苍术抗肿瘤提取物及其组合物的制备方法和医药应用
【专利摘要】本发明属医药技术领域，具体涉及一种维吾尔药苍术抗肿瘤提取物及其组合物的制备方法和其在制备预防及治疗乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、脑胶质瘤、肝癌等恶性肿瘤的药物中的应用。所述的苍术抗肿瘤提取物通过如下方法制备得到：先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:0，体积比）洗脱，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100：1-100:4，体积比）洗脱，石油醚：丙酮100：1-100:4洗脱液干燥或先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:6，体积比）洗脱，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:8，体积比）洗脱，石油醚：乙酸乙酯100:8洗脱液干燥即得。
【专利说明】
苍术抗肿瘤提取物及其组合物的制备方法和医药应用
技术领域
[0001] 本发明属医药技术领域，具体涉及一种维吾尔药苍术抗肿瘤提取物及其组合物的 制备方法和其制备预防及治疗肝癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、宫颈癌、脑胶质瘤 等恶性肿瘤药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 本品为菊科植物苍术，拉丁学名Atractylodes Lancea(Thunb. )DC.。多年生草本 植物。根状茎平卧或斜升，粗长或通常呈疙瘩状，生多数等粗等长或近等长的不定根。分布 黑龙江、辽宁、吉林、内蒙古、河北、山西、甘肃、陕西、河南、江苏、浙江、江西、安徽、四川、湖 南、湖北等地。朝鲜及苏联远东地区亦有分布苍术多生长在稀疏柞桦林、灌木林带山坡草 地、灌丛及林间草丛中，为稀见伴生植物。其中江苏是茅苍术的主要产区，称之地道苍术产 区，一向调供全国。用于湿阻中焦，脘腹胀满，泄泻，水肿，脚气痿蹙，风湿痹痛，风寒感冒，夜 盲，眼目昏涩。
[0003] 但是，对其抗肿瘤的有效成分一直不清楚，本发明通过系统地筛选研究，在研究苍 术抗肿瘤活性时意外地发现，苍术亦具有很好的乳腺癌、宫颈癌、肝癌、肺癌、胃癌、结肠癌、 胰腺癌、脑胶质瘤等恶性肿瘤的预防及治疗作用，可以应用癌症的预防和治疗。
【发明内容】
[0004] 本发明所解决的技术问题是提供一种苍术提取物。
[0005] 本发明还提供了以苍术提取物为主要活性成分的组合物。
[0006] 本发明同时提供了苍术提取物及其组合物的制备和在制备抗肿瘤药物中的应用。
[0007] 本发明是通过如下技术方案实现的：
[0008] 维吾尔药苍术经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶（SiO2)柱分离，上样后的硅 胶柱，用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（100:0-0:100)梯度洗脱（石油醚：乙酸乙酯，具体比 例见表1)，然后再用甲醇洗脱，各石油醚：乙酸乙酯比例混合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利 用体外抗肿瘤活性筛选体系测试其抗肿瘤活性，意外地发现先用石油醚：乙酸乙酯混合溶 剂（石油醚：乙酸乙酯，100:0,体积比）洗脱，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙 酸乙酯，100 :1-100:4,体积比）洗脱，石油醚：乙酸乙酯100 :1-100:4洗脱液干燥后，具有 显著地抗肿瘤活性。优选地，先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:0， 体积比）洗脱，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:4,体积比）洗脱， 石油醚：乙酸乙酯100 :1-100:4洗脱液干燥即得。抗肿瘤活性的化合物，可以通过以上方 法，得到富集，从而与其他杂质类成分分离开。该活性部位从未见文献报道，其100 :4洗脱 液的TLC分析表征如图1，TLC色谱条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮 (6:1:1)，显色方法：香草醛-浓硫酸显色。
[0009] 或维吾尔药苍术经甲醇超声提取，先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸 乙酯，100 :0-100:6,体积比）洗脱，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:8,体积比）洗脱，石油醚：乙酸乙酯100:8洗脱液干燥后，具有显著地抗肿瘤活性。优 选地，先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:6,体积比）洗脱，继用石油 醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:8,体积比）洗脱，石油醚：乙酸乙酯100:8 洗脱液干燥后即得。抗肿瘤活性的化合物，可以通过以上方法，得到富集，从而与其他杂质 类成分分离开。该活性部位从未见文献报道，其100 :8洗脱液的TLC分析表征如图2, TLC 色谱条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（6:1:1)，显色方法：香草醛-浓 硫酸显色。
