灵芝菌丝体发酵的中药杂菌抑制剂的制作方法

文档序号:317491阅读:271来源:国知局

专利名称::灵芝菌丝体发酵的中药杂菌抑制剂的制作方法
技术领域
:本发明属于中药应用领域,具体涉及一种灵芝菌丝体发酵的中药杂菌抑制剂。
背景技术
:现有灵芝菌丝体液体深层发酵工艺易感染杂菌,目前抑制杂菌的主要技术手段如高温、高压、化学法等易造成灵芝有效药用成分分解或互相反应及最终制品污染等问题。目前也有采用化学消毒剂作为杂菌抑制剂使用,但这类抑制剂的选择性较差,有些甚至会严重影响灵芝菌丝体的发酵。
发明内容本发明的目的是为了解决灵芝菌丝体深层发酵过程中的杂菌污染的问题,提供一种中药杂菌抑制剂。本发明的目的可以通过以下措施达到—种灵芝菌丝体发酵的中药杂菌抑制剂,该中药杂菌抑制剂由五味子、大蒜、桂皮和木别子的提取物组成,各组分的用量以重量份计为五味子提取物大蒜提取物桂皮提取物木别子提取物=530:iio:iio:110,优选为520:l5:i5:i5,进一步优选为io20:12:12:12。—种灵芝菌丝体发酵的中药杂菌抑制剂的制备方法,具体步骤为取五味子、大蒜、桂皮和木别子干粉,分别采用体积浓度为60%80%(优选75%)的乙醇浸取35次,每次14小时,然后将提取液除去乙醇得到各中药提取物干膏,分别将各干膏粉碎后按比例混合。另一种灵芝菌丝体发酵的中药杂菌抑制剂的制备方法,具体步骤为取五味子、大蒜、桂皮和木别子干粉,分别采用体积浓度为60%80%(优选75%)的乙醇回流提取13次,每次15小时,然后将提取液除去乙醇得到各中药提取物干膏,分别将各干膏粉碎后按比例混合。五味子提取物及其他中药提取物如大蒜中都含有天然抑菌成分,但是其单独使用时都无法满足即灵芝菌丝体液体深层发酵对各方面的要求,而且单剂使用量大且影响灵芝菌丝体的发酵。本发明将四种中药提取物配伍使用,他们之间的协同作用不仅在较低使用量的情况能够有效抑制杂菌的生长,而且对灵芝菌丝体液体深层发酵几乎无影