专利名称：：营养药物组合物在动物饲料中的新颖用途的制作方法营养药物组合物在动物饲料中的新颖用途本发明涉及营养药物组合物用于动物(特别是猪)的新颖用途，所述营养药物组合物包含活性成分苯甲酸、其衍生物或代谢产物。可体内产生苯甲酸的苯甲酸衍生物的具体例子包括苯甲酸的盐，例如碱金属苯甲酸盐、碱土金属苯甲酸盐和苯甲酸铵。本文使用术语"营养药物性的"表示在营养和药物应用领域二者中的有用性。因此，营养药物组合物可作为完全动物饲料(膳食)、作为对动物饲料的补充剂、和作为肠内或肠胃外应用的药物制剂(其可以是固体配方或液体配方)来使用。从EP-A-0683985已知包含苯甲酸或其盐的动物词料可以被用于最小化来自有机废物(特别是动物粪便和肥料)的有气味的氨的释放。目前已经惊奇地发现除了上述功能外，苯甲酸及其盐具有能够促进动物饲料中蛋白质可消化性(即促进氨基酸和氮同化作用)和提高总能量水平的优点。另外，已经发现苯甲酸促进动物饲料/饲料养分(feedstuff)可消化性，所述动物饲料/饲料养分含有玉米-大豆粉作为蛋白质来源的主要部分。本文使用的术语"能量"和"能量水平"表示通过热量计量测量所确定的膳食和回肠内容物(ilealcontent)的总能量水平。本文使用的术语"氮同化作用"和"总氮"表示根据冻干的膳食和回肠内容物所测定的总氮浓度。本文使用的术语"氨基酸同化作用"和"总氨基酸"表示在酸水解后根据冻干的膳食和回肠内容物测定的总氨基酸。因此，本发明涉及包括苯甲酸或苯甲酸衍生物(其能够体内提供游离苯甲酸)的组合物，其用于促进动物中蛋白质的可消化性和/或氨基酸的同化作用和/或提高动物饲料养分中的总能量水平。另外，本发明涉及苯甲酸用于提高动物中蛋白质可消化性和/或氨基酸和/或氮同化作用和/或提高动物饲料养分中总能量水平的新颖用途。苯甲酸或其能够体内提供苯甲酸的衍生物可以作为营养药物组合物的组分被施予动物，所述营养药物组合物被便利地喂养给动物。因此，苯甲酸及其衍生物可以作为动物词料或在其饮用水中的组分被适当地施予动物。被施予动物的苯甲酸或其衍生物的量在以喂养给动物的每份词料的总重为基础从0.001%-5%的范围内。然而，如果苯甲酸或其衍生物的功能也在于控制喂养这类膳食的动物的排泄物的pH，从而抑制氨从排泄物中释放，则该用量可以更高。这类更高的用量可适当地被限制为以动物饲料组合物总量为基础最大约10%。在本发明优选的实施方案中，苯甲酸或苯甲酸衍生物以下述用量被使用，所述用量足够提供每千克体重200mg到约每千克体重600mg的每日剂量，所述体重为所述苯甲酸或苯甲酸衍生物被施予的对象的体重。另外，本发明涉及喂养动物的方法，所述方法包括给动物提供包含蛋白质来源的词料养分，其中动物对氨基酸的同化作用与添加的氨基酸总量相比高于80%w/w，和/或所述动物对氮的同化作用与添加的氮总量相比高于74%w/w。最后，本发明还涉及用于提高可被动物代谢的氮和/或总氨基酸的量的方法。该方法包括提供给动物有效量的苯甲酸或苯甲酸衍生物用于其消化，所述苯甲酸或苯甲酸衍生物作为被动物消化的词料养分的成分存在。用于动物饲料组合物的典型配方示于下表1中，其中所有以按重量计%示出的用量被喂养给猪表l<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>因此，苯甲酸或其衍生物可以与存在于动物词料组合物(膳食)中的常规成分(例如碳酸钙，电解质如氯化铵，蛋白质如大豆粉、小麦、淀粉、葵花子粉、玉米、肉和骨粉，氨基酸，动物脂肪，维生素和微量矿物质)组合使用。在这样的组合物中，电解质与苯甲酸或其衍生物的比例适当地在从0.5:1至lj5:1w/w的范围内，优选从1.5:1至(J3.1w/w。