[0010] 具体，发现过程如下：
[0011] 1、维吾尔药苍术经甲醇超声提取物的制备
[0012] 取维吾尔药苍术20g，经100mL甲醇超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物得提 取物 SN0135A，上样 SN0135A :1. 8499g，留样 SN0135A :0· 0975g。
[0013] 2、石油醚：乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱方法和结果
[0014] 取维吾尔药苍术20g，经100mL甲醇超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物 SN0135A，上样 SN0135A :1. 8499g，留样 SN0135A :0. 0975g，甲醇溶解，拌样硅胶 3. 0g，空白硅 胶IOg,玻璃柱内径2cm，石油醚-乙酸乙酯系统洗脱（条件见表1)，柱体积25ml，每个梯度 洗脱200ml，得到，各个浓度提取洗脱液的洗脱物，回收溶剂，即得，石油醚：乙酸乙酯梯度 洗脱提取物，收率见表1，TLC分析结果见图3,图4, TLC色谱条件：GF254硅胶板，展开系统： 石油醚：乙酸乙酯：丙酮（6:1:1)，显色方法：香草醛-浓硫酸显色。
[0015] 表 1
[0017]
[0018] 3、抗肿瘤活性筛选方法和结果
[0019] 1)实验条件
[0020] a)细胞株信息
[0021] 大鼠胶质瘤C6购于中国典型培养物保藏中心细胞库
[0022] b)药品及试剂
[0023] 样品无菌条件下，DMSO溶解配置成母液浓度为100mg/mL，使用时用RPMI-1640培 养液稀释至所需浓度（DMSO彡1%。）。
[0024] RPMI Medium 1640培养基干粉购于美国GIBCO公司。胎牛血清购于北京元亨圣马 生物技术研究所。Trypsin 1:250、二甲基二苯基四氮唑溴盐（MTT)。
[0025] c)仪器
[0026] CO2培养箱（SANYO,日本）
[0027] 垂直层流洁净工作台（上海上净净化设备有限公司）
[0028] 倒置生物显微镜（重庆光电仪器有限公司）
[0029] 低/高速台式离心机（上海安亭科学仪器厂）
[0030] 电子天平（奥豪斯仪器有限公司）
[0031] 酶标仪（伯乐生命医学产品有限公司）
[0032] 立式压力蒸汽灭菌器（上海申安医疗器械厂）
[0033] 鼓风干燥箱（上海跃进医疗器械厂）
[0034] PH 计（SART0RIUS，德国）
[0035] 2)实验方法和过程
[0036] 大鼠胶质瘤C6以4000/孔的密度铺于96孔板，每孔IOOul，12h后使用。各组 分以DMSO溶解为lOOmg/mL储存液，保存于-20°C待用。铺板后12h，观察细胞汇合率约 为40 %，加药，浓度均为100 μ g/mL，每个组分3个复孔。每板细胞设立二个对照组（培 养基+细胞；含〇. 1% DMSO培养基+细胞），3个空白孔（只有培养基）。加入药物24小 时后，加入20μ 1四甲基偶氮唑盐化学名为3-(4,5-二甲基噻唑）-2,5-二苯基四氮唑溴 盐（3-(4, 5-dimethyl_2thiazolyl)-2, 5-diphenyl-tetrazolium bromide, MTT),继续 培养4小时。完全弃去上清液，加入100 μ I DMSO,混匀使MTT完全溶解，去气泡。490nm 测定OD值。
[0037]
[0038] 3)实验结果
[0039] 表 2
[0044] 结果发现：
[0045] 本发明的优选方案如下：维吾尔药苍术经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱 分离，上样后的硅胶柱，用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱（石油醚：乙酸乙酯，比例 见表1)，各石油醚：乙酸乙酯比例混合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外抗肿瘤活性筛 选体系测试其抗肿瘤活性，意外地发现先石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:0,体积比）洗脱，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:4,体积比） 洗脱，石油醚：乙酸乙酯100:4洗脱液干燥后，具有显著地抗肿瘤活性。即，抗肿瘤活性的化 合物，可以通过以上方法，得到富集，从而与其他杂质类成分分离开。该活性部位从未见文 献报道，其TLC分析表征如图1。
[0046] 维吾尔药苍术经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱， 用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱（石油醚：乙酸乙酯，比例见表1)，各石油醚：乙酸 乙酯比例混合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外抗肿瘤活性筛选体系测试其抗肿瘤活 性，意外地发现先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:6,体积比）洗脱， 继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:8,体积比）洗脱，石油醚：乙酸乙 酯100:8洗脱液干燥后，具有显著地抗肿瘤活性，即，抗肿瘤活性的化合物，可以通过以上 方法，得到富集，从而与其他杂质类成分分离开。该活性部位从未见文献报道，其TLC分析 表征如图2。
[0047] 4、抗肿瘤有效提取物的提取方法研究
