2] 供试品溶液：取盐酸多巴酚丁胺葡萄糖注射液，按照拟定的色谱条件进行分析。
[0033] 实验结果表明：空白辅料不干扰盐酸半胱氨酸含量的检测；流动相不干扰盐酸半 胱氨酸含量的检测；溶剂不干扰盐酸半胱氨酸含量的检测。
[0034] 实施例3 :线性实验
[0035] 精密量取盐酸半胱氨酸对照储备液（精密称取盐酸半胱氨酸对照品16. 15mg至 50ml容量瓶中，加流动相稀释定容即得，0. 323mg/ml)，分别取1、2. 5、5、6. 5、8ml至50ml容 量瓶中，稀释浓度分别为 6. 46 μ g/ml、16. 15 μ g/ml、32. 3 μ g/ml、41. 99 μ g/ml、51. 68 μ g/ ml。分别精密量取上述对照品溶液各10~30 μ 1，注入液相色谱仪，记录色谱图。以浓度为 横坐标（X)，峰面积为纵坐标（Y)，进行线性回归分析。测定结果如表2所示。
[0036] 表2 :盐酸半胱氨酸线性测定结果
[0037] CN 105181863 A 说明书 4/6 页
[0038] 实验结果表明：线性范围进样量在6. 46 μ g/ml~51. 68 μ g/ml，线性方程y = 3. 8563X+1. 5989 相关系数：r2= 0· 998
[0039] 实施例4 :精密度实验
[0040] 进样精密度：取H13080103S (品名：盐酸多巴酚丁胺葡萄糖注射液厂家：四川科 伦药业股份有限公司试制样品）样品溶液，按照标准项下盐酸半胱氨酸含量检测制备方 法，制备供试品溶液，按照盐酸半胱氨酸含量色谱条件进样分析，以盐酸半胱氨酸含量计算 RSD，应不大于2.0%。结果如表3所示。
[0041] 表3 :盐酸半胱氨酸一进样精密度
[0043] 实验结果表明：对H130803S批次样品，连续进样6次，含量RSD为0. 77%，精密度 良好。
[0044] 实施例5 :准确度实验
[0045] 按照处方（称取盐酸多巴酚丁胺I. 12g、葡萄糖50g、依地酸钙钠0· Ig至1000ml， 摇匀即得）配制空白辅料溶液，精密量取空白辅料溶液5ml至50ml容量瓶中，平行制备 9份样品；精密量取盐酸半胱氨酸对照品储备液（浓度：0. 323mg/ml)4ml、5ml、6ml，分别加 入含有空白辅料的容量瓶中，用流动相定容至50ml，每份平行制备3份样品，稀释至刻度。 按上述盐酸半胱氨酸含量测定方法进行测定。按以下公式计算回收率，回收率应在98%~ 102%之间。测定结果如表4所示。
[0046] 计算公式：回收率％=测得盐酸半胱氨酸含量/加入盐酸半胱氨酸含量X100%
[0047] 表4 :盐酸半胱氨酸含量一准确度测定结果 CN 105181863 A 说明书 5/6 页
[0049] 实验结果表明：回收率均在97%以上，RSD为2. 03%。回收率分别为：102. 96%、 102. 37 %、102. 35 %、99· 23 %、100. 54 %、101. 05 %、101. 33 %、96· 49 %、102. 56 %，平均回 收率为100. 99%。
[0050] 实施例6 :重复性实验
[0051] 取样品溶液，按照标准项下盐酸半胱氨酸含量检测制备方法，平行制备6份供试 品溶液，按照盐酸半胱氨酸含量色谱条件进样分析，以盐酸半胱氨酸含量计算RSD%，应不 大于2.0%。结果如表5所不。
[0052] 表5 :盐酸半胱氨酸一重复性
[0054] 实验结果表明：对H130803S批次样品，重复制6份样品，含量RSD为0. 29%，重复 性良好。
[0055] 实施例7 :稳定性实验
[0056] 取H13080103S样品，照盐酸半胱氨酸含量测定方法制备供试溶液，分别于0h，lh， 2h，4h，5h、8h小时取样测定。实验结果如表6所示。
[0057] 表6 :盐酸半胱氨酸含量一稳定性 CN 105181863 A 说明书 6/6 页