苯甲酸或其衍生物在动物(例如家禽、猪或牛，特别是猪)中促进蛋白质的可消化性和氨基酸与氮的同化作用时尤其有效。参考以下实施例进一步说明了本发明，所述实施例示明了苯甲酸在回肠-直肠吻合(ileo-rectalanastomosed)的小猪中对氮、能量和氨基酸的回肠表观可消化性的作用。动物试验使用十只LargeWhitexLandracexPi6train小猪。动物得自GAECLeclerc，F-68150Ostheim并且在实验开始时为60天大。根据Laplaceetal.(1994)所述技术对每个动物进行回肠-直肠吻合术。手术后使小猪单独住在动物室中的不锈钢代谢笼中，所述动物室处于受控的温度(22。C)、湿度(50%)、通风(IIOOm3/h)和光照(12小时光/12小时暗循环)下。动物具有10天的手术后恢复周期，还需要稳定饲料摄入。同时，它们被无限制地喂养给小猪用的基于植物的膳食，并可随意接触自来水。在实验周期中，每只小猪被交替地喂养给补充有或没有补充0.5%苯甲酸的基于植物的膳食。饲料组成和2种实验膳食分别展示于表2和表3中。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>以0.4%的浓度向所有的膳食中添加不可消化的示踪剂三氧化二铬，而测量回肠表观可消化性(ilealapparentdigestibility)。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>体验由2段12天的周期组成，所述每个12天的周期各被分为10个适应日和2个回肠内容物取样日。设计方案展示于表4中。每个动物交替地用每种膳食喂养，从而每种膳食被测试10次。每天控制动物的健康状况。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>为了进行可消化性评估，每天收集回肠内容物样品，在2个取样曰中从8AM到3PM—产生回肠内容物样品就收集。在每次取样后随即称重收集的含量并冷冻于-8(TC。将来自相同小猪的所有每日样品合并(bulked)。分析样品前将其冻干并研磨成精细粉末。对每种膳食获得总计20个样品。分析方法将20g膳食和15g回肠样品在105"C干燥过夜后，根据标准的AssociationofOfficialAnalyticalChemists(AOAC)步骤(1990)测定冻干样品的干物质含量。在与氧化剂于35(TC下矿化20分钟后，通过感应耦合等离子体-原子发射光谱法(ICP)测定膳食和回肠样品的三氧化二铬水平。通过HPLC测定词料中的苯甲酸含量。使用热量计IKAC7000，以冻干的膳食和回肠内容物为基础测定总能量水平。针对每个样品对总计约400mg的冻干粉末分析三次。使用氮分析仪LECOFP-428，以冻干的膳食和回肠内容物为基础测定总氮浓度。针对每个样品对总计约100mg的冻干粉末分析三次。在酸水解后以冻干的膳食和回肠内容物为基础测定总氨基酸。省略色氨酸分析。在用甲酸和过氧化氢氧化然后用6NHC1在ll(TC酸水解后，以磺基丙氨酸和甲硫氨酸分析Cys和Met。在用6NHC1在ll(TC酸水解后分析所有其它氨基酸。利用WatersAccQ.Fluor试剂在衍生后测量各种氨基酸浓度，并通过在Pico.TagC18柱上洗脱后通过荧光检测由反相HPLC定量。用WatersMillenium软件记录数据用于数据采集、积分和处理。使用峰面积用内标实现定量。详细的方法描述于RocheR&DMemorandumB-171'680中。针对每种样品对约50mg的冻干粉量分析两次。