一种基于柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测器测定皮革中全氟辛酸残留量的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及产品检测分析领域，具体涉及一种柱前衍生-高效液相色谱-荧光检 测器测定皮革中全氟辛酸（PF0A)残留量的检测方法。
【背景技术】
[0002] 全氟辛酸（Perfluorooctanicacid，PF0A)分子式为CF3 (CF2) 6C00H，是PFCs家族 中的代表性成员之一。由于其具有优良的疏水疏油性能、高热稳定性、高化学稳定性和高表 面活性等性能，作为"三防"表面整理剂广泛地应用于皮革生产中。然而，有研宄表明PF0A 广泛存在于生物体内和生态环境中，并具有生殖毒性、遗传毒性、发育毒性、免疫毒性和肝 脏毒性等多种毒性，已成为引起重视的一种新型持久性有机污染物（POPs)。2004年国内外 所关注的"杜邦不粘锅事件"就是PF0A所引起的。欧盟指令中PF0A因被怀疑与PF0S具有 相似的危害性也将被列为受限物，而挪威污染控制管理局在2013年已经对PF0A进行了限 量使用。因此，皮革及其制品中PF0A含量的检测分析具有重要的现实意义和必要性。
[0003] 至今，对于皮革及其制品中PF0A的检测分析尚无国家统一标准，浙江省发布的地 方标准DB33/T479-2009《纺织品、皮革中PF0S和PF0A的测定液相色谱-串联质谱法》 可检测皮革中PF0A含量。其它行业或学科已经发展的PF0A检测方法主要有HPLC-MS法、 HPLC-MS/MS法、GC-MS法等。鉴于这些方法虽检测灵敏度高，但主要依赖高端分辨仪器，检 测成本高，难以普及。选择合适的衍生化试剂以及简单的前处理方法，开发不依赖于昂贵仪 器，分析成本低，易于操作和普及的分析检测方法是环境分析化学的重要研宄方向之一。
[0004] 本发明的目的是针对现有技术存在的不足和缺陷，借助于柱前衍生-高效液相色 谱-荧光检测技术相结合，提供一种可测定皮革、人造革及其制品中全氟辛酸（PF0A)的检 测方法。本发明所提供的检测方法是通过柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测法实现的，旨 在解决现有方法大都依赖于高端分析检测仪器，检测成本高，方法难以普及应用的问题。本 方法通过合理选择高效液相色谱测定参数和测试步骤，采用荧光检测器检测，外标法定量， 可以实现皮革、人造革及其制品中PF0A含量的测定，具有经济有效、精密度高、抗干扰能力 强和检测限低的特点。目前为止，国内外采用柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测器分析 测定皮革及其制品中PF0A的检测方法检测尚未见文献和专利报道。
【发明内容】
[0005] -种基于柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测器测定皮革中全氟辛酸残留量的检 测方法，其特征在于所述全氟辛酸（PF0A)残留量的测定方法是通过3-(溴乙酰基）香豆素 (3-BrAC)柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测器测定的，测定方法具体包括以下步骤： (1)将待测样品剪碎后置于容器中，加入有机溶剂后再置于超声波清洗仪中超声萃取 0. 5h~lh，滤出滤液；再加入有机溶剂，重复萃取1次，超声时间缩短为10min~20min，再次 过滤，合并两次滤液，旋转蒸发仪得浓缩的萃取液； (2) 用乙腈溶解旋蒸瓶中的萃取液，定容至1mL~3mL，涡旋振荡3min~10min，用移 液枪准确移取至10mL试管中，加入50yL~200yL衍生化试剂，加盖密封后于50~80°C下振 摇反应2h~5h，衍生反应结束后迅速冷却至室温，置于通风橱中平衡1min~5min，经0.45 Um有机滤膜过滤至样品瓶中，得待测样液； (3) 根据待测样液中PF0A衍生产物的含量情况，选定浓度相近的标准工作溶液，标准 工作溶液和待测样液中PF0A的响应值均应在仪器检测的线性范围内，用高效液相色谱-荧 光检测器进行测定，如果样液中与标准溶液在相同的保留时间内有峰出现，则需要确证；经 确证分析被测物质的色谱峰保留时间与标准物质一致，则判定待测样品中含有PF0A; (4) 同时用高效液相色谱-荧光检测器按步骤（1)、（2)检测空白样品； (5) 用外标法绘制标准曲线，按下式计算样品中PF0A的含量： x= (C-C〇) */ /? 式中：x一样品中PF0A的含量，单位为mg/kg; C一由标准曲线得到的样液中PF0A的浓度，单位为yg/mL; CQ-由标准曲线得到的空白试验中PF0A的浓度，单位为yg/mL;f?一检测液的最终稀释比； m-检测液所代表的试样的质量，单位为g。
