制样装置与制样方法以及细胞分析装置与细胞分析方法_3

文档序号:9429728阅读:来源:国知局
092] 样本定量部件27包括:定量气缸27A和驱使插入该气缸27A中的定量活塞上下移 动的驱动部件27B。定量气缸27A经方向切换阀Vl与第1吸液管26A通过管路相连接。
[0093] 用第1吸液管26A从生物体容器53中吸出的生物体试样和保存液的混合液通过 方向切换阀VI,导入到定量气缸27A中。被导入的该生物体试样和保存液的混合液通过驱 动部件27B驱动的定量活塞的移动,经方向切换阀Vl被送入下一个识别/置换部件29。
[0094] 本实施方式中,样本定量部件27的定量气缸27A还通过管路与给生物体试样调制 稀释液的稀释液组件55相连接。
[0095] 试剂定量部件28包括一对定量气缸28A、28B和驱动分别插入各气缸28A、28B中 的定量活塞上下移动的驱动部件28C。各定量气缸28A、28B各自经供给切换阀V2、V3与第 2吸液管26B通过管路相连接。
[0096] 试剂容器中的试剂由各定量气缸28A、28B供应。供给的试剂,通过驱动部件28C驱 动定量活塞移动来定量一定量,定量后的试剂经供给切换阀V2、V3被送到第2吸液管26B。
[0097] 这样,就可以在返回到置样部件24的生成物容器54中的分离完的试样中,分别混 和由试剂定量部件28定量的一定量的各种试剂。
[0098] 本实施方式中,在试剂定量部件28的各定量气缸28A、28B定量的试剂有两种。其 中,定量气缸28A计量并加入生物体试样中的试剂是进行PI染色用的染料液,另一个定量 气缸28B计量并加入生物体试样中的试剂是对细胞进行RNA处理的Rnase。PI染色是使用 含有色素的荧光染色液一一碘化丙啶(PI)进行的。PI染色是对细胞核进行有选择的染色, 所以可检测出来自细胞核的荧光。RNA处理是为了溶解细胞中的RNA而实施的处理。因为 上皮细胞中的RNA和DNA均能被染色液染色,而通过上述RNA处理,RNA溶解,不会被染料 液染色,这样就能够正确地检测细胞核中的DNA。
[0099] 识别/置换部件29包括:上方呈开口状的收纳容器57、可插入收纳容器57并在该收 纳容器57中上下自由活动的过滤气缸58及使该过滤气缸58在收纳容器57中上下活动的 驱动部件59。
[0100] 收纳容器57经方向切换阀VI、V7、V4与样本定量部件27的定量气缸27A通过管 路相连接。这样,样本定量部件27定量的生物体试样与保存液的混合液可以经方向切换阀 VI、V7、V4供给至收纳容器57,并暂时保存在此容器57内。此外,收纳容器57中的分辨完 的生物体试样也可经同样路径被送至以1洗液管26A。
[0101] 而且,上述副检测部件14的流动池45被设置在方向切换阀V4与到废弃部件61 之间的管路部分中。这样,副检测部件14就可以对收纳容器57排出的已分辨的生物体试 样进行细胞计数。
[0102] 过滤气缸58由下部装有阻止待测细胞(上皮细胞)通过而让比其直径小的细胞(红 血球、白血球等)通过的过滤器60的中空圆筒物构成,该过滤气缸58经切换阀V5通过管路 连接着稀释液组件55。
[0103] 这样,打开切换阀V5,稀释液组件55的稀释液就可以供至过滤气缸58内。
[0104] 识别/置换部件29的驱动部件59驱动上述过滤气缸58向装有生物体试样与保 存液、稀释液的混合液的收纳容器57下面移动,过滤气缸58的过滤器60在收纳容器57内 混合液中向下移动。这样,主要包含待测细胞的液体作为残留液留在过滤器60下方,同时 主要包含其它细胞、夹杂物的液体作为滤液残留在过滤器60的上方(过滤气缸58的内部)。