[0048] 1)提取溶剂的种类研究
[0049] 分别用甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂、乙醇水混合溶剂等有 机溶剂提取，并测试提取物对C6细胞的抗肿瘤活性，结果如下：
[0050] 表 3
[0052] 研究结果表明：提取用有机溶剂可以为甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水 混合溶剂、乙醇水混合溶剂。
[0053] 2)提取溶剂的用量研究
[0054] 分别用1、2、5、10、20、30、40、50倍（重量/体积比）有机溶剂提取，并测试提取物 的抗肿瘤活性，结果如下：
[0055] 表 4
[0056]
[0058] 提取物提取用有机溶剂用量为药材重量的2-50倍（重量/体积比）。
[0059] 3)干燥方法的研究
[0060] 分别用真空干燥法、冷冻干燥法、鼓风干燥、离心干燥、旋蒸干燥法等方法，对得到 的抗肿瘤活性部位进行干燥，以含水量、TLC、活性测试为指标，发现真空干燥法、冷冻干燥 法、鼓风干燥、离心干燥、旋蒸干燥法适用于对C6细胞抗肿瘤活性提取物进行干燥，其中， 最优为真空干燥法、冷冻干燥法。
[0061]表 5
LUUbJj 囚见，世小饥胛熘泥枓乂哪的刺食刀达刃：
[0064] 维吾尔药苍术经有机溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶 柱，先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，1〇〇:〇,体积比）洗脱2-50倍柱体 积，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:4,体积比）洗脱2-50倍柱体 积。石油醚：乙酸乙酯100:4洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为该提取物。其中最优为先 用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:4,体积比）洗脱10倍柱体积，继用 石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:4,体积比）洗脱15倍柱体积。
[0065]其中，
[0066] 1)提取物提取用溶剂可以为甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂、 乙醇水混合溶剂，最优条件为甲醇和95%乙醇。提取物提取用有机溶剂用量为药材重量的 2-50倍（重量/体积比）。
[0067] 2)提取物干燥方法可以为真空干燥法、冷冻干燥法、鼓风干燥、离心干燥、旋蒸干 燥法等，最优为真空干燥法、冷冻干燥法。
[0068] 维吾尔药苍术经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱， 用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:6,体积比）洗脱洗脱2-50倍柱体 积，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:8,体积比）洗脱洗脱2-50倍 柱体积。石油醚：乙酸乙酯100 :8洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为该提取物。以上条件 最优为先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:6,体积比）洗脱10倍柱 体积，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100 :8,体积比）洗脱15倍柱体 积。其中，
[0069] 1)提取物提取用溶剂可以为甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂、 乙醇水混合溶剂，最优条件为甲醇和95%乙醇。提取物提取用有机溶剂用量为药材重量的 2-50倍（重量/体积比）。
[0070] 2)提取物干燥方法可以为真空干燥法、冷冻干燥法、鼓风干燥、离心干燥、旋蒸干 燥法等，最优为真空干燥法、冷冻干燥法。
[0071] 5.苍术抗肿瘤有效提取物（先用100 :0的石油醚：乙酸乙酯洗脱，再用100 :4的 石油醚：乙酸乙酯洗脱后得到的提取物）的抗肿瘤活性研究
[0072] 利用各种肿瘤细胞，如乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、脑胶质瘤、肝 癌等恶性肿瘤细胞株，分别测试苍术抗肿瘤提取物的抗肿瘤活性，IC 5。结果如下：
[0073] 表 6
[0076] 因此，我们发现，苍术抗肿瘤提取物具备抗肿瘤活性，可望用于各种肿瘤如肝癌、 肺癌、胃癌、肠癌、脑胶质瘤等恶性肿瘤的预防及治疗。
[0077] 6、苍术抗肿瘤有效提取物的组合物及其制备方法研究
[0078] 1)固体分散体
[0079] 处方
[0081] 制备方法：
[0082] 称取苍术提取物和载体聚乙烯吡咯烷酮（PVP)按比例、1:2、1:4、1:6的质量比分 别放入烧杯中，加入无水乙醇，磁力搅拌器搅拌至苍术提取物和载体完全溶解，转入旋蒸仪 中除去有机溶剂，干燥，粉碎过80目筛，即得苍术提取物PVP包合物。
[0083] 2)环糊精包合物
[0084] 处方：
[0086] 制备方法：
[0087] 将β -环糊精与1~5倍水研匀，加苍术提取物（水难溶性的应先溶于少量有机 溶剂中）充分研磨至成糊状物，低温干燥即得。
[0088] 3)分散片处方：