数据分析用干物质、三氧化二铬和膳食测试的参数浓度校正，使用下式将冻千回肠内容物的所有测试的参数水平表达为％表观可消化性<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>Ci=回肠内容物中的参数浓度(％干物质)Cd=膳食中的参数浓度(％干物质)Mi=回肠内容物中的三氧化二铬浓度(。/。干物质)Md=膳食中的三氧化二铬浓度(％干物质)对每个测试组而言，数据的统计分析涉及均值和均值标准差的计算以及方差分析，随后是Student's"t"检验，使得组A和补充有苯甲酸的组B之间的组差异显著性对于氨基酸而言达到10%的概率，对于氮和能量而言达到5%的概率。錢在研究开始时，所有的小猪已经从麻醉和手术中恢复。实验期间没有动物显示生病或中毒的任何症状。所有的喂养和所有的取样均可完成。饲料含量中苯甲酸的结果展示于表5中。每种膳食分析两次。<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>补充的饲料中观察到的苯甲酸含量与膳食B的设计包含水平一致。能量的回肠表观可消化性的结果示于图1中。图1示出了用补充有0.5%苯甲酸或未补充苯甲酸的膳食喂养的小猪中的回肠表观能量可消化性。在对照未补充的膳食中，回肠表观能量可消化性为69.5士4.6%。与对照组相比，0.5Q/^苯甲酸补充组的回肠表观能量可消化性为72.6±4.7%，代表了4.4y。的统计学显著(pS0.05)提高。总氮的回肠表观可消化性的结果示于图2中。在对照未补充的膳食中，回肠表观总氮可消化性为73.8±5.8%。与对照组相比，0.5%苯甲酸补充组的回肠表观总氮可消化性为77.7±3.1%，代表了5.3%的统计学显著(pS0.05)提高。总氨基酸的回肠表观可消化性的结果示于图3中。在对照未补充的膳食中，回肠表观总氨基酸可消化性为79.7±4.8%。与对照组相比，0.5%苯甲酸补充组的回肠表观总氨基酸可消化性为82.0±2.7%，代表了2.9%的统计学显著(pS0.10)提高。必需氨基酸不能被机体以足够的量合成，因此必须由饲料蛋白质降解提供。猪的必需氨基酸为Arg、Cys2、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Thr、Tyr、Val。必需氨基酸的回肠表观可消化性的结果示于图4中。在对照未补充的膳食中，回肠表观必需氨基酸可消化性为80.4±4.9%。与对照组相比，0.5%苯甲酸补充组的回肠表观必需氨基酸可消化性为82.7±2.6%，代表了2.9。/。的统计学显著(p《0.10)提高。存在3种含硫氨基酸甲硫氨酸(Met)、半胱氨酸(Cys)和胱氨酸(Cys2)。在生理条件下，Cys和CysZ是天然互相转化的。除了Met和Cys对猪而言是必需氨基酸的事实外，它们还具有作为所有蛋白质的组分的关键作用。另外，Met还在蛋白质合成中起重要作用并作为甲基提供者，Cys参与硫的储存和转运以及多种合成，如谷胱甘肽的合成。Cy^也是皮肤形成所必需的。含硫氨基酸的回肠表观可消化性的结果示于图5中。在对照未补充的膳食中，回肠表观含硫氨基酸可消化性为77.8±4.9%。与对照组相比，0.5%苯甲酸补充组的回肠表观含硫氨基酸可消化性为80.1±3.5%，代表了2.9。/。的统计学显著(pS0.10)提高。支链氨基酸(Leu、lie和Val)是维持肌肉组织和保持作为肌肉能量来源的糖原储存所需的。它们也有助于在锻炼中防止蛋白质降解从而导致更大的瘦肉质量。支链氨基酸的回肠表观可消化性的结果示于图6中。在对照未补充的膳食中，回肠表观支链氨基酸可消化性为80.4±5.3%。与对照组相比，0.5%苯甲酸补充组的回肠表观支链氨基酸可消化性为82.7±2.8%，代表了2.9Q/。的统计学显著(p幼.10)提高。赖氨酸在严格意义上而言是完全不能体内生物合成的必需氨基酸。