体外诊断装置及其使用_3

文档序号:8449063阅读:来源:国知局
目的是维持其微生物稳定性,如叠氮化钠、抗生 素,和其构造稳定性,如糖(蔗糖、葡萄糖、海藻糖),以及执行这些功能的本领域技术人员 已知的任何其他试剂。
[0074] 捕获试剂可存在于整个区域16上或仅一部分上。
[0075] 清洁剂和/或捕获试剂优选是溶液的形式,其可通过机器人或手动吸液管沉淀。 有利地,这些溶液也可容易地使用通过毛细作用保持优选量的针头来沉淀。这些针头可用 所有材料制造,但是更具体地用金属材料,且具有或不具有疏水涂层。其端部可以是平坦的 或具有确定量的槽。
[0076] 清洁剂和/或捕获试剂溶液的沉淀必须随后跟随有薄膜的干燥,干燥的周期取决 于应用的温度:在室内温度干燥4小时,在37°C至少一个小时。
[0077] 根据本发明的装置可包括在多孔薄膜14下方的吸收剂薄膜18。该薄膜18吸收在 反应区域16的水平处沉淀的液体,其不通过薄膜14保持,特别是当反应区域16在薄膜14 的整个厚度上是亲水的时。
[0078] 薄膜18可包括通过毛细作用进行被动吸收的材料,例如吸收剂纸、纸浆 (cellulose)等或用吸收剂聚合物制造。例如,可引述下列产品:
[0079] · Millipore C048, C068, C083, C248
[0080] · Whatman CF3, CF4, CF10, Grade 470, CF5, CF6, CF7, Grade 900,Grade300
[0081] · Ahlstrom Grades 601, 642, 631, 238, 237, 222, 243, 320
[0082] · Pall Grades 111, 113, 133, 165, 197, 8975, 8964, 8301,Accuwik? Ultra
[0083] · Cleanis Gelmax superabsorbent pad
[0084] ?棉花
[0085] 吸收剂薄膜18的组分和其尺寸必须被选择为其在测试期间可吸收所有的溶液 (Vtotal,以μ 1表示)。每一个薄膜特征在于吸收容量(C,以μ Ι/cm2表示),薄膜和其尺寸 (D,以cm2表示)被选择为满足下列的等式:D>V total/C。
[0086] 替换地,液体可通过薄膜上方区域和其下方区域之间的压差吸收。例如使用具有 部分真空的吸入系统。
[0087] 薄膜14和可选地薄膜18布置在支撑件12中。
[0088] 根据本发明的装置10的支撑件12优选是刚性支撑件。其例如可以是壳。
[0089] 支撑件优选包括不让液体泄漏的刚性材料。其可以具体是塑料材料,例如聚丙烯、 聚乙烯、聚本乙烯、丙烯腈丁二烯苯乙烯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚碳酸脂、聚酰胺、聚氯 乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯。
[0090] 支撑件12优选包括至少一个开口 20,每一个开口 20与多孔薄膜14的每一个亲水 反应区域16成直角。该开口 20对应于沉淀在亲水反应区域16上的样本的收集区域。亲 水区域16可具有与开口的基部相同的尺寸,可以较小或较大,只要两个亲水区域总是被薄 膜14上的疏水区域分开。
[0091] 如果需要,开口 20可具有用于观察下方信号的透明边缘。
[0092] 收集区域必须具有一尺寸使得其可至少包含沉淀在反应薄膜16上的最大量的要 被测试的样本。
[0093] 每一个反应区域16的独立是通过反应区域之间的疏水薄膜包括的屏障获得的。 这种独立性在同一装置上执行几种不同诊断,所述装置包括单个薄膜。根据变化例,这种独 立性还可选地通过将支撑件12分段为通过隔壁分开的实体独立单元来实施,每一个隔壁 含有其自己的薄膜。
