一种米兰花的水溶性成分分析方法
【专利摘要】本发明提供了一种米兰花的水溶性成分分析方法，旨在提供一种通过对米兰花分别进行水提得到提取液后，通过高分辨质谱LC?QTOF和chemspider数据库，确定得到12种相同的化合物，其匹配度均在95％以上；其技术方案是这样的：取米兰花样品约5g，加入50ml去离子水，在80℃加热回流30min，冷却后过滤，取滤液1ml，置于100ml容量瓶中，加去离子水稀释并定容，摇匀，过滤，上LC?QTOF测定；属于化学检测技术领域。
【专利说明】
一种米兰花的水溶性成分分析方法
技术领域
[0001] 本发明提供一种水溶性成分分析方法，具体的说是一种米兰花的水溶性成分分析 方法;属于化学检测技术领域。
【背景技术】
[0002] 米兰花，（拉丁文名:Aglaia odorata Lour)别名：四季米兰、碎米兰、米兰仔等，为 楝科(Meliaceae)米仔兰属常绿灌木或小乔木，适应温暖多湿的气候条件，成年植株需充足 阳光，产地于亚热带云南、福建、广东、广西、四川等地。其枝叶茂密，叶色葱绿光亮，一年内 多次开花，夏秋最盛。开花时清香四溢，气味似兰花，清新幽雅、舒人新身、芳香扑鼻，而花枝 叶可入药，具有治肠隔胀满、感冒胸闷、解醉酒、风湿关节炎、肿痛等功效。目前米兰花除了 用于观赏性花卉，还见于在两广地区常添加至黑茶中，既可增加黑茶的甘醇度，又可提升茶 的香味，而对其更多的功能性开发利用还鲜见报道。对于米兰花的研究，目前只有少量文献 对其醇提物和脂溶性物质有相关成分的研究记载，为了提升米兰花的附加值。
【发明内容】
[0003] 针对上述不足，本发明的目的提供一种米兰花的水溶性成分分析方法，该方法通 过对米兰花分别进行水提得到提取液后，通过高分辨质谱LC-QT0F和chemspider数据库，确 定得到12种相同的化合物，其匹配度均在95%以上。
[0004] 为解决上述技术问题，本发明提供的技术方法如下：
[0005] -种米兰花的水溶性成分分析方法，依次包括下述步骤：
[0006] 1)供试样品前处理：取米兰花样品约5g，加入50ml去离子水，在80°C加热回流 30min，冷却后过滤，取滤液lml，置于100ml容量瓶中，加去离子水稀释并定容，摇匀，过滤， 上LC-QT0F测定；
[0007] 其中:所述的色谱条件如下：
[0008] LC-QT0F色谱柱：Agilent poroshell 120EC-C18,3.0X100mm2.7micron;载气为 高纯氦气;进样量:5y 1;流速:0.5ml/min;流动相:A: 0.1 %甲酸-5mmo 1/L醋酸铵水溶液，B: 乙腈，梯度洗脱如下：0-5min，95%A、5%B;5-10min，90%A、10%B ;10-35min，65%A、35%B; 35-60min,5%A^95%B；60-60.1min,95%A^5%B；
[0009] 质谱条件
[0010] 离子源：ESI +，参比离子：121.050873, 322.048121 ,922.009798， 1221 ? 9906371521 ? 971475;扫描范围：100~1700amu，采集频率:3张秒。
[0011] 进一步的，上述的米兰花的水溶性成分分析方法，所述LC-QT0F色谱仪采用安捷伦 1290-6550C液相色谱-四级杆飞行时间质谱联用仪。
[0012] 本发明通过对米兰花分别进行水提得到提取液后，通过高分辨质谱LC-QT0F和 chemspider数据库，确定得到12种相同的化合物，其匹配度均在95 %以上，能为米兰花进一 步研究开发提供理依据附
【附图说明】
[0013]图1是提取物总离子流图。
【具体实施方式】
[0014] 下面结合【具体实施方式】，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对 本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围所做的有限次的修改，仍在本发明的 权利要求保护范围之内。
