物的原料组成及重 量份数为:椿皮8份，菠萝根叶6份，香茅10份，黄花败酱草10份，虎杖5份，大蓟根4份，野菊花 10份，全栝楼4份，连翘9份，大蒜10份，山楂9份，马齿苋鲜品12份，车前子6份，白芷9份，杜板 归4份，黑枸杞5份，苦参10份，炙甘草4份。3. 如权利要求1所述的一种治疗水貂大肠杆菌病的肌肉注射液，其特征在于：1000ml注 射液中包含20g甘露醇，60g氯化钠，65g中药提取物；制成所述中药提取物的原料组成及重 量份数为:椿皮10份，菠萝根叶12份，香茅13份，黄花败酱草12份，虎杖7份，大蓟根5份，野菊 花12份，全栝楼6份，连翘10份，大蒜12份，山楂11份，马齿苋鲜品14份，车前子7份，白芷10 份，杠板归5份，黑枸杞7份，苦参12份，炙甘草6份。4. 如权利要求1所述的一种治疗水貂大肠杆菌病的肌肉注射液，其特征在于：1000ml注 射液中包含20g甘露醇，60g氯化钠，70g中药提取物；制成所述中药提取物的原料组成及重 量份数为:椿皮12份，菠萝根叶15份，香茅16份，黄花败酱草15份，虎杖9份，大蓟根6份，野菊 花15份，全栝楼8份，连翘12份，大蒜15份，山楂13份，马齿苋鲜品16份，车前子9份，白芷12 份，杠板归6份，黑枸杞10份，苦参14份，炙甘草7份。5. 如权利要求1所述的一种治疗水貂大肠杆菌病的肌肉注射液，其特征在于，每只患病 水貂每日需肌肉注射所述肌肉注射液2ml。6. 如权利要求1至5任一种所述的一种治疗水貂大肠杆菌病的肌肉注射液的制备方法， 其特征在于，包括以下步骤： (1) 椿皮、菠萝根叶、香茅、黄花败酱草、虎杖、大蓟根、野菊花、全栝楼、连翘、大蒜、山 楂、车前子、白、杜板归、苦参、炙甘草粉碎得1〇〇目混合粉末，所得混合粉末加入总质量倍 数5倍的水浸泡1小时，文火煎煮1小时，煎煮后过500目过滤网得滤液，再次加入混合粉末总 质量倍数5倍的水浸泡0.5小时，文火煎煮1小时后过500目过滤网得滤液，合并两次所得滤 液冷却至室温，备用； (2) 马齿苋鲜品、大蒜、黑枸杞洗净后加入步骤（1)所得滤液浸泡1小时后研磨成浆，静 置3小时后过200目过滤网得滤液； (3) 步骤(2)所得滤液低温浓缩(30°C以下）至相对密度为1.32±0.02(30°C)的稠膏，所 得稠膏真空冷冻干燥，所得固体超微粉碎得1000目粉末即为中药提取物； (4) 称取适量的步骤(3)所得的中药提取物，加入20g甘露醇和60g氯化钠，加入200ml注 射用水搅拌使其溶解，进一步加注射用水至混合溶液总体积l〇〇〇ml，将混合溶液加入匀质 机中进行勾质，勾质温度15 ± 2 °C，时间13 ± 2分钟得勾质液体，调节pH值为7.0，再进一步用 0.22μπι滤器精滤得滤液； (5) 对步骤(4)所得滤液紫外灭菌25 ± 5分钟，将所得液体分装成2ml/支的肌肉注射液 即得。
【文档编号】A61K9/08GK106075117SQ201610494729
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月29日
【发明人】袁国防, 张丽丽, 李莹, 施文斌
【申请人】青岛海之源智能技术有限公司