[0094] 此外,通过在开口 20周围形成多余厚度可以改善薄膜14和18之间的接触,且实 际上是与所述开口 20的开口相反的圆顶。
[0095] 支撑件12可以是具有几个开口 20的壳,其尺寸能与外部尺寸方面的标准SBS/ AINSI相容。
[0096] 根据本发明的装置10可用于通过毛细作用确定生物流体中分析物的存在或缺 失,具体是在血液中或其成分中之一中。该分析物可以是红细胞表型抗原或与该抗原相关 的抗体。
[0097] 装置10可尤其用于:
[0098] -使得红血球显型,即在其表面处的抗原的确定。
[0099] -Simmonin测试,其识别抗A或抗B抗体的存在。
[0100]-依照对同种抗体、自身抗体或凝集素的搜索,搜索或识别与具体红细胞中细胞抗 原相关的抗体。
[0101] 具体说,本发明的目标因此是用于识别和确定ABO血型的装置10的使用,扩展的 Rhesus表型,从血液或其组成成分中之一的样本搜索不规则凝集素,搜索自身抗体、搜索冷 抗球蛋白和/或交叉验证。
[0102] 根据本发明的装置10的使用需要使用显示试剂。优选其是血红细胞。这些血红 细胞是:
[0103] -已知表型的血红细胞,称为血红细胞测试体,用于使用该装置以搜索抗体或 Simmonin 测试,
[0104] -是包含在被测试样本中的血红细胞,用于使用用于显型的该装置。
[0105] 根据分析物(其目标是检测要被测试样本中的存在)的功能,捕获试剂的特点、显 示试剂的特点、亲水化方法(单个或多个,沿厚度或表面)和随后的方案都需要改变。
[0106] 在所有的情况下,在要被测试的样本在反应区域上的沉淀之前,可以继续进行通 过缓冲溶液进行的反应区域16的水合。该缓冲剂可包括稳定的pH在pH6到pH8. 5之间的 溶液,优选在PH6. 5到pH7. 8之间,具体是在pH7到pH7. 5之间,且同渗容摩为250m0sm到 800m0sm之间,优选在300m0sm到600m0sm之间。该溶液可选地包括低浓度的清洁剂(0. 01 到0. 05% m/v的Tween20)、饱和试剂(BSA)和/或能使得抗原-抗体反应有潜在可能的 试剂。
[0107] 类似地,为了读取结果,必要的是使用缓冲洗液。该缓冲洗液优选包括PBS、TBS或 pH为2到10之间的盐水溶液,优选在5到9之间。缓冲剂的同渗容摩必须被控制为避免红 血球的溶血。缓冲剂必须被选择为不使得显示试剂或直接或间接地固定到捕获试剂的着色 分析物分离。意外地,对于根据本发明的装置的使用来说,优选的是使用略微高渗性的洗液 (其为300m0sm到800m0sm),其通过盐水试剂的存在而获得,例如NaCl或非离子的渗透调 节物质(osmolites),例如甘氨酸或牛磺酸。该缓冲剂可被着上与显示试剂的颜色形成鲜明 对比的颜色。例如,如果显示试剂是血红细胞,则缓冲剂洗液可着色为蓝色或绿色。还可能 的是,将低剂量的表面活化剂增加到洗液,以消除背景噪声。这些表面活性剂优选是非离子 的表面活性剂,且具体是糖酯,尤其是山梨聚糖的聚乙二醇酯。
[0108] 在装置10的使用期间,液体可尤其通过吸液管系统或通过毛细作用复制系统 (capillarity replication system)沉淀。
[0109] 有利地,根据本发明的装置不需要离心、也不需要搅动、也不需要真空、也不需要 临时装置。还可完全自主地手动使用,且容易依靠机器人而自动化。薄膜14的不同特点控 制运动速度并产生足够长的运动时间,以允许抗原-抗体反应,而不管薄膜14的多孔性尺 寸,但是很大。
[0110] 根据第一变化例,本发明的目标是用于使得红血球显型的装置10的使用。
[0111]目标是搜索红血球表面处的抗原。在这种情况下,
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