[0105] 另外,过滤气缸58经切换阀V6通过管路连接着滤液废弃部件61。这样,因为过滤 气缸58的下降而被过滤的滤液经切换阀V6废弃至外部。
[0106] 而另一方面,当上述过滤后的残留液为生物体试样浓度测定用时,过滤气缸58中 的残留液则在上述滤液废弃完成后,经方向切换阀V4被送到副检测部件14的流动池45,之 后,被废弃到废弃部件61。另外,当这一残留液为测定试样调制用时,则从第1吸液管26A 中将其送回到生成物容器54。
[0107] 如图7所示,样本定量部件27的定量气缸27A,经方向切换阀VI、V7,通过管路还 与测定装置2的主检测部件6相连接。
[0108] 这样,生成物容器54中的测定试样,经第1吸液管26A,在样本定量部件27中被定 量,经上述切换阀VI、V7,被供应给测定装置2的主检测部件6。
[0109] 根据上述制样控制部件16 (微处理器19)发出的控制指令实行对图7中各部件的 驱动部件、切换阀(电磁阀)Vl~V7的动作控制。上述制样控制部件16进行的前处理步骤 后面再说明。
[0110]【识别/置换部件的具体构成】 图8为对识别/置换部件29更为具体的构成进行说明的放大截面图,图9为对识别/ 置换部件的过滤作用进行说明的说明图。
[0111] 如图8所示,本实施方式的识别/置换部件29包括:可收纳包含生物体试样的液 体L的收纳容器57、能阻止生物体试样中的第1细胞Cl通过而让比第1细胞Cl直径小的 第2细胞C2通过的过滤器60。
[0112] 另外,识别/置换部件29还包括作为液体分离部件发挥作用的上述过滤气缸58, 它是通过让液体L通过上述过滤器60,将液体L分离成主要包含第1细胞Cl的第1液体 Ll和主要包含第2细胞C2的第2液体L2。
[0113] 收纳容器57中具有筒体部57A和底部57B,中空筒体部57A有朝上下方向的轴心, 底部57B有中央部有向下凹陷的内面,底部57B与中空筒体部57A的下部相连,成为一体。
[0114] 此外,过滤气缸58具有中空筒状气缸63以及封住该气缸63的下端开口的上述过 滤器60,中空筒状气缸63通过密封材料62可插入收纳容器57中并上下自由移动。
[0115] 本实施方式中,设想将宫颈上皮细胞作为第1细胞C1,该上皮细胞的大小约为 20~80 A m(平均为60 _ m左右)。此外,比上述第1细胞Cl小的第2细胞C2-红血球, 其大小约为7~10類m,同样作为第2细胞C2的白血球,其大小约为8~15 m,再有,作 为第2细胞C2的细菌等夹杂物的大小约为1~数说m左右。
[0116] 因此,在本实施方式中,上述过滤器60采用的是通孔直径小于20 A m、约为8~ 20.瘦m的金属制CVD (Chemical Vapor Deposition:化学气象沉积法)过滤器,这样,即使 是在向收纳容器57中的液体施加压力的状态下,上皮细胞也不会通过上述过滤器60的通 孔。这种金属制CVD过滤器与其它树脂类材质过滤器和虽然是金属网状过滤器相比,具有 通孔不易变形,可提高开口率的优点。
[0117] 过滤器60的孔径设定在8~20 m是因为,如果在8_111以下,常出现细胞和夹 杂物一开始就堵塞通孔的现象,如果在20 A m以上,在向收纳容器57中的液体施加压力的 状态下,上皮细胞常常会通过通孔。过滤器60的孔径最好是在15 左右。
[0118] 收纳容器57的底部57B上连接有残留液管路64,残留液管路64用于导入已定量 的生物体试样和排出并获取过滤后的残留液L1,在该管路64的中间部分设有上述方向切 换阀V4。因此,该残留液管路64与方向切换阀V4构成了获取液体分离部件一过滤气缸58 分离出的第1液体Ll的液体获取部件。
