一种三聚氰胺快速检测试纸条的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明属于一种检测奶粉中三聚氰胺快速检测试纸条，这种试纸条采取胶体硒免疫层析检测技术，属于食品安全检测领域。
【背景技术】
[0002]三聚氰胺(Melamine，MEL)又名蜜胺，氰尿三酰胺，是一种重要的氮杂环有机化工原料。由于食品工业中常需要测定食品中的蛋白质含量，而由于直接测量蛋白质技术比较复杂，所以常用凯氏定氮法间接确定食品中蛋白质的含量。由于三聚氰胺分子含氮量很高，只要添加到食品中就可在检测中造成蛋白质含量较高的假象。目前在饲料、牛奶、奶粉、饼干、奶糖等相关产品均发现有三聚氰胺残留现象。动物实验结果表明，三聚氰胺的摄入可能会导致膀胱炎、慢性肾炎、肾结石、甚至膀胱癌。
[0003]因此，目前乳制品中三聚氰胺添加剂的残留已经成为消费者关注的焦点问题，为使牛奶中三聚氰胺添加剂残留问题得到有效监控，各类三聚氰胺检测试纸条相继开发，主要集中在应用酶联免疫吸附分析法(ELISA)的原理。然而现有的检测三聚氰胺的试纸条，没有过滤层，在检测奶粉时，由于某些成分不易溶解，常常发生固体颗粒或大分子堵塞膜孔道，延长了检测时间且易出现假阴性的检测结果。本发明通过对常规三聚氰胺试纸条结构的优化改进，增加了一段滤膜作为过滤层，解决了现有试纸条在检测奶粉时由于某些成分不易溶解，导致固体颗粒或大分子容易堵塞膜孔道，延长检测时间、检测不准确的问题。使用本发明试纸条检测三聚氰胺，可以提高检测的准确性，防止假阴性结果的出现，可广泛用于实验室、家庭和现场检测。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种能够快速检测三聚氰胺的试纸条。
[0005]一种三聚氰胺快速检测试纸条，该试纸条包括底板1、样品垫3、硒标结合垫5、反应垫2、吸水垫8 ;所述的样品垫3和吸水垫8分别设置在底板I两端，硒标结合垫5设置在样品垫3 —端，硒标结合垫5上有胶体硒标记的鼠源抗三聚氰胺单克隆抗体，反应垫2设置在吸水垫8 —端，且设置在硒标结合垫5和吸水垫8之间，其中反应垫2上设置有一条检测线6和一条质控线7，检测线6用检测线(T)表示，质控线7用质控线(C)表示，检测线6和质控线7互相平行，并且与试纸条的长相垂直，检测线6靠近样品垫3 —端，质控线7靠近吸水垫8 —端，检测线6包被有三聚氰胺抗原，质控线7包被有羊抗鼠IgG，其中该试纸条在样品垫3和硒标结合垫5之间还设置有一段过滤层4。
[0006]本发明提供的一种三聚氰胺快速检测试纸条，其中所述的过滤层4为聚醚砜(PES)。聚醚砜滤膜为水系膜，具有较高的化学和热稳定性，流速快，耐酸碱能力强(pH范围1-14)，具有高机械强度的优点。
[0007]本发明提供的一种三聚氰胺快速检测试纸条，所述底板I为硬质塑胶条或不吸水的硬纸条；所述样品垫3为玻璃纤维棉、尼龙膜、聚偏二氟乙烯膜或聚酯膜；所述硒标结合垫5为玻璃纤维素膜，所述反应垫2为硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜，所述吸水垫8为吸水滤纸或滤油纸。
[0008]现有的试纸条没有过滤层4，在检测奶粉时，由于某些成分不易溶解，常常发生固体颗粒或大分子堵塞膜孔道，致使检测样品溶液不能够充分渗透到样品硒标结合垫5 —段，并在试纸条上进行层析的速度十分缓慢，导致检测样品中的物质不能够与检测线6上包被的抗原充分接触，可能导致假阴性结果，致使试纸条的准确度下降。
[0009]本发明试纸条比现有试纸条检测的准确度高，由于本发明试纸条在样品垫3和硒标结合垫5之间还设置有一段过滤层4，当样品经过过滤层4时固体颗粒或大分子物质被截留，而由于所检测的三聚氰胺是小分子可以迅速通过到达硒标结合垫5而不影响检测，并且过滤后的样品在试纸条上的层析速度比较快，使样品中的待检物质能够充分的与检测线6上包被的抗原结合，从而提高了试纸条的检测准确度。
【附图说明】
[0010]图1为本发明试纸条剖面图，其中，1.底板；3.样品垫；2.反应垫；4.过滤层；5.硒标结合垫；6.检测线；7.质控线；8.吸水垫。
[0011]图2为本发明试纸条结构图。
[0012]图3中a、b、c、d为本发明三聚氰胺快速检测试纸条的性能检测实验检测结果图。检测线用检测线(T)表示，质控线用质控线(C)表示。a表示含有0，1，5，1(^8/1的标准三聚氰胺样品检测的结果；b表示含有50 μ g/L的标准三聚氰胺样品的检测结果；c表示含有100，500 μ g/L的标准三聚氰胺样品的检测结果，d表示试纸条无效时的检测结果。
[0013]图4中a、b、c、d、e为本发明市售奶粉交叉反应实验试纸条检测结果图。检测线用检测线(T)表示，质控线用质控线(C)表示。a表示含有O μ g/L的标准三聚氰胺样品的检测结果山表示含有500μ g/L的标准三聚氰胺样品的检测结果；c表示含有500μ g/L的标准三聚氰酸样品的检测结果，d表示含有500 μ g/L的标准三聚氰胺一酰胺的样品检测结果，e表示含有500 μ g/L的标准三聚氰胺二酰胺样品的检测结果。
【具体实施方式】
[0014]下面结合实施例并对照附图对本发明做进一步说明。
[0015]本三聚氰胺快速检测试纸条的目的是这样实现的:如图1、2所示，
该试纸条包括底板1、样品垫3、过滤层4、硒标结合垫5、反应垫2、吸水垫8 ;所述的样品垫3和吸水垫8分别设置在底板两端，硒标结合垫5设置在样品垫3 —端，硒标结合垫5上有胶体硒标记的鼠源抗三聚氰胺单克隆抗体，反应垫2设置在吸水垫8 一端，且设置在硒标结合垫5和吸水垫8之间，其中反应垫2上设置有一条检测线6和一条质控线7，检测线6用检测线(T)表示，质控线7用质控线(C)表示，检测线6和质控线7互相平行，并且与试纸条的长相垂直，检测线6靠近样品垫3 —端，质控线7靠近吸水垫8 一端，检测线6包被有三聚氰胺抗原，质控线7包被有羊抗鼠IgG。
[0016]实施例一三聚氰胺快速检测试纸条的制作
试纸条制备是基于胶体硒免疫层析检测技术，由于三聚氰胺是小分子，只有一个抗原表位，因此本实施例三聚氰胺快速检测试纸条的制备选择竞争法。
[0017]1、胶体硒颗粒标记鼠源抗三聚氰胺单克隆抗体
胶体硒分别加入终浓度为0.5-30 μ g/mL的鼠源抗三聚氰胺单克隆抗体(可于广州沃维生物科技有限公司公司购得)，轻轻混匀10分钟，于透射电镜观察胶体硒被鼠源抗三聚氰胺抗体包埋的程度，从而