专利名称：：一种饲养鲍鱼用复合免疫增强剂及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及水产养殖业伺料添加剂及其制备，属于一种饲养鲍鱼用复合免疫增强剂及其制备方法。
背景技术：
：在全世界范围内水产养殖业蓬勃发展的同时，由于养殖密度的不断加大、人工饵料的投喂量不断增多等原因，造成了水环境的不断恶化，导致了各类细菌病、病毒病的频繁发生，严重阻碍了水产养殖业的持续健康发展。目前己从生理、病理、种质、营养、生态、流行特点等方p进行了大量研究。以使用抗生素为代表的传统治疗方法，因其易导致养殖动物产生抗药性且易存残留等缺点，在各国逐渐被禁用和取代。疫苗虽然可以成为控制鱼类疾病最直接有效的方法，但是，由于免疫反应具有特异性，一种疫苗只能特异性地预防相应的某种疾病，所以实际作用也非常有限，免疫机制的研究是合理有效防治各类病害的根本和依据，近来免疫学研究已成为水产动物病害研究的执占之一。"、、'、、、0免疫增强剂可以通过提高动物机体自身的免疫力从而增强抗病能力，虽然免疫增强剂在鱼、虾、蟹上的应用已经有较多的报道，但是在鲍鱼饲料中添加免疫增强剂来提高机体的免疫力国内外还很少报道。申请号为200410035416.3的中国专利指出一种复方免疫中草药作为鲍鱼的免疫增强剂，但是由于中草药作为免疫增强剂发挥作用时间周期长，而且对词料的适口性^产生'定的影响。在实际生产中，鲍鱼特别是鲍苗的免疫力很低、成活率不高，严重制约着鲍鱼的规模化养殖。而用复合免疫增强剂作为饲料添加剂来提高鲍鱼的免疫力到目前为止还未曾出现过。因此，研制复合免疫增强剂来提高鲍鱼的免疫力，对提高鲍鱼成活率及其鲍鱼养殖业的健康发展具有十分重要的意义。
发明内容本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，针对性腺快速发育期(II-III期)的鲍鱼，从提高鲍鱼自身非特异性免疫功能入手，利用酚氧化酶法(PO)和吖啶橙检测法(AO)对维生素、寡糖、褐藻胶、鱼油等配置的多种免疫增强剂进行筛选，提供一种饲养鲍鱼用复合免疫增强剂。本发明另一个目的是提供一种饲养鲍鱼用复合免疫增强剂的制备方法。为达到上述目的，本发明的主要技术方案如下一种词养鲍鱼用复合免疫增强剂，其特征在于该免疫增强剂由褐藻胶寡糖、琼胶寡糖、维生素C，E、褐藻酸钠、磷酸二氢钾、米糠和鱼油组成，每100重量份的复合免疫增强剂中分别含有褐藻胶寡糖38重量份、琼胶寡糖212重量份、维生素C15重量份，维生素E16重量份、褐藻酸钠35重量份、磷酸二氢钾14重量份、米糠2040重量份、鱼油2069重量份。上述的一种饲养鲍鱼用复合免疫增强剂的制备方法，其特征在于其具体歩骤及其工艺条件如下步骤一固体原料粉碎、过筛分别将固体原料维生素C、米糠分别粉碎，至原料细度达过60目筛后备用；步骤二原料的初步充分混匀将38重量份的褐藻胶寡糖，212重量份的琼胶寡糖，15重量份维生素C，2040重量份的米糠加入搅拌设备，搅拌至混合物的均匀度变异系数CV小于4.8。/。，得到固体原料初混物；步骤三固体原料的再次充分混匀按照配方将16重量份维生素E、14重量份的磷酸二氢钾加至步骤二得到的固体原料混合物中，再次混匀，混合物的均匀度变异系数CV小于6%，得到固体原料混合物；步骤四原料的调制将2069重量份的鱼油加入至步骤三得到的固体原料混合物中，充分混匀，再加入35重量份的褐藻酸钠作为粘合剂。步骤五制粒将步骤四处理的原料混合物压制成粒，得到100重量份的成品，饲养鲍鱼用复合免疫增强剂。所述褐藻胶寡糖是指将褐藻胶进行常规生物技术处理，制备出平均分子量在4002000Da的低聚糖。所述的琼胶寡糖是指将琼胶进行常规生物技术处理，制备出平均分子量在3001800Da，以卩-D-半乳糖为还原性末端和以3，6-内醚a-L半乳糖为非还原性末端的琼低聚糖系列的活性琼胶寡糖。