[0089] 苍术提取物 十二烷基硫酸钠 t 预胶化淀粉 10 可洛性淀粉 100 交联聚维酮 1.0: 微晶纤维素 m 微分硅胶 3
[0090] 制备方法：
[0091] 1.苍术提取物淀粉分散体的制备，精密称取苍术提取物提取物，加入适量的十二 烷基硫酸钠，用70 %的乙醇溶解加入等比例的可溶性淀粉混合均匀后，在70°C的温度下蒸 干，粉碎，过100目筛；
[0092] 2.称取处方量，苍术提取物淀粉分散体，交联聚维酮，预胶化淀粉，用70%乙醇做 湿润剂，边加入边搅拌，制成湿颗粒过14目筛，室温下放置15min后，60°C烘箱烘干45min， 16目筛整粒，加入滑石粉和微分硅胶，混合均匀后，压片。
[0093] 7、苍术抗肿瘤有效提取物的检测方法研究
[0094] 我们发现，可以用薄层色谱的方法，很好地检测和标示苍术抗肿瘤提取物的特征， 见图1，图2。
[0095] 具体条件为：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（6:1:1)显色方法： 香草醛-浓硫酸显色。
【附图说明】：
[0096] 图1苍术活性提取物的TLC色谱图；
[0097] 图2苍术活性提取物的TLC色谱图；
[0098] 图3苍术得到的化学组分的TLC色谱图；
[0099] 图4苍术得到的化学组分的TLC色谱图。
[0100] 具体实例
[0101] 以下实施例表示本发明的实用性，本发明不受此限制。
[0102] 实施例1 :
[0103] 维吾尔药苍术20g，经100mL甲醇超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离， 上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:0,体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:0,体积比）洗脱15倍柱体积。石油醚：丙酮100 :4洗脱液经回收有机溶剂，真空干燥， 即为该提取物。
[0104] 实施例2 :
[0105] 维吾尔药苍术20g，经100mL乙醇超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离， 上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:0,体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:0,体积比）洗脱15倍柱体积。石油醚：丙酮100 :4洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥， 即为该提取物。
[0106] 实施例3 :
[0107] 维吾尔药苍术20g，经100mL丙酮超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离， 上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:0,体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:0,体积比）洗脱15倍柱体积。石油醚：丙酮100 :4洗脱液经回收有机溶剂，鼓风干燥， 即为该提取物。
[0108] 实施例4:
[0109] 维吾尔药苍术20g，经100mL氯仿超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离， 上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:0,体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:0,体积比）洗脱15倍柱体积。石油醚：丙酮100 :4洗脱液经回收有机溶剂，离心干燥， 即为该提取物。
[0110] 实施例5:
[0111] 维吾尔药苍术20g，经100mL乙酸乙酯超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分 离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙 酯，100:0,体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:0,体积比）洗脱15倍柱体积。石油醚：丙酮100 :4洗脱液经回收有机溶剂，旋蒸干燥， 即为该提取物。
[0112] 实施例6:
[0113] 维吾尔药苍术20g，经100mL甲醇水混合溶剂（甲醇：水=1:1)超声提取15min， 提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先用石油醚：乙酸乙酯 混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，1〇〇:〇,体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：乙酸乙酯混 合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，1〇〇:〇,体积比）洗脱15倍柱体积。石油醚：丙酮100 :4洗脱 液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该提取物。
[0114] 实施例7:
