一种竹材滑走切片染色制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种竹材滑走切片制作方法，特别涉及一种竹材滑走切片染色制作方法。
【背景技术】
[0002]现有技术下，为了观察竹材的组织结构，需要对竹材进行切片染色，传统的切片制作染色方法有以下两种:
[0003]1、直接切片染色:
[0004]1.1、切片准备。准备好软化的木材或植物枝条小段、培养皿、毛笔、切片机、切片刀等。
[0005]1.2、操作准备。软化材料用湿润的棉花固定在切片机的夹物部上进行切片。切一片后，用毛笔在材料上和刀刃上滴加蒸馏水，以提高切片效果。将切好的切片，用毛笔移入水中，或者70 %的乙醇中保存。
[0006]1.3、脱水、染色、透明与封片，切片按照番红-固绿复染的染色程序进行染色、脱水、透明与封片。
[0007]2、聚乙二醇包埋切片:
[0008]2.1、将植物材料投入20%的聚乙二醇2000，室温下放置一昼夜，移入55-60°C的温箱内放置一昼夜。再将植物材料移入已预放在温箱中的纯聚乙二醇浸泡。一昼夜后换一次纯聚乙二醇，再过1-2天后取出，室温下迅速凝固。不用的聚乙二醇移出温箱，冷却凝固后保存。
[0009]2.2、切片。
[0010]2.3、水洗、染色、脱水、透明、封片。
[0011]成熟的竹材由于材质较硬，极难切片，而且易碎。传统的切片主要是将竹材用甘油软化剂(50%乙醇:甘油=1:1)软化后，然后直接使用滑走切片进行切片，或者软化后使用聚乙二醇浸透，然后直接进行切片。切出的切片卷缩易碎，而且染色时需要滴染，非常麻烦，难以像石蜡切片那样进行批量染色，制片效率很低。
【发明内容】
[0012]为了解决现有技术的问题，本发明提供了一种竹材滑走切片染色制作方法，其能够高效率的制作滑走切片，精简了实验步骤，制作滑走切片时能够极大程度减少切片的破碎，维持切片的完整性，同时，能够像石蜡切片一样能够批量对染，而不需滴染，染色方便，具有较高的制作效率。
[0013]本发明所采用的技术方案如下:
[0014]一种竹材滑走切片染色制作方法，包括以下步骤:
[0015]A、待切竹材软化后，将一片透明胶带贴到待切竹材的横切面上；
[0016]B、平行所述的透明胶带对竹材进行滑走切片动作，切下竹材切片；
[0017]C、将切下的切片带有透明胶带的一面用双面胶粘贴在载玻片上；
[0018]D、在载玻片的两端放置各放置一段棉绳，所述的竹材切片位于两段棉绳之间；
[0019]E、使用另外一张载玻片覆盖在原载玻片上，使其将竹材切片及棉绳压住，并使用胶带固定住两个载玻片；
[0020]F、将载玻片放置在染色小筐内进行染色；
[0021]G、取出染色好切片，树胶封片，贴上标签、压片。
[0022]对载玻片进行染色的具体步骤是:
[0023]Fl、将盛有载玻片的小筐置于水中30分钟，去除聚乙二醇；
[0024]F2、将小筐置于番红染色液中染色过夜，第二天在水中浸洗，取出后置于阿利新兰染色液中染色5-10min ；
[0025]F3、将染色好并脱水的载玻片移置于装有二甲苯的培养皿中；
[0026]F4、将载玻片上的胶带用刀片削开，使染色好的切片在二甲苯中散开。
[0027]步骤A中对待切竹材进行软化的具体步骤是:取2-3年生云南箭竹竹杆削成3-4cm长，横切面为的形状，然后投入50%的酒精:甘油=1:1的酒精甘油软化剂中，抽气直至其沉于底部，浸泡一个月。
[0028]番红染色液采用50%酒精配制的番红O。
[0029]本发明提供的技术方案带来的有益效果是:
[0030]1、采用透明胶带粘贴在竹子材料上，可以防止植物切片蜷缩，破碎。
[0031]2、将切片带有透明胶带的一面通过双面胶粘到载玻片上，再用另一张载玻片将其夹住，放置染色筐中，再垂直放入染色缸中进行染色。染色时间容易把握，染色比较均匀。且切片不易脱落导致损失。
[0032]综上，本发明的方法能够高效率的制作竹材滑走切片，精简了实验步骤，制作滑走切片时能够极大程度减少切片的破碎，维持切片的完整性。同时，能够像石蜡切片一样批量对染，而不需滴染，染色方便，具有较高的制作效率。
【具体实施方式】
[0033]为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施方式作进一步地详细描述。