[0015] 实施例1
[0016] 仪器及其试剂
[0017]安捷伦1290-6550C液相色谱-四级杆飞行时间质谱联用仪；
[0018]超纯水器(ELGA PURELAB ClassicUVF);
[0019]乙腈(质谱级，美国Fisher公司），其它试剂均为分析纯（国药集团化学试剂有限公 司）。
[0020] 实验用水为经ELGA PURELAB ClassicUVF净化系统过滤的去离子水。
[0021] 本发明所涉及到的百分浓度，没有特别说明的，液体均为体积浓度，溶质为固体的 指质量浓度。
[0022] 米兰花，于云南、福建、广东、广西、四川药市各购进5批次样品，并于广西梧州市沙 头镇米兰花种植基地，取得5批次新鲜样品，共30批次不同区域样品。
[0023] 色谱条件
[0024] 色谱柱:Agilent poroshell 120EC_C18(3.0X 100mm 2.7micron);载气为高纯氦 气;进样量:5yl;流速:0.5ml/min;流动相:A: 0.1 %甲酸-5mmol/L醋酸铵水溶液，B:乙腈，梯 度洗脱见表1。
[0025] 表1梯度洗脱程序表
[0028]质谱条件
[0029] 离子源：ESI +，扫描范围：100~1700amu，采集频率：3张/秒；参比离子（amu): 121.050873，322.048121，922.009798，1221.990637，1521.971475。
[0030] 供试样品前处理:取米兰花样品约5g，加入50ml去离子水，在80 °C加热回流30min， 冷却后过滤，取滤液lml，置于100ml容量瓶中，加去离子水稀释并定容，摇匀，过滤，上LC-QT0F测定，测定结果见图1。
[0031]提取时间的比较:对80°C加热回流，采用提取时间15分钟，30分钟和60分钟，结果 发现提取时间为30分钟与60分钟的提取物数量一致，但多于15分钟的提取时间，故本发明 选用提取时间为30分钟。
[0032] 提取物分析:30批样品提取液，通过Agilent masshunter定型软件的解卷积功能， 查找匹配度于95%以上的化合物，共有12种相同的化合物，并利用12种化合物进行二级图 谱分析，与chemspider数据库匹配，获得化合物名称。见表2。
[0033] 表2 12种主要水溶性化合物
【主权项】
1. 一种米兰花的水溶性成分分析方法，其特征在于，依次包括下述步骤： 取米兰花样品约5g，加入50ml去离子水，在80 °C加热回流30min，冷却后过滤，取滤液 Iml，置于100mL容量瓶中，加去离子水稀释并定容，摇匀，过滤，上LC-QTOF测定； 其中:所述的色谱条件如下： LC-QTOF色谱柱：Agilent poroshell 120EC_C18,3.0X 100mm 2.7micron;载气为高纯 氦气;进样量:5μ1;流速:0.5ml/min;流动相:A:0.1 %甲酸-5mmol/L醋酸铵水溶液，B:乙腈， 梯度洗脱如下：0-511^11，95%厶、5%8;5-1011^11，90%厶、10%8 ;10-3511^11，65%厶、35%8;35-60min，5%A、95%B;60-60.1min，95%A、5%B; 质谱条件 离子源：ESI +，参比离子：121.050873，322.048121，922.009798， 1221 · 9906371521 · 971475;扫描范围：100~1700amu，采集频率:3张秒。2. 根据权利要求1所述的米兰花的水溶性成分分析方法，其特征在于，所述LC-QTOF色 谱仪采用安捷伦1290-6550C液相色谱-四级杆飞行时间质谱联用仪。
【文档编号】G01N30/02GK105929041SQ201610235113
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月15日
【发明人】陈学松, 罗达龙, 刘慧妍, 黄林杰
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所