[0115] 维吾尔药苍术20g，经100mL乙醇水混合溶剂（乙醇：水=1:1)超声提取15min， 提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先用石油醚：乙酸乙酯 混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，1〇〇:〇,体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：乙酸乙酯混 合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，1〇〇:〇,体积比）洗脱15倍柱体积。石油醚：丙酮100 :4洗脱 液经回收有机溶剂，真空干燥，即为该提取物。
[0116] 实施例8:
[0117] 维吾尔药苍术20g，经100mL乙醇水混合溶剂（乙醇：水=90:10)超声提取15min， 提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），先用石油醚：乙酸乙酯 混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，1〇〇:〇,体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：乙酸乙酯混 合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，1〇〇:〇,体积比）洗脱15倍柱体积。石油醚：丙酮100 :4洗脱 液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该提取物。
[0118] 实施例9:
[0119] 取维吾尔药苍术20g，经100mL甲醇超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分 离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:6,体积比）洗脱20倍柱体积，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:8,体积比）洗脱15倍柱体积。石油醚：丙酮100 :8洗脱液经回收有机溶剂，真空干燥， 即为该提取物。
[0120] 实施例10 :
[0121] 取维吾尔药苍术20g，经100mL乙醇超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分 离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:6,体积比）洗脱20倍柱体积，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:8,体积比）洗脱15倍柱体积。石油醚：丙酮100 :8洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥， 即为该提取物。
[0122] 实施例11 :
[0123] 取维吾尔药苍术20g，经100mL丙酮超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分 离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:6,体积比）洗脱20倍柱体积，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:8,体积比）洗脱15倍柱体积。石油醚：丙酮100 :8洗脱液经回收有机溶剂，鼓风干燥， 即为该提取物。
[0124] 实施例12 :
[0125] 取维吾尔药苍术20g，经100mL氯仿超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分 离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:6,体积比）洗脱20倍柱体积，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:8,体积比）洗脱15倍柱体积。石油醚：丙酮100 :8洗脱液经回收有机溶剂，离心干燥， 即为该提取物。
[0126] 实施例13 :
[0127] 取维吾尔药苍术20g，经100mL乙酸乙酯超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱 分离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙 酯，100:6,体积比）洗脱20倍柱体积，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯， 100:8,体积比）洗脱15倍柱体积。石油醚：丙酮100 :8洗脱液经回收有机溶剂，旋蒸干燥， 即为该提取物。
[0128] 实施例14:
[0129] 取维吾尔药苍术20g，经100mL甲醇水混合溶剂（甲醇：水=1:1)超声提取15min， 提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），用石油醚：乙酸乙酯混 合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:6,体积比）洗脱20倍柱体积，继用石油醚：乙酸乙酯混合 溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:8,体积比）洗脱15倍柱体积。石油醚：丙酮100 :8洗脱液 经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该提取物。
[0130] 实施例15 :