本发明与现有技术相比具有如下优点1、本发明作为饲料添加剂性能好在现有的商业词料中按0.11%的比例添加本发明的复合免疫增强剂，明显提高鲍鱼的非特异性免疫力，增强鲍鱼血细胞吞噬功能，有效去除鲍鱼体内的自由基，通过激活鲍鱼自身Pro酶原系统，显著提高Pro酶活力；进而提高鲍鱼对外界环境的抗病、抗逆能力，从而有效的预防养殖病害的发生，投喂含该复合免疫增强剂饲料组的鲍鱼，非特异性免疫力显著提高，其中，血细胞吞噬活性提高1525%，Pro酶活力提高1830%，SOD酶活提高2538%，ACP酶活提高1930%。2、本发明有效提高鲍鱼养殖成活率在现有的商业饲料中按比例添加本发明的复合免疫增强剂，鲍鱼养殖成活率提高了1525%(详见表1)，有效提高鲍鱼的产量、降低鲍鱼养殖的成本，十分有利于发展鲍鱼的规模化养殖，从而进一步推动鲍鱼养殖业的健康发展，满足市场的需求。3、本发明的制备方法简单易行，设备要求低，工艺合理，加工成本低廉，有利于工业化生产。具体实施方式下面结合实施例，对本发明作进一步地详细说明，但实施方式并不仅限于此。步骤一将固体原料1重量份维生素C、20重量份的米糠分别粉碎，至原料细度达过60目筛后备用；步骤二将3重量份的平均分子量为400Da的褐藻胶寡糖，2重量份的以(3-D-半乳糖为还原性末端和以3，6-内醚a-L半乳糖为非还原性末端，平均分子量为300Da的琼胶寡糖，混合步骤一的1重量份的维生素C、20重量份的米糠，加入搅拌设备，搅拌至混合物的均匀度变异系数CV为4.8%，得到固体原料初混物；步骤三将1重量份维生素E、1重量份的磷酸二氢钾加至步骤二得到的固体原料混合物中，再次混匀，混合物的均匀度变异系数CV为6。/。，得到固体原料混合物；步骤四将69重量份的鱼油加入至步骤三得到的固体原料混合物中，充分混匀，再加入3重量份的褐藻酸钠作为粘合剂；步骤五将步骤四处理的原料混合物压制成粒，得到100重量份的成品，即饲养鲍鱼用复合免疫增强剂。实施例2步骤一将固体原料3重量份维生素C、30重量份的米糠分别粉碎，至原料细度达过60目筛后备用；步骤二将6重量份的平均分子量为1200Da的褐藻胶寡糖，8重量份的以(3-D-半乳糖为还原性末端和以3，6-内醚a-L半乳糖为非还原性末端，平均分子量为1000Da的琼胶寡糖，混合步骤一的3重量份的维生素C、30重量份的米糠,加入搅拌设备，搅拌至混合物的均匀度变异系数CV为4%，得到固体原料初混物；步骤三将3重量份维生素E、2重量份的磷酸二氢钾加至步骤二得到的固体原料混合物中，再次混匀，混合物的均匀度变异系数CV为4。/。，得到固体原料混合物；步骤四将44重量份的鱼油加入至步骤三得到的固体原料混合物中，充分混匀，再加入4重量份的褐藻酸钠作为粘合剂；步骤五将步骤四处理的原料混合物压制成粒，得到100重量份的成品，即饲养鲍鱼用复合免疫增强剂。实施例3步骤一将固体原料5重量份维生素C、40重量份的米糠分别粉碎，至原料细度达过60目筛后备用；步骤二将8重量份的平均分子量为2000Da的褐藻胶寡糖，12重量份的以P-D-半乳糖为还原性末端和以3，6-内醚a-L半乳糖为非还原性末端，平均分子量为1800Da的琼胶寡糖，混合步骤一的5重量份的维生素C、40重量份的米糠，加入搅拌设备，搅拌至混合物的均匀度变异系数CV为2%，得到固体原料初混物；步骤三将6重量份维生素E、4重量份的磷酸二氢钾加至步骤二得到的固体原料混合物，再次混匀，混合物的均匀度变异系数cv为3y。，得到固体原料混合物；步骤四将20重量份的鱼油加入至步骤三得到的固体原料混合物中，充分混匀，再加入5重量份的褐藻酸钠作为粘合剂；步骤五将步骤四处理的原料混合物压制成粒，得到100重量份的成品，即饲养鲍鱼用复合免疫增强剂。