[0006] 所述的一种柱前衍生_高效液相色谱_荧光检测器测定皮革中全氟辛酸残留量的 检测方法，其特征在于所述的超声萃取有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷、 二氯甲烷、四氯化碳和乙腈中的一种或几种的混合物。
[0007] 所述的一种柱前衍生_高效液相色谱_荧光检测器测定皮革中全氟辛酸残留量的 检测方法，其特征在于所述的衍生化试剂为3-(溴乙酰基）香豆素（3-BrAC)。
[0008] 所述的一种柱前衍生_高效液相色谱_荧光检测器测定皮革中全氟辛酸残留量的 检测方法，其特征在于所述的高效液相色谱-荧光检测器测定时的参数条件如下： a) 色谱柱：C18 色谱柱（4.6X250mm，5ym); b) 色谱柱温度：20°C~40°C; c) 焚光检测器：激发波长306nm，发射波长420nm; d) 流动相：60 %乙腈和乙腈，洗脱程序如表1所示； e) 流速：0? 8 ~ 1. 8ml,/min； f) 进样量：i〇yL; 表1高效液相色谱梯度洗脱程序
【主权项】
1. 一种基于柱前衍生-高效液相色谱-巧光检测器测定皮革中全氣辛酸残留量的检 测方法，其特征在于所述全氣辛酸（PFOA)残留量的测定方法是通过3-(漠己酷基）香豆素 (3-BrAC)柱前衍生-高效液相色谱-巧光检测器测定的，测定方法具体包括W下步骤： (1) 将待测样品剪碎后置于容器中，加入有机溶剂后再置于超声波清洗仪中超声萃取 0. 5h~比，滤出滤液；再加入有机溶剂，重复萃取1次，超声时间缩短为10min~20min，再次 过滤，合并两次滤液，旋转蒸发仪得浓缩的萃取液； (2) 用己膳溶解旋蒸瓶中的萃取液，定容至1血~3血，祸旋振荡3min-lOmin，用移 液枪准确移取至10血试管中，加入50yL~200yL衍生化试剂，加盖密封后于50~80°C下振 摇反应2h~5h，衍生反应结束后迅速冷却至室温，置于通风榻中平衡1min~5min,经0.45 ym有机滤膜过滤至样品瓶中，得待测样液； (3) 根据待测样液中PFOA衍生产物的含量情况，选定浓度相近的标准工作溶液，标准 工作溶液和待测样液中PFOA的响应值均应在仪器检测的线性范围内，用高效液相色谱-巧 光检测器进行测定，如果样液中与标准溶液在相同的保留时间内有峰出现，则需要确证；经 确证分析被测物质的色谱峰保留时间与标准物质一致，则判定待测样品中含有PFOA; (4) 同时用高效液相色谱-巧光检测器按步骤（1)、（2)检测空白样品； (5) 用外标法绘制标准曲线，按下式计算样品中PFOA的含量： x= (C-C〇)*//m 式中；x-样品中PFOA的含量，单位为mg/kg; C-由标准曲线得到的样液中PFOA的浓度，单位为yg/mL; C。一由标准曲线得到的空白试验中PFOA的浓度，单位为yg/mL; f-检测液的最终稀释比； m-检测液所代表的试样的质量，单位为g。
2. 根据权利要求1所述的一种柱前衍生-高效液相色谱-巧光检测器测定皮革中全氣 辛酸残留量的检测方法，其特征在于所述的超声萃取有机溶剂为甲醇、己醇、丙酬、己酸己 醋、S氯甲烧、二氯甲烧、四氯化碳和己膳中的一种或几种的混合物。
3. 根据权利要求1所述的一种柱前衍生-高效液相色谱-巧光检测器测定皮革中全氣 辛酸残留量的检测方法，其特征在于所述的衍生化试剂为3-(漠己酷基)香豆素（3-BrAC)。
4. 根据权利要求1所述的一种柱前衍生-高效液相色谱-巧光检测器测定皮革中全氣 辛酸残留量的检测方法，其特征在于所述的高效液相色谱-巧光检测器测定时的参数条件 如下： a) 色谱柱；C18 色谱柱（4. 6X250mm，5ym); b) 色谱柱温度；20°C~40°C c) 巧光检测器；激发波长306nm，发射波长420nm; d) 流动相；60 %己膳和己膳，洗脱程序如表1所示；； e) 流速；0. 8 ~ 1. 8 血/min f) 进样量；1〇化； 表1高效液相色谱梯度洗脱程序_
【专利摘要】本发明提供了一种柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测器测定皮革中全氟辛酸（PFOA）残留量的检测方法。其具体步骤包括：样品超声萃取，样品提取液浓缩，萃取液中PFOA的衍生化反应，膜过滤至样品瓶中，用高效液相色谱-荧光检测器进行测定和确证，同时做空白实验，然后用外标法定量测定样液目标化合物。本方法合理选择高效液相色谱测定参数和测试步骤，选择荧光检测器并用外标法定量，实现了皮革、人造革及其制品中全氟辛酸（PFOA）残留量的精确测定。该方法具有经济有效、精密度高、抗干扰能力强和检测限低的特点。
【IPC分类】G01N30-02
【公开号】CN104849373
【申请号】CN201510277666
【发明人】林炜, 张锋, 王春华, 俞凌云, 桑军
【申请人】四川大学
【公开日】2015年8月19日
【申请日】2015年5月27日