[0034]本实施例是制作一种云南箭竹竹杆的滑走切片:
[0035]实验样品:取2-3年生云南箭竹竹杆削成长3-4cm，横切面为的形状，然后投入50%酒精:甘油=I:1的酒精甘油软化剂中，抽气直至其沉于底部，浸泡一个月直至软化切的动为止。
[0036]实验药品及配方:1、酒精甘油软化剂(50%酒精:甘油=1:1)。
[0037]2、番红酒精染色液酒精(50% )配制的1%番红O。
[0038]3、阿利新兰染色液 1%水溶性 Alcian Blue (Fluka 05500) ο
[0039]方法步骤:
[0040]1、样品采集、软化:取三年生新鲜竹杆，将选定部位快速切割为lcm*lcm*4cm大小的组织块，放入酒精甘油软化液中，抽气直至材料沉到瓶子底部。放置大约一个月左右用刀片可切的动为止。
[0041]2、包埋、切片:将软化好的样品用纸擦拭干净，浸入聚乙二醇(PEG6000)，60°C浸泡一周。之后取出冷却，即可滑走切片机切片。
[0042]3、将待切材料基部用纱布裹紧，用滑走切片夹物部夹紧，然后用滑走切片机将待切材料表面切平，然后用透明胶带粘贴切平的上表面。
[0043]4、调整切片厚度，然后滑动切片机的滑动块，一刀切下。切下的切片即粘附在透明胶带上。
[0044]5、在一张干净的载玻片上粘上1-2条双面胶，然后将多张切片的带有透明胶带的一侧，按照顺序贴附在载玻片的双面胶上。
[0045]6、在粘有切片的载玻片两侧放置2段棉绳，然后用另外一张载玻片覆盖其上，然后用透明胶带将其两端捆扎起来。
[0046]7、然后将载玻片置于染色筐中，置于蒸馏水中浸泡30min，以清除聚乙二醇。
[0047]8、将染色筐置于番红染色液中过夜，第二天在水中浸洗，取出后置于阿利新兰染色液中染色5-10min，
[0048]9、脱水至无水乙醇及二甲苯中。将载玻片二甲苯捞出，置于装有二甲苯的培养皿中，在培养皿中用刀片将透明胶带划开，染完色的切片即可在二甲苯中散开。
[0049]10、将切片捞至干净的载玻片上，滴上树胶封片，切片制作完毕。
[0050]以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种竹材滑走切片染色制作方法，包括以下步骤: A、待切竹材软化后，将一片透明胶带贴到待切竹材的横切面上； B、平行所述的透明胶带对竹材进行滑走切片动作，切下竹材切片； C、将切下的切片带有透明胶带的一面用双面胶粘贴在载玻片上； D、在载玻片的两端放置各放置一段棉绳，所述的竹材切片位于两段棉绳之间； E、使用另外一张载玻片覆盖在原载玻片上，使其将竹材切片及棉绳压住，并使用胶带固定住两个载玻片； F、将载玻片放置在染色小筐内进行染色； G、取出染色好切片，树胶封片，贴上标签、压片。
2.根据权利要求1所述的一种竹材滑走切片染色制作方法，其特征在于，所述的步骤F中，对载玻片进行染色的具体步骤是: Fl、将盛有载玻片的小筐置于水中30分钟，去除聚乙二醇； F2、将小筐置于番红染色液中染色过夜，第二天在水中浸洗，取出后置于阿利新兰染色液中染色5-10min ； F3、将染色好并脱水的载玻片移置于装有二甲苯的培养皿中； F4、将载玻片上的胶带用刀片削开，使染色好的切片在二甲苯中散开。
3.根据权利要求1或2所述的一种竹材滑走切片染色制作方法，其特征在于，步骤A中对待切竹材进行软化的具体步骤是:取2-3年生云南箭竹竹杆削成3-4cm长，横切面为lcm*lcm的形状，然后投入50%酒精:甘油=I:1的酒精甘油软化剂中，抽气直至其沉于底部，浸泡一个月。
4.根据权利要求1或2所述的一种竹材滑走切片染色制作方法，其特征在于，番红染色液采用50%酒精配制的番红O。
【专利摘要】本发明涉及一种竹材滑走切片制作方法，特别涉及一种竹材滑走切片染色制作方法。本发明方法通过采用透明胶带粘附在竹材切片上，然后通过双面胶粘在载玻片上，而能够使切片在染色缸中集中染色。既降低了切片的破碎率，并使显色过程更容易把握，且能多张切片集中染色，染色更加方便成功率更高。
【IPC分类】G01N1-28, G01N1-30
【公开号】CN104596815
【申请号】CN201410787719
【发明人】王曙光, 王雨珺, 丁雨龙, 林树燕, 普晓兰
【申请人】西南林业大学
【公开日】2015年5月6日
【申请日】2014年12月17日