应用实施例为考察本发明复合免疫增强剂在饲养鲍鱼中应用的效果，现制备两类实验饲料，饲料1为鲍鱼的基础饲料鱼粉、大豆栢、褐藻酸钠、淀粉、海藻粉、维生素及矿物质预混料等原料配制而成，即不含免疫增强剂的饲料。各词料成分均经超微粉碎后过筛，微量成分采用逐渐扩大混合，所有组分充分搅拌均匀后，加30%左右的水，用双螺旋挤条机制成鲍鱼饲料，风干后，置于-2CrC冰箱中保存。饲料2、3、4分别在饲料1配方的基础上添加0.1%、0.5%、1。/。的本发明的饲养鲍鱼用复合免疫增强剂。实验选择附肢完整，个体均匀的健康的鲍鱼，实验设四个饲料组第一饲料组、第二词料组、第三饲料组和第四饲料组，分别饲喂饲料1、饲料2、饲料3和饲料4，进行养殖试验，常规喂养，为期为80天。80天后，取鲍鱼血淋巴进行非特异性相关指标进行分析。结果表明词料2、饲料3和词料4的词料效果明显优于词料1。表1为饲料中未添加和添加饲养鲍鱼用复合免疫增强剂对鲍鱼免疫力的影响对比。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>权利要求1、一种饲养鲍鱼用复合免疫增强剂，其特征在于该免疫增强剂由褐藻胶寡糖、琼胶寡糖、维生素C，E、褐藻酸钠、磷酸二氢钾、米糠和鱼油组成，每100重量份的复合免疫增强剂中分别含有褐藻胶寡糖3～8重量份、琼胶寡糖2～12重量份、维生素C1～5重量份，维生素E1～6重量份、褐藻酸钠3～5重量份、磷酸二氢钾1～4重量份、米糠20～40重量份、鱼油20～69重量份。2、权利要求1所述的一种饲养鲍鱼用复合免疫增强剂的制备方法，其特征在于其具体步骤及其工艺条件如下-步骤一固体原料粉碎、过筛分别将固体原料维生素C、米糠分别粉碎，至原料细度达过60目筛后备用；步骤二原料的初步充分混匀将38重量份的褐藻胶寡糖，212重量份的琼胶寡糖，15重量份维生素C，2040重量份的米糠加入搅拌设备，搅拌至混合物的均匀度变异系数CV小于4.87。，得到固体原料初混物；步骤三固体原料的再次充分混匀按照配方将16重量份维生素E、14重量份的磷酸二氢钾加至步骤二得到的固体原料混合物中，再次混匀，混合物的均匀度变异系数CV小于6%，得到固体原料混合物；步骤四原料的调制将2069重量份的鱼油加入至步骤三得到的固体原料混合物中，充分混匀，再加入35重量份的褐藻酸钠作为粘合剂；步骤五制粒将步骤四处理的原料混合物压制成粒，得到100重量份的成品，饲养鲍鱼用复合免疫增强剂。3、根据权利要求2所述的一种饲养鲍鱼用复合免疫增强剂的制备方法，其特征在于所述褐藻胶寡糖是指将褐藻胶进行常规生物技术处理，制备出平均分子量在4002000Da的低聚糖。4、根据权利要求2所述的一种饲养鲍鱼用复合免疫增强剂的制备方法，其特征在于所述的琼胶寡糖是指将琼胶进行常规生物技术处理，制备出平均分子量在3001800Da，以(3-D-半乳糖为还原性末端和以3，6-内醚a-L半乳糖为非还原性末端的琼低聚糖系列的活性琼胶寡糖。全文摘要一种饲养鲍鱼用复合免疫增强剂及其制备方法，属于水产养殖业饲料添加剂及其制备技术。每100重量份的复合免疫增强剂中分别含有重量份褐藻胶寡糖3～8、琼胶寡糖2～12、维生素C1～5，维生素E1～6、褐藻酸钠3～5、磷酸二氢钾1～4、米糠20～40、鱼油20～69。该制备方法包括将褐藻胶寡糖、琼胶寡糖和粉碎、过筛后的维生素C、米糠一起加入搅拌设备；再加维生素E、磷酸二氢钾，加入鱼油、褐藻酸钠混匀后制粒。按0.1～1％比例加入到饲料中，明显提高了鲍鱼非特异性免疫力，其养殖成活率提高了15～25％，有效提高鲍鱼产量、降低了养殖的成本，从而进一步推动鲍鱼养殖业的健康发展，满足市场的需求。文档编号A23K1/18GK101248838SQ20081002702公开日2008年8月27日申请日期2008年3月25日优先权日2008年3月25日发明者蔡俊鹏,马小花申请人:华南理工大学