步骤 如下：
[0?00] (1)准确称取10 .OOg样品于离心管中，加入50mL水，振荡直至样品被水充分浸润。 冷冻lOmin后移取50mL乙腈至离心管中，然后将离心管置于祸漩混合振荡仪上，以2000rpm 速率振荡lmin。将离心管置于-1(TC条件下保持lOmin，然后向离心管中加入20g无水硫酸镁 和5g氯化钠，5g柠檬酸钠和2.5g柠檬酸二氢钠，立即于漩涡混合振荡仪上，以2000rpm速率 振荡2min，然后以4000rpm速率离心10min，得到上清液。
[0101] (2)移取上清液l.OmL于1.5mL离心管中，加入150mg无水硫酸镁及25mg的PSA吸附 剂，于漩祸混合振荡仪上以2000rpm速率振荡2min，以6000rpm速率离心2min。吸取上清液经 0.22μπι有机相滤膜过滤，移取200yL，加入100yL乙腈，用超纯水稀释至1. OmL，得到待测样品 溶液。
[0102] 检测结果见表2。
[0103] 表2
[0104]
[0105] 由以上数据可以有出，采用本发明的方法，尤其是优选的方法能够更有效的检测 出农产品中农残的种类，并且还具有更低的检测限。
[0106] 实施例3
[0107]本实施例用于说明本发明提供的GC-Q-T0F/MS筛查豆类蔬菜中708种农残的侦测 方法
[0108] 按照实施例1中的方法对豆类蔬菜中的农残进行侦测，不同的是，样品为天津地区 ?角样品。
[0109] 采集天津地区市售豆角样品17个，检出24种农药残留，共计76频次，涉及样品16 个，具体结果见表3。
[0110] 表3
[0111]
[0112] 以检出频次较高的威杀灵为例，如图3所示，豆角中检测出4个碎片离子信息，用数 据库检索，与威杀灵比对，4个碎片尚子分子量偏差分数均在95分以上，保留时间偏差在 O.OOSmin以内，丰度最高的碎片离子质量偏差为4.73ppm(如图4所示），可以确认，豆角中有 威杀灵检出。
[0113] 实施例4
[0114] 本实施例用于说明本发明提供的GC-Q-T0F/MS筛查豆类蔬菜中708种农残的侦测 方法
[0115] 按照实施例1中的方法对豆类蔬菜中的农残进行侦测，不同的是，样品为河北地区 ?角样品。
[0116] 采集河北地区市售豆角样品7个，检出10种农药残留，共计22频次，涉及样品7个， 具体结果见表4。
[0117] 表4
[0118]
[0119] 以检出频次较高的腐霉利为例:如图5所示，豆角中检测出3个碎片离子信息，用数 据库检索，与腐霉利比对，3个碎片离子匹配分数均在98分以上，保留时间偏差在Omin以内， 丰度最高的碎片离子质量偏差为3.64ppm(如图6所示），可以确认，豆角中有腐霉利检出。
[0120] 以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中 的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这 些简单变型均属于本发明的保护范围。
[0121]另外需要说明的是，在上述【具体实施方式】中所描述的各个具体技术特征，在不矛 盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合。为了避免不必要的重复，本发明对各种可 能的组合方式不再另行说明。
[0122]此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本 发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。
【主权项】
1. 一种GC-Q-TOF/MS检测豆类蔬菜中708种农药残留的侦测方法，其特征在于:建立708 种农药T0F/MS数据库，同时对豆类蔬菜中708种农药进行定性侦测与确证;该方法包括以下 步骤： (1) 将农药标准品分别配制成l-5mg//L的标准溶液，设定条件下经GC-QT0F/MS-级模式 全谱数据测定每种标准溶液的全谱数据，分别得到每种农药的化学分子式、保留时间、碎片 离子精确质量数、离子丰度比； (2) 将步骤（1)中获得的一级模式全谱数据，经核实后的碎片离子全扫描质谱图导入 PCDL软件中，并与对应的农药信息相关联，建成T0F/MS精确质量数据库，用于数据检索分 析； (3) 与步骤(1)相同的设定条件下豆类蔬菜的测定待测样品中农药的全谱数据，得到其 含有的农药的化学分子式、保留时间、碎片离子精确质量数、离子丰度比； (4) 对样品测定结果经精确质量数据库检索，对符合鉴定依据的检出农药进行准确鉴 定，从而获得豆类蔬菜中的农残种类。2. 根据权利要求1所述的方法，其中，所述农药为表1中所示的708种农药。3. 根据权利要求1所述的方法，其中，所述豆类蔬菜优选选自由豆角、菜豆、豇豆、扁豆、 菜用大豆和食荚豌豆所组成的组中。4. 