，经过计算得到供试品溶液 中有关物质的含量； 其中，所述液相色谱的色谱条件如下： 色谱柱：Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18; 流动相:流动相A: 10mm〇l/L磷酸盐缓冲液，流动相B:选自甲醇或乙腈，进行梯度洗脱。2. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)系统适应性溶液的制备:称取 替格瑞洛、羟基物、氨基物、亚砜1和亚砜2、砜、光降解物、五元环羟基物、转位产物、乙酯化 物、过程中间体3,同置于25ml量瓶中，加水适量使溶解，再加水稀释至刻度，摇匀，制成每 lml中约含替格瑞洛0.2mg、各杂质各约5yg的溶液，作为系统适用性溶液。3. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)供试品溶液的制备:取替格瑞 洛原料药样品约25mg，精密称定，置25mL容量瓶中，加溶剂超声溶解并稀释至刻度，摇匀，即 得。4. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(3)对照溶液的制备:精密量取适 量替格瑞洛对照品，用35%乙腈溶液稀释制成每lml中约含5yg的溶液作为对照溶液（1 )，精 密量取替格瑞洛对照品5ml，置50ml量瓶中，用35%乙腈溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照溶 液⑵。5. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(4)精密量取系统适用性溶液10μ 1，注入液相色谱仪，记录色谱图；精密量取对照溶液（2)10μ1，注入液相色谱仪，记录色谱 图；精密量取供试品溶液与对照溶液(1)各1〇μ1，注入液相色谱仪，记录色谱图。6. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，液相色谱的色谱条件如下： 色谱柱：Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18,型号为：150X4.6mm，5ym; 流动相： 流动相A: 10mmol/L磷酸盐缓冲液； 流动相B:选自甲醇或乙腈； 梯度洗脱过程如下：检测波长：242nm; 流速：1 .Oml/min; 进样量1〇此； 柱温：30°C-40°C。7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 系统适用性溶液制备：称取替格瑞洛、羟基物、氨基物、亚砜1和亚砜2、砜、光降解 物、五元环羟基物、转位产物、乙酯化物、过程中间体3，同置于25ml量瓶中，加水适量使溶 解，制成每lml中含替格瑞洛0.2mg、各杂质各约5yg的溶液，作为系统适用性溶液； (2) 供试品溶液制备:取替格瑞洛原料药样品约25mg，精密称定，置25mL容量瓶中，加溶 剂超声溶解并稀释至刻度，摇匀，即得； (3) 对照溶液的制备：精密量取适量替格瑞洛对照品，用35%乙腈溶液稀释制成每lml 中约含5yg的溶液作为对照溶液（1 )，精密量取5ml，置50ml量瓶中，用35 %乙腈溶液稀释至 刻度，摇匀，作为对照溶液(2); (4) 精密量取系统适用性溶液ΙΟμΙ，注入液相色谱仪，记录色谱图，替格瑞洛峰与转位 产物峰的分离度应大于4.0 ;精密量取对照溶液(2) ΙΟμΙ，注入液相色谱仪，调节检测灵敏 度，主成分峰信噪比应大于10;精密量取供试品溶液与对照溶液（1)各1〇μ1，注入液相色谱 仪，记录色谱图； (5) 根据系统适用性溶液、对照溶液和供试品溶液的色谱图，经过计算得到供试品溶液 中有关物质的含量； 其中，液相色谱条件如下： 色谱柱 Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18,型号 150X4.6mm，5ym，P/N:993967-902; 流动相流动相A: 10mmol/L磷酸盐缓冲液 流动相B:乙腈 梯度洗脱程序：8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 