[0119] 另外,在气缸63的上壁部,连接着与稀释液组件55相通的稀释液管路65,这个管 路65的中间部分设有上述切换阀V5。
[0120] 此外,在气缸63的上壁部,连接着为了将过滤后的滤液L2废弃至外部、与废弃部 件61相连的滤液管路66,该管路66的中间部分设置有上述切换阀V6。为此,该滤液管路 66与切换阀V6构成了液体排出部件,该液体排出部件的作用是将液体分离部件一一过滤 气缸58分离出的第2液体L2排至外部。
[0121] 在气缸63的上端部分,连接有移动机构67,它用于将马达等构成的上述驱动部件 59的旋转运动转换成在该气缸63上下方向的移动。
[0122] 这个移动机构67的驱动部件59根据制样控制部件16 (微处理器19)发出的控制 指令,驱动过滤气缸58。
[0123] 例如,如图9 (a)所示,制样控制部件16让过滤气缸58下降,使过滤器60从收纳 容器57内的液体L (生物体试样与保存液、稀释液的混合液)液面上方,朝着液体方向向下 方移动。
[0124] 这样,就如图9 (b)所示,内部所含细胞基本上都是第1细胞(上皮细胞)Cl的液 体作为残留液Ll留在了收纳容器57中过滤器60的下方,包含其它第2细胞C2 (红血球、 白血球以及细菌等夹杂物)的液体作为滤液L2留在了过滤器60的上方(过滤气缸58的内 部)。
[0125] 然后,制样控制部件16控制移动机构65的驱动部件59,使朝液体L内移动完毕的 过滤器60向上返回一定距离。
[0126] 具体说就是,制样控制部件16控制移动机构67,让过滤气缸58下降,使过滤器60 到达设在底部57B或其附近的下降限度,然后再让过滤器60返回至上方一定距离。通过这 个向上方的回移,可以让附着在过滤器60下面的第1细胞(上皮细胞)Cl脱离过滤器60。
[0127] 然后,制样控制部件16先打开切换阀V6,如图9 (c)所示,在残留液Ll之前先将 滤液L2排出,然后再打开方向切换阀V4取得残留液Ll。
[0128] 【分析处理的内容】 图10以及图11是细胞分析装置1各控制部件8、16、31所执行的处理的流程图。
[0129] 图10中,右侧显示的是数据处理装置4的控制部件(处理主机)31执行的处理流 程,左侧显示的是测定装置2的控制部件8执行的处理流程。图11中,用一列显示了制样 装置3的控制部件16所执行的处理流程,但是该处理流程在图示中的A、B以及C点是和图 10的处理流程相连的。下面,将参照图10和图11,对细胞分析装置1的处理内容进行说明。
[0130] 首先,一开始,数据处理装置4的控制部件31在上述显示部件32显示菜单画面 (步骤S1)。然后,当从输入部件33收到该菜单画面显示的测定开始指令(步骤S2)时,数据 处理装置4的控制部件31将测定开始信号发送给测定装置2 (步骤S3)。
[0131] 测定装置2的控制部件8接收到上述测定开始信号后(步骤S4),将制样开始信号 发送给制样装置3 (步骤55及六点)。
[0132] 制样装置3的控制部件16接收到上述制样开始信号后(步骤S6),将测定试样调制 用的试剂(染色液、RNase)吸入装置内流路,同时用细胞分散部件25将装在生物体容器53 中的生物体试样与以甲醇为主成分的保存液的混合液中的细胞分散(步骤S7、8 )。
[0133] 之后,制样装置3的控制部件16将完成分散的混合液从生物体容器53中吸移一 定量到装置内流路中(步骤S9),送入识别/置换部件29的收纳容器57中
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