[0059] 实验结果表明：分别于0h，lh，2h，4h，5h，8h小时进样，RSD值为0. 96%，稳定性良 好。
[0060] 实施例8 :耐用性实验
[0061] 取H13080103S样品，照盐酸半胱氨酸含量测定方法制备供试溶液，分别于不同的 柱温（30 度、35 度、40 度、45 度）；流速（0.8ml/min、1.0ml/min、L2ml/min);波长（195nm、 200nm、205nm)考察调整试验条件后对盐酸半胱氨酸含量的影响。结果如表7所示。
[0062] 表7:耐用性考察结果
[0064] 实验结果表明：改变盐酸半胱氨酸含量测定的色谱条件，即色谱柱柱温（30度、35 度、40 度、45 度），流速（0· 8ml/min、1.0 ml/min、I. 2ml/min)，波长（195nm、200nm、205nm)，结 果各种条件下盐酸半胱氨酸理论塔板数均大于3000,含量RSD为I. 58%，耐用性良好。
【主权项】
1. 一种高效液相色谱法测定溶液中盐酸半胱氨酸的方法，其特征在于，它包括以下步 骤： A. 供试品溶液的制备：精密称取本品5ml，置于50ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度， 摇匀； B. 对照品溶液的制备：取盐酸半胱氨酸对照品15mg，精密称定，置50ml容量瓶中，用 流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml置50ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇 匀； C. 测定：精密量取对照品溶液及供试品溶液各20y1，注入高效液相色谱仪，记录色 谱图，按外标法以峰面积计算溶液中盐酸半胱氨酸的含量； 其中，色谱条件与系统适应性实验：色谱柱以阳离子交换树脂为填充剂；以PH值为 2~4的水为流动相；流动相的流速为0. 8~I. 2ml/min;检测波长为190~210nm;柱温 为20~50°C;理论板数按盐酸半胱氨酸计算应不低于3000,盐酸半胱氨酸的分离度应达到 1. 5〇2. 如权利要求1所述的一种高效液相色谱法测定溶液中盐酸半胱氨酸的方法，其特征 在于，所述流动相用lmol/L的硫酸溶液调节pH值。3. 如权利要求1所述的一种高效液相色谱法测定溶液中盐酸半胱氨酸的方法，其特征 在于，所述阳离子交换树脂色谱柱为AgilentZORBAXSB-C18液相色谱柱。4. 如权利要求1所述的一种高效液相色谱法测定溶液中盐酸半胱氨酸的方法，其特征 在于，所述按外标法以峰面积计算公式为供试品标示含量（％)=(供试品溶液峰面积/标准 品溶液峰面积）X100%。
【专利摘要】本发明公开了一种高效液相色谱法测定溶液中盐酸半胱氨酸的方法，属于分析化学领域，该方法的色谱条件和系统适应性实验：色谱柱以阳离子交换树脂为填充剂；以pH值为2～4的水为流动相；流动相的流速为0.8～1.2ml/min；检测波长为190～210nm；柱温为20～50℃；理论板数按盐酸半胱氨酸计算应不低于3000，盐酸半胱氨酸与其它峰的分离度应达到1.5。本发明采用高效液相色谱法对溶液中的盐酸半胱氨酸进行了测定，该法对设备的要求不高，流动相为水，安全环保，本发明方法操作简单、提高了检测的灵敏度和准确度，具有简便、准确、重复性好、专属性强的特点。
【IPC分类】G01N30/88, G01N30/06
【公开号】CN105181863
【申请号】CN201510438502
【发明人】邓茂林, 刘文军, 谭鸿波, 刘思川, 胡菲, 葛均友, 万阳浴, 吴小愚, 朱麟
【申请人】四川科伦药业股份有限公司
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2015年7月23日