一种依托咪酯有关物质的测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及测定药物有关物质的技术领域，特别设及一种依托咪醋有关物质的测 定方法。
【背景技术】
[0002] 依托咪醋是一种催眠性静脉全麻药，属于咪挫类衍生物，是咪挫的哲化盐，分子式 为。化6馬〇2,分子量为244. 29,安全性大，是麻醉诱导常用的药物之一，依托咪醋的临床应 用已有30年的历史。
[0003] 依托咪醋常采用制剂的形式，例如依托咪醋注射液，依托咪醋在注射液中容易降 解产生杂质（有关物质）依托咪酸，在2010版中国药典中记载了依托咪醋有关物质的测定 方法，其采用了高效液相色谱法，其中依托咪酸的校正因子为1. 59,依托咪酸出峰早，基本 与溶剂峰重合，因此无法测定依托咪醋中的有关物质依托咪酸。
【发明内容】
[0004] 为了解决现有技术中存在的上述缺陷，本发明提供一种依托咪醋有关物质的测定 方法，采用该方法可W很好地将依托咪醋中的有关物质依托咪酸峰和溶剂峰分开，进而可 W获得依托咪酸的含量。
[0005] 本发明实施例首先提供一种依托咪醋有关物质的测定方法，所述方法采用高效液 相色谱法进行测定，所述高效液相色谱法的色谱条件包括：
[0006] 色谱柱采用十八烧基娃烧键合娃胶作为填充剂；
[0007] 流动相为磯酸盐缓冲液和己膳的混合溶液，其中，磯酸盐缓冲液的抑值为7. 8? 8. 2,磯酸盐缓冲液和己膳的体积比为50 ; 50?90 ; 10 ;
[0008] 检测波长为235nm，流速为1. Oml/min，柱温为29°C?3TC。
[0009] 在本发明技术方案中，对高效液相色谱条件进行优化，使得在色谱中的依托咪酸 峰和溶剂峰达到了较好的分离，并且依托咪酸峰也与其它杂质峰和主峰可W较好地分离， 进而可W通过计算依托咪酸的峰面积来得到依托咪醋中依托咪酸的含量。
[0010] 在本发明技术方案中，不对依托咪醋的形式进行限定，只要依托咪醋符合色谱条 件的依托咪醋原料和制剂都可W使用，依托咪醋制剂可W为依托咪醋注射液、依托咪醋脂 肪乳注射液。
[0011] 优选的，所述方法包括：
[001引取依托咪醋脂原料或制剂采用25 %的己膳水溶液稀释为含依托咪醋0. 5mg/ml的 溶液，作为供试品溶液；
[0013] 取所述供试品溶液采用30%的己膳水溶液稀释，作为对照溶液；
[0014] 取依托咪酸、美托咪醋和依托咪醋采用30%的己膳水溶液稀释为含0. 02mg/ml的 依托咪酸、0. 02mg/ml的美托咪醋和0. 02mg/ml的依托咪醋的混合溶液，作为系统适用性试 验溶液；
[0015] 采用高效液相色谱法分别对所述系统适用性试验溶液、对照溶液和供试品溶液进 行测定，记录色谱图，所述高效液相色谱法的色谱条件包括：
[0016] 色谱柱采用十八烧基娃烧键合娃胶作为填充剂；
[0017] 流动相为磯酸盐缓冲液和己膳的混合溶液，其中，磯酸盐缓冲液的抑值为7. 8? 8. 2,磯酸盐缓冲液和己膳的体积比为50 ; 50?90 ; 10 ;
[0018] 按照梯度洗脱，检测波长为235皿，流速为1. Oml/min，柱温为30°C。
[0019] 优选的，所述依托咪醋制剂为依托咪醋脂肪乳注射液。由于依托咪醋常W依托咪 醋脂肪乳注射液的形式存在，并且在依托咪醋脂肪乳注射液中依托咪醋易降解生成依托咪 酸杂质，因此，本发明的依托咪醋有关物质的测定方法特别适合应用于依托咪醋脂肪乳注 射液有关物质的测定中。
[0020] 优选的，所述方法包括：
[0021] 取依托咪醋脂肪乳注射液5ml置于10ml量瓶中于冰浴中放置5分钟，加入冰浴过 的己膳稀释至刻度，剧烈振摇，先用滤纸过滤再用0. 45 y m的滤膜过滤，取续滤液5ml加水 5ml摇匀，作为供试品溶液；
