聚l-谷氨酸/直链淀粉修饰玻碳电极对色氨酸对映体的选择性识别的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及聚L-谷氨酸/直链淀粉修饰玻碳电极对色氨酸对映体的选择性识别，属于电化学传感器和分子识别领域。
技术背景
[0002]实际生活中构成生命活动中的物质如蛋白质、多糖、核酸、氨基酸等几乎都是具有手性的。对于手性化合物，当不存在外部手性环境时，两个对映体除光学活性外，具有完全相同的化学和物理性质，其表现为相同的熔点、溶解度、红外光谱、核磁共振谱，在气相和液相色谱上也具有相同的保留时间。然而当手性化合物处于手性环境时，两个光学异构体就表现不同的行为，导致不同的性能。如手性药物，因其立体构型不同，与受体之间的相互作用也就存在不同的药理和药效关系；生化反应过程的立体选择性、各类天然有机手性化合物的立体构型、高分子材料的立体构型等都与手性分子的立体构型、生物活性有关，可见，手性识别的研究具有重要的理论和实际研究意义。目前，手性识别研究方法主要包括手性色谱，光谱和电化学手性传感器。其中色谱方法已经被广泛用于分离分析手性化合物，并且证明是一种有效的手性分析方法，但是该方法也存在一定的缺点，例如比较容易引起生物类手性选择剂和分析化合物的构型变化或失活，而且仪器成本高，分析时间长，特别难以实现原位和在线检测等。电化学传感器因其制备简单、成本低、识别效率高等优点，用来识别手性物质具有很广泛地研究价值。
[0003]氨基酸手性识别对蛋白质化学、生物化学和整个生命科学研究以及产品开发、质量控制和生产管理等具有重要意义。氨基酸与生物的生命活动有着密切的关系，大多氨基酸具有手性异构体。D-型和L-型对映体的生理作用迥异，L-型氨基酸是人体所需氨基酸，而摄入过量D-型氨基酸会引起中毒。在营养学上D-型似乎没有意义，但它却倍受医药工作者的青睐，如氨基酸类抗生素中，D-型氨基酸难以被细菌降解，而不致产生抗药性。这无疑将为抗生素的利用提供更为广阔的前景。所有这些都涉及到手性氨基酸的拆分问题，制备纯的手性化合物在生命科学、药物化学、精细化学等领域均具有重要意义，备受化学家、生命学家的重视。因此采用适当的技术对其进行准确的识别、分离和提纯显得尤为重要。
[0004]直链淀粉，是高分子碳水化合物，是一种天然的多糖。直链淀粉是D-六环葡萄糖经α-1，4-糖苷键组成，是双螺旋结构。淀粉作为一种重要的工业原料，广泛的应用于食品、化工、纺织及建材等行业中。直链淀粉具有良好的成膜性，其分子具有丰富的-0Η，从而使得直链淀粉对许多离子、有机物以及生物分子具有离子螯合、吸附等作用，直链淀粉及其衍生物可用作手性识别材料。
【发明内容】
[0005]针对技术背景中存在的问题，本发明的目的是通过聚L-谷氨酸/直链淀粉修饰玻碳电极对色氨酸对映体的选择性识别。
[0006]本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:聚L-谷氨酸/直链淀粉修饰玻碳电极对色氨酸对映体的选择性识别，包括以下步骤:
[0007]a、制备聚L-谷氨酸修饰玻碳电极:配制L-谷氨酸溶液(溶剂为0.1?0.3M磷酸二氢钠，PH = 6?7)，采用循环伏安法将其沉积在玻碳电极表面，得到聚L-谷氨酸修饰玻碳电极。
[0008]b、制备聚L-谷氨酸/直链淀粉修饰玻碳电极:将制备的聚L-谷氨酸修饰玻碳电极浸入20?30mL直链淀粉溶液中，在8°C下自组装18?28h，得到聚L-谷氨酸/直链淀粉修饰玻碳电极。
[0009]C、对色氨酸对映体的选择性识别:采用差分脉冲法来识别色氨酸对映体，将聚L-谷氨酸/直链淀粉修饰玻碳电极静置在不同温度(2?42°C )下的20?30mL色氨酸对映体溶液中(静置时间30?90s)，以0.1?0.5V/s的扫速在0.4?1.0V (vs.SCE)的电化学窗范围内进行差分脉冲，每次测完后修饰电极在20?30mL空白溶液(0.1?0.3M磷酸二氢钠，pH = 6?7)中扫稳恢复电极活性。
[0010]进一步地，步骤a中L-谷氨酸的浓度为0.03?0.06M。
[0011 ] 进一步地，步骤b中直链淀粉的浓度为I?3mg/mL。
[0012]进一步地，步骤c中色氨酸对映体的浓度为0.2?ImM。
[0013]本发明的有益效果是??聚L-谷氨酸/直链淀粉修饰玻碳电极的制备方法简单、便捷、无污染，该修饰电极对色氨酸对映体有着较好的识别效果。这归因于直链淀粉对色氨酸对映体的立体选择性。
【附图说明】
[0014]下面结合附图对本实验进一步说明。
[0015]图1为实施例一中不同修饰电极的循环伏安图；图1中a:玻碳电极，b:聚L-谷氨酸修饰玻碳电极，c:聚L-谷氨酸/直链淀粉修饰玻碳电极。
[0016]图2为实施例二中聚L-谷氨酸修饰玻碳电极(a)和在不同温度下制备的聚L-谷氨酸/直链淀粉修饰玻碳电极的循环伏安图；b: 4°C，c: 8°C，d: 12°C，e: 20°C。
[0017]图3为实施例三中不同自组装时间对识别的影响。
[0018]图4为实施例四中温度对识别的影响。
[0019]图5为对比例一中四种不同修饰电极对色氨酸对映体氧化峰电流比值的柱状图，A:玻碳电极，B:聚L-谷氨酸修饰玻碳电极，C:直链淀粉修饰玻碳电极，D:聚L-谷氨酸/直链淀粉修饰玻碳电极。
【具体实施方式】
[0020]现在结合具体实施例对本发明作进一步说明，以下实施例旨在说明本发明而不是对本发明的进一步限定。
[0021]实施例一:
[0022](I)配制2mg/mL直链淀粉溶液(溶剂为超纯水)。
[0023](2)配制0.05mM L-谷氨酸溶液(溶剂为0.1M磷酸二氢钠，pH = 7)，采用循环伏安法将L-谷氨酸沉积在玻碳电极表面，电位范围为-0.6?2.0V,扫速为0.lV/s，扫描圈数为20圈，得到聚L-谷氨酸修饰玻碳电极。
[0024](3)将步骤2制备得到的聚L-谷氨酸修饰玻碳电极在8 °C下静置在步骤I配制的溶液中自组装24h，得到聚L-谷氨酸/直链淀粉修饰玻碳电极。
[0025](4)将步骤2、3制备得到的电极静置在5mM铁氰化钾溶液中，采用循环伏安法进行表征，电位范围为-0.2?0.6V，扫速为0.lV/s，扫描