系统适用性溶液制备：称取替格瑞洛、羟基物、氨基物、亚砜1和亚砜2、砜、光降解 物、五元环羟基物、转位产物、乙酯化物、过程中间体3，同置于25ml量瓶中，加水适量使溶 解，制成每lml中含替格瑞洛0.2mg、各杂质各约5yg的溶液，作为系统适用性溶液， (2) 供试品溶液制备:取替格瑞洛原料药样品约25mg，精密称定，置25mL容量瓶中，加溶 剂超声溶解并稀释至刻度，摇匀，即得， (3) 对照溶液的制备:精密量取适量，用35%乙腈溶液稀释制成每lml中约含5yg的溶液 作为对照溶液（1 )，精密量取5ml，置50ml量瓶中，用35%乙腈溶液稀释至刻度，摇匀，作为对 照溶液(2)， (4) 精密量取系统适用性溶液10μ1，注入液相色谱仪，记录色谱图，替格瑞洛峰与转位 产物峰的分离度应大于4.0;精密量取对照溶液(2) 10μ1，注入液相色谱仪;精密量取供试品 溶液与对照溶液(1)各1〇μ1，注入液相色谱仪，记录色谱图， (5) 根据系统适用性溶液、对照溶液和供试品溶液的色谱图，经过计算得到供试品溶液 中有关物质的含量； 其中，液相色谱条件如下： 色谱柱 Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18(150X4.6mm，5ym，P/N:993967-902); 流动相流动相A: lOmmol/L磷酸盐缓冲液 流动相B:甲醇 梯度洗脱程序：9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 系统适用性溶液制备：称取替格瑞洛、羟基物、氨基物、亚砜1和亚砜2、砜、光降解 物、五元环羟基物、转位产物、乙酯化物、过程中间体3，同置于25ml量瓶中，加水适量使溶 解，制成每lml中含替格瑞洛0.2mg、各杂质各约5yg的溶液，作为系统适用性溶液， (2) 供试品溶液制备:取本品约25mg，精密称定，置25mL容量瓶中，加溶剂超声溶解并稀 释至刻度，摇匀，即得， (3) 对照溶液的制备:精密量取适量，用35%乙腈溶液稀释制成每lml中约含5yg的溶液 作为对照溶液（1 )，精密量取5ml，置50ml量瓶中，用35%乙腈溶液稀释至刻度，摇匀，作为对 照溶液(2)， (4) 精密量取系统适用性溶液10μ1，注入液相色谱仪，记录色谱图，替格瑞洛峰与转位 产物峰的分离度应大于4.0;精密量取对照溶液(2) 10μ1，注入液相色谱仪;精密量取供试品 溶液与对照溶液(1)各1〇μ1，注入液相色谱仪，记录色谱图， (5) 根据系统适用性溶液、对照溶液和供试品溶液的色谱图，经过计算得到供试品溶液 中有关物质的含量； 其中，液相色谱条件如下： 色谱柱 Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18(150X4.6mm，5ym，P/N:993967-902); 流动相流动相A: lOmmol/L磷酸盐缓冲液 流动相B:甲醇 梯度洗脱程序：10.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述羟基物、氨基物、亚砜1和亚砜2、 砜、光降解物、五元环羟基物、转位产物、乙酯化物、过程中间体3及替格瑞洛结构式如下：p
【专利摘要】本发明的目的在于提供一种精密度高，操作简单，适用性强的替格瑞洛的有关物质的含量检测方法，包括以下步骤：(1)系统适用性溶液制备：取羟基物、氨基物、亚砜1和亚砜2、砜、光降解物、五元环羟基物、转位产物、乙酯化物、过程中间体3及替格瑞洛配制成系统适用性溶液；(2)供试品溶液制备：取替格瑞洛原料药配制成供试品溶液；(3)对照溶液的制备：取供试品溶液配制成对照溶液；(4)分别将系统适用性溶液、对照溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，得到色谱图；(5)根据系统适用性溶液、对照溶液和供试品溶液的色谱图，经过计算得到供试品溶液中有关物质的含量。
【IPC分类】G01N30/02
【公开号】CN105606741
【申请号】CN201610137235
【发明人】张存彦, 杨高顺, 王岚, 李宝齐, 王秋莹, 张丹扬, 董凯
【申请人】天津红日药业股份有限公司
【公开日】2016年5月25日
【申请日】2016年3月10日