赖氨酸对生长具有显著的作用。植物蛋白中的低赖氨酸含量代表了营养方面的显著问题。赖氨酸的回肠表观可消化性的结果示于图7中。在对照未补充的膳食中，回肠表观赖氨酸可消化性为79.5±5.7%。与对照组相比，0.5%苯甲酸补充组的回肠表观赖氨酸可消化性为82.3±2.8%，代表了3.5%的统计学显著(pS0.10)提高。苏氨酸像赖氨酸一样，是对于生长而言营养学不可或缺的必需氨基酸。动物从蛋白质来源利用苏氨酸的效率是困难的，因为难以破坏苏氨酸所处位置的肽键。为此，苏氨酸被认为是位于赖氨酸之后第二个需要在膳食中补充的氨基酸。苏氨酸的回肠表观可消化性的结果示于图8中。在对照未补充的膳食中，回肠表观苏氨酸可消化性为76.0±5.5%。与对照组相比，0.5%苯甲酸补充组的回肠表观苏氨酸可消化性为78.0±3.9%，代表了2.7%的统计学显著(pS0.10)提高。氨基酸首先是蛋白质合成的基石，并因此是肌肉生长的基础。它们中的大部分是生糖原的，一些还涉及脂肪酸代谢。氨基酸参与氨解毒(ammoniadetoxification),是谷胱甘肽、肌酸、激素、神经肽、维生素和其它生理学蛋白化合物的前体。个体氨基酸的回肠表观可消化性的结果示于表6中。表6<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>权利要求1.包含苯甲酸或苯甲酸衍生物的组合物，其用于提高动物中蛋白质的可消化性和/或氨基酸和/或氮的同化作用。2.包含苯甲酸或苯甲酸衍生物的组合物，其用于提高动物饲料养分中的总能量水平。3.根据权利要求1或2的组合物，其中所述动物选自家禽、猪和牛。4.根据权利要求1到3中任一项的组合物，其包含玉米-大豆粉作为蛋白质来源的主要部分。5.苯甲酸或苯甲酸衍生物用于提高动物中蛋白质可消化性和/或氨基酸和/或氮同化作用和/或提高动物饲料养分中总能量水平的用途。6.权利要求5所述的用途，其中所述动物选自家禽、猪和牛。7.苯甲酸或苯甲酸衍生物在制造营养药物组合物中的用途，所述营养药物组合物用于提高动物中蛋白质的可消化性和/或氨基酸和/或氮的同化作用和/或提高动物词料养分中的总能量水平。8.根据权利要求7的用途，其中所述动物选自家禽、猪和牛。9.根据权利要求5到8中任一项的用途，其中所述苯甲酸或苯甲酸衍生物以下述用量被使用，所述用量足够提供每千克体重200mg到约每千克体重600mg的每日剂量，所述体重为所述苯甲酸或苯甲酸衍生物被施予的对象的体重。10.用包含蛋白质来源的饲料养分饲养动物的方法，其中所述动物对氨基酸的同化作用与添加的氨基酸总量相比高于80%,和/或所述动物对氮的同化作用与添加的氮总量相比高于74%。11.根据权利要求10的方法，其中有效量的苯甲酸或苯甲酸衍生物作为所述饲料养分的成分存在。12.用于提高动物饲料养分中可代谢的氮和/或总氨基酸的量的方法，所述方法包括对消化所述饲料养分的所述动物提供有效量的苯甲酸或苯甲酸衍生物，所述苯甲酸或苯甲酸衍生物作为所述动物消化的词料养分的成分存在。全文摘要本发明涉及包含苯甲酸或苯甲酸衍生物的组合物。已经惊奇地发现苯甲酸及其盐具有能够促进动物饲料中蛋白质可消化性(即促进氨基酸和氮同化作用)和提高总能量水平的优点。另外，已经发现苯甲酸促进下述动物饲料的可消化性，所述动物饲料含有玉米-大豆粉作为饲料膳食的主要部分。苯甲酸或其衍生物能够在动物的饲料组合物或其饮用水中被施予动物。其在猪中尤其有效。文档编号A23K1/18GK101360426SQ200680051013公开日2009年2月4日申请日期2006年12月28日优先权日2006年1月13日发明者卡洛斯·斯莫思-奴恩斯,帕提克·谷根布尔申请人:帝斯曼知识产权资产管理有限公司