[0022] 精密量取1ml供试品溶液置于100ml量瓶中，用30%的己膳水溶液稀释至刻度，摇 匀，作为对照溶液；
[0023] 取依托咪酸、美托咪醋和依托咪醋，加30 %的己膳水溶液溶解并稀释成含 0. 02mg/ml的依托咪酸、0. 02mg/ml的美托咪醋和0. 02mg/ml的依托咪醋的混合溶液，作为 系统适用性试验溶液；
[0024] 依次取10 y 1的系统适用性试验溶液、10 y 1的供试品溶液和10 y 1的对照溶液， 分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图，其中，所述高效液相色谱的色谱条件包括；色谱柱 采用十八烧基娃烧键合娃胶为填充剂；流动相为磯酸盐缓冲液和己膳的混合溶液，其中，磯 酸盐缓冲液的抑值为8. 0,按照梯度洗脱，0?5分钟内磯酸盐缓冲液和己膳的体积比为由 90 ;10过渡至50 ;50,5分钟W后保持磯酸盐缓冲液和己膳的体积比为50 ;50,保留时间不 小于15分钟；检测波长为235皿，流速为1. Oml/min，柱温为30°C。
[0025] 优选的，所述磯酸盐缓冲液的制作方法包括；取磯酸二氨钟6. 8g与氨氧化钢 1. 87g，加1000ml水溶解，采用磯酸或氨氧化钢调节抑值为7. 8?8. 2。
【附图说明】
[0026] 图1为采用本发明的依托咪醋有关物质的测定方法测定的未破坏的依托咪醋色 谱图；
[0027] 图2为采用本发明的依托咪醋有关物质的测定方法测定的光破坏的依托咪醋色 谱图；
[002引图3为采用本发明的依托咪醋有关物质的测定方法测定的氧破坏的依托咪醋色 谱图；
[0029] 图4为采用本发明的依托咪醋有关物质的测定方法测定的酸破坏的依托咪醋色 谱图；
[0030] 图5为采用本发明的依托咪醋有关物质的测定方法测定的碱破坏的依托咪醋色 谱图；
[0031] 图6为采用本发明的依托咪醋有关物质的测定方法测定的高温破坏的依托咪醋 色谱图；
[0032] 图7为图4所示的色谱图的未知杂质1的紫外扫描图；
[0033] 图8为图1所示的色谱图的依托咪酸的紫外扫描图；
[0034] 图9为图5所示的色谱图的未知杂质2的紫外扫描图；
[0035] 图10为图1所示的色谱图的美托咪醋的紫外扫描图；
[0036] 图11为图1所示的色谱图的依托咪醋的紫外扫描图；
[0037] 图12为采用中国药典的依托咪醋有关物质的测定方法测定的系统适用性试验溶 液的色谱图；
[003引图13为采用中国药典的依托咪醋有关物质的测定方法测定的供试品溶液的色谱 图；
[0039] 图14为采用中国药典的依托咪醋有关物质的测定方法测定的对照溶液的色谱 图；
[0040] 图15为采用英国药典的依托咪醋有关物质的测定方法测定的空针的色谱图；
[0041] 图16为采用英国药典的依托咪醋有关物质的测定方法测定的系统适用性试验溶 液的色谱图；
[0042] 图17为采用英国药典的依托咪醋有关物质的测定方法测定的供试品溶液的色谱 图；
[0043] 图18为采用英国药典的依托咪醋有关物质的测定方法测定的对照溶液的色谱 图；
[0044] 图19为采用美国药典的依托咪醋有关物质的测定方法测定的系统适用性试验溶 液的色谱图；
[0045] 图20为采用美国药典的依托咪醋有关物质的测定方法测定的供试品溶液的色谱 图；
[0046] 图21为采用美国药典的依托咪醋有关物质的测定方法测定的对照溶液的色谱 图；
[0047] 图22为采用本发明的依托咪醋有关物质的测定方法测定的系统适用性试验溶液 的色谱图；
[0048] 图23为采用本发明的依托咪醋有关物质的测定方法测定的供试品溶液的色谱 图；
[0049] 图24为采用本发明的依托咪醋有关物质的测定方法测定的对照溶液的色谱图。
【具体实施方式】
[0050] 为了测定依托