根据权利要求1所述的方法，其中，测定每种标准溶液中农药的全谱数据的条件包 括： (1) 色谱条件:色谱柱:VF-1701MS;色谱柱升温程序:30-50 °C保持0.5-5min，然后以SOSO °C/min 升温至 110-150 °C，再以 3-10°C/min 升温至 200-280°C， 随后以 5-15°C/min 升温至 250-320 °C，保持3-10min，再以5-20°C/min降温至200-290 °C，保持l_5min;载气：氦气；流 速:0.5-2mL/min;进样口温度:230-320 °C :无分流进样，溶剂延迟2-10min; (2) 质谱条件：离子源:EI;离子源温度：230-330°C，电子轰击源能量:50-lOOeV;气相-质谱接口温度：200-320°C ;扫描方式：以每秒2-10张谱图的方式进行T0F模式全扫描，质量 数范围 50_600amu。5. 根据权利要求1所述方法，其中，T0F/MS精确质量数据库能够将从待测样品中测定得 到的碎片离子的保留时间、精确质量数、离子丰度比的实测值，与T0F/MS精确质量数据库中 碎片离子的对应要素理论值检索比对，给出每个碎片离子的得分，进而给出平均分即目标 化合物的匹配度得分值;其中，碎片离子的保留时间偏差设定在±〇.5min，精确质量数偏差 设定为±100ppm。6. 根据权利要求5所述的方法，其中：通过如下方法对符合鉴定依据的检出农药进行准 确鉴定： 通过对特征离子检出情况及符合度，给出的得分值，对农药进行定性识别，其方法程序 为:对于样品中目标化合物的侦测，是将飞行时间质谱测得的化合物的保留时间、丰度最高 的7个碎片离子精确质量数、碎片离子丰度比的结果，与T0F/MS数据库检索比对，结果为检 出至少三个碎片离子，且综合得分大于60的农药被确定为检出农药。7. 根据权利要求1所述的方法，通过对豆类蔬菜进行前处理以获得豆类蔬菜的测定待 测样品，所述前处理方法包括以下程序： 样品制备:豆类蔬菜样品经0.5-5体积％醋酸乙腈匀浆提取，经脱水和离心、浓缩后，再 经Carbon/NH2柱净化，乙腈+甲苯洗脱残留农药，经再浓缩、过滤后制成待测样液a。8.根据权利要求7所述的方法，其中:所述豆类蔬菜样品量为5-20g; 优选的，所述〇. 5-5体积％的醋酸乙腈的用量为30-50mL; 优选的，所述匀浆提取条件为:转速12000_15000r/min，时间为0.5-5min; 优选的，所述经脱水是指在〇. 5-5体积％醋酸乙腈提取液中加入0.5-5g氯化钠，2-8g无 水硫酸镁，振荡l-l〇min; 优选的，所述离心是指在3000-5000r/min下离心l-10min; 优选的，所述浓缩是指取离心上清液10_30mL，在20-60°C水浴中旋转蒸发浓缩至约 0·5_2mL〇 9 ·根据权利要求8所述的方法，其中：所述Carbon/Mfe柱净化步骤如下：在Carbon/Mfe柱 中加入约l-3cm高无水硫酸钠，先用2-6mL-定比例的乙腈和甲苯混合溶液淋洗SPE柱，并弃 去流出液，当液面到达硫酸钠的顶部时，迅速将样品浓缩液转移至净化柱上，下接容器接 收;再每次用2-6mL乙腈和甲苯混合溶液洗涤样液瓶三次，并将洗涤液移入SPE柱中。再用优 选20-30ml的一定体积乙腈和甲苯混合溶液洗脱农药，合并洗脱液于容器中； 优选的，所述一定比例的乙腈和甲苯混合溶液，乙腈：甲苯体积比为2.5-3.5:1。10.根据权利要求8所述的方法，其中：所述经再浓缩、过滤后制成待测样液a是指权利 要求9所得到的洗脱液，在30-50°C水浴中旋转浓缩至约0.5-2mL，并将浓缩液置于氮气下吹 干，加入l-5mL的一定比例的乙腈和0-5体积％甲酸水混合溶液混匀，经0.18-0.22μπι滤膜过 滤后定容，得到待测样品溶液a。 优选的，所述一定比例的乙腈和0-5体积％甲酸水混合溶液，乙腈:0.1-5体积％甲酸水 2:7-9〇
【专利摘要】本发明涉及农残检测领域，提供了筛查豆类蔬菜中708种农残的侦测方法，在GC-Q-TOF/MS一级模式下采集农药标准物指定条件下的碎片离子全扫描质谱图，得到农药的化学分子式、保留时间、碎片离子精确质量数、离子丰度比，并导入PCDL软件，与对应的农药信息关联，形成数据库，在相同的设定条件下测定待测样品的全谱数据，得到全谱数据；对样品测定结果经精确质量数据库检索，对符合鉴定依据的检出农药准确鉴定，获得豆类蔬菜中的农残种类。本发明运用GC-Q-TOF/MS高分辨质谱建立的检测方法对豆类蔬菜中农药残留进行检测，优选结合特定的前处理，具有快速、高通量、高精度和高可靠性检测的特点。无需标准物作对照，同时对豆类蔬菜中708种农药进行定性侦测与确证。
【IPC分类】G01N27/62, G01N30/02
【公开号】CN105675701
【申请号】CN201511017880
【发明人】庞国芳, 范春林, 李岩, 胡雪艳
【申请人】中国检验检疫科学研究院
【公开日】2016年6月15日
【申请日】2015年12月28日