[0131] 取维吾尔药苍术20g，经100mL乙醇水混合溶剂（乙醇：水=1:1)超声提取15min， 提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），用石油醚：乙酸乙酯混 合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:6,体积比）洗脱20倍柱体积，继用石油醚：乙酸乙酯混合 溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:8,体积比）洗脱15倍柱体积。石油醚：丙酮100 :8洗脱液 经回收有机溶剂，真空干燥，即为该提取物。
[0132] 实施例16 :
[0133] 取维吾尔药苍术20g，经100mL乙醇水混合溶剂（乙醇：水=90:10)超声提取 15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（2. Ocm内径小柱），用石油醚：乙酸 乙酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:6,体积比）洗脱20倍柱体积，继用石油醚：乙酸乙 酯混合溶剂（石油醚：乙酸乙酯，100:8,体积比）洗脱15倍柱体积。石油醚：丙酮100 :8洗 脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该提取物。
[0134] 实施例17 :固体分散体
[0135] 称取苍术提取物和载体聚乙烯吡咯烷酮（PVP)按比例、1:2、1:4、1:6的质量比分 别放入烧杯中，加入无水乙醇，磁力搅拌器搅拌至苍术提取物和载体完全溶解，转入旋蒸仪 中除去有机溶剂，干燥，粉碎过80目筛，即得苍术提取物PVP包合物。
[0136] 实施例18 :环糊精包合物
[0137] 将β -环糊精与1~5倍水研匀，加苍术提取物（水难溶性的应先溶于少量有机 溶剂中）充分研磨至成糊状物，低温干燥即得。
[0138] 实施例19 :分散片
[0139] 1.称取干燥的苍术提取物，加入适量的十二烷基硫酸钠，使用70%的乙醇充分溶 解，加入水溶性淀粉与苍术提取物（I : 1)，搅拌混合均匀，在70°C下干燥，粉碎，过100目筛， 得苍术提取物分散体。
[0140] 2.精密称取处方量，苍术提取物分散体，交联聚维酮，可压性淀粉，用70%乙醇做 湿润剂，边加入边搅拌，14目筛制成湿颗粒，室温下放置15min后，70°C烘箱烘干45min，16 目筛整粒，加入滑石粉和微分硅胶，混合均匀后，压片。
【主权项】
1. 一种维吾尔药苍术提取物，其特征为，维吾尔药苍术经有机溶剂超声提取，提取液 浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比100:0的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂 洗脱，继用体积比100 :1-100:4的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，石油醚：乙酸乙酯100 : 1-100:4洗脱液干燥即得； 或先用体积比1〇〇 =0-100:6的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，继用体积比100:8的 石油醚：丙酮混合溶剂洗脱，石油醚：乙酸乙酯100:8洗脱液干燥即得。2. 如权利要求1所述的维吾尔药苍术提取物，其特征为，先用体积比100:0的石油醚： 乙酸乙酯混合溶剂洗脱，继用体积比100 :4的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，石油醚：乙 酸乙酯100:4洗脱液干燥； 或先用体积比1〇〇: 6的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱洗脱，继用体积比100:8的 石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，石油醚：乙酸乙酯100:8洗脱液干燥。3. 如权利要求1或2所述的维吾尔药苍术提取物，其特征为，提取用溶剂为甲醇、乙醇、 丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂或乙醇水混合溶剂。4. 如权利要求1-3任何一项所述的维吾尔药苍术提取物，其特征为，石油醚：乙 酸乙酯混合溶剂的洗脱体积为2-50倍柱体积。5. 如权利要求1-4任何一项所述的维吾尔药苍术提取物，其特征为，先用石油醚：乙酸 乙酯混合溶剂洗脱10倍柱体积，再用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂15倍柱体积。6. -种药物组合物，其特征在于，包含权利要求1-5任何一项所述的提取物和药学上 可接受的载体。7. -种药物制剂，其特征在于，包含权利要求1-5任何一项所述的苍术提取物或权利 要求6所述的药物组合物。8. 权利要求1-5任何一项所述的苍术提取物或权利要求6所述的组合物或权利要求7 所述的药物制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。9. 如权利要求9所述的应用，其特征为，所述的肿瘤为乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰 腺癌、宫颈癌、脑胶质瘤或肝癌。10. 如权利要求1-5任何一项所述的苍术提取物，其特征在于，用TLC法检测，其色谱条 件为：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（6:1:1)显色方法：香草醛-浓硫酸 显色。
【文档编号】A61P35/00GK105982937SQ201510079852
【公开日】2016年10月5日
【申请日】2015年2月15日
【发明人】王金辉, 黄健, 李理
【申请人】沈阳药科大学