食品中苏丹红染料残留的快速提取净化及检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种食品中有毒有害化学组分残留的测定方法，尤其涉及鸡蛋和辣椒 等食品中苏丹红染料残留的快速提取净化及检测方法。
【背景技术】
[0002] 苏丹红是一类人工合成的偶氮苯基萘酚工业染料，主要包括I、II、III和IV四种 类型，被大量用于机油、汽油蜡和鞋油等工业品中，还可以用于焰火礼花的着色。在食品的 加工过程中，为求制品色彩的艳丽或保持原有的色泽，借以改善食品的感官性状，增加人们 的食欲，常常会添加一些食用色素。1995年欧盟禁止将苏丹红（尤其是苏丹红I号）作为 食用色素添加到食品当中，对此我国也明文禁止。然而，近年来食品中频频检测出苏丹红， 如，2005年3月4日，亨氏辣椒酱在北京首次被检出含有苏丹红I号；不到1个月，在包括 肯德基等多家餐饮与食品公司的产品中相继检出含有苏丹红I号；苏丹红事件由此席卷全 中国，国家质检总局于2005年4月对全国可能含有苏丹红的食品进行专项检查后发现，共 有36家企业生产的88种食品及添加剂含有苏丹红；2007年1月，国家质检总局再次发布 苏丹红预警，25%辣椒制品因含有苏丹红而抽检不合格。上述种种事件给整个社会造成了 极其恶劣的影响，甚至造成了社会大众对食品安全的恐慌。因此，快速、准确、灵敏、简便的 测定食品中苏丹红的分析方法迫在眉睫。
[0003] 在苏丹红的检测中，由于食品样品基质复杂，需要选择合适的提取溶剂才能取得 满意的提取效果，尤其是鸡蛋、辣椒及其制品等食品。国家标准GB/T19681-2005推荐使用 正己烷作为提取溶剂，但实验发现提取效果不甚理想，尤其是苏丹红III和IV回收率较低 (〈70%)。申请号为201310031730. 3(公开号为CN103091423A)的中国发明专利《苏丹红 检测方法》提供了一种以乙腈为提取溶剂，经C18固相萃取小柱净化后采用液相色谱分析食 品中苏丹红染料的方法；该方法步骤简单、成本低廉，但由于液相色谱-紫外检测法的局限 性，其对食品中苏丹红残留分析存在灵敏度低、假阳性率高等不足，且该方法采用乙腈作为 提取溶剂，适用的食品类别少，尤其对于含大量油脂的辣椒油无法较好的进行提取。又如： 申请号为201210533392. 9 (公开号为CN102944639A)选择了甲醇、乙腈与异丙醇混合溶 液对红辣椒粉样品和番茄汁样品进行提取，然后采样用高效液相色谱-紫外检测仪进行测 定。同样地，该方法所采用的高效液相色谱-紫外检测仪具有灵敏度低、假阳性率高等缺 陷，同时样品基质单一，对公众关注的鸡蛋样品和辣椒油样品均未涉及，且该方法未经净化 直接测定，基质干扰大。
[0004] 因此，现有的应用于食品样品中苏丹红残留检测的方法存在许多不足，有待改进。
【发明内容】
[0005] 本发明所要解决的技术问题是针对现有技术而提供一种检测灵敏度高、准确性高 的食品中苏丹红染料残留的快速提取净化及检测方法，该方法尤其适用于鸡蛋、辣椒以及 辣椒油等食品中苏丹红染料的检测。
[0006] 本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种食品中苏丹红染料残留的快 速提取净化及检测方法，所述食品为鸡蛋、辣椒以及辣椒油中的一种，其特征在于包括以下 步骤：
[0007] 1?5g鸡蛋样品或辣椒样品干燥与粉碎后置于容器中，然后加入5?15mL体积比 为1:0. 5?10的乙腈-二氯甲烧混合液，超声提取1?lOmin，尚心取上清液，重复提取两 次，合并提取液，旋蒸浓缩至近干得提取物；用2?10mL正已烷将提取物复溶，通过固相萃 取小柱净化，收集洗脱液，氮吹至干，然后加入1?2mL叔丁基甲醚体积分数为10 %?60% 的叔丁基甲醚-甲醇混合溶液复溶，过〇. 22ym滤膜后制得净化液待测；
[0008] 或者，称取0. 5?1. 0g辣椒油样品，加入5?10mL二氯甲烷体积分数为1 %?5 % 的二氯甲烷-正己烷混合溶液，涡旋混合均匀，加入固相萃取小柱进行净化，收集洗脱液， 氮吹至干，然后加入lmL叔丁基甲醚体积分数为10%?40%的叔丁基甲醚-甲醇混合溶液 复溶，过0. 22ym滤膜后用超快速液相色谱-串联质谱（UFLC-MS/MS)检测。
[0009] 上述UFLC-MS/MS检测的检测条件如下：
[0010] 色谱柱：AgilentEclipsePlus018柱（lOOmmX2.lmm, 1. 8ym);
[0011] 流动相：〇. 1 %?1 %甲酸水溶液A，0. 1 %?1 %甲酸乙腈溶液B;
[0012] 柱温：40.0°C;
[0013] 流速：0? 45mL/min；
[0014] 进样量：5.0yL;
[0015] 梯度洗脱程序：0 ?2.Omin，10 % ?95 %B;2. 00 ?4. 50min，95 %B;4. 50 ? 4. 51min, 95%?10%B;4. 51 ?6. 50min，10%B;
[0016] 离子源：电喷雾离子源；
[0017] 扫描方式：正离子扫描方式（ESI+);
[0018] 定量检测方式：多反应检测模式（MRM);
[0019] 电喷雾电压：4500V;
[0020] 雾化器压力：344. 8kPa(5〇psi);
[0021] 气帘气压力：275. 9kPa(40.Opsi);
[0022] 碰撞气压力：41. 4kPa(6.Opsi);
[0023] 离子源温度：500°C;
[0024] 扫描时间：50ms;
[0025] 碰撞室出口电压：10. 0V;
[0026] 碰撞室入口电压：10. 0V。
[0027] 作为优选，上述检测方法中，乙腈_二氯甲烷混合液的体积比为1: 1，能有效提取 鸡蛋和辣椒样品中的四种苏丹红染料（I、II、III和IV四种类型），尤其是苏丹红III和苏 丹红IV，同时解决以二氯甲烷为提取液时鸡蛋样品容易松散、不易实现有效地固液分离等 问题。
[0028] 作为优选，所述步骤（1)中的叔丁基甲醚-甲醇混合溶液中叔丁基甲醚的体积分 数均为40%，能有效溶解目标分析物，降低基质效应。
[0029] 作为优选，所述固相萃取小柱为中性氧化铝柱、C18固相萃取柱和强阳离子固相萃 取柱中的一种，进一步，所述固相萃取小柱为强阳离子固相萃取柱，这样能有效净化样品基 质。
[0030] 作为优选，所述二氯甲烷-正已烷混合溶液中二氯甲烷的体积分数为5%，能有效 溶解辣椒油中残留的苏丹红染料。
[0031] 作为优选，所述鸡蛋样品为去壳后的生鸡蛋或熟鸡蛋中的一种，所述辣椒样品为 鲜辣椒、干辣椒、辣椒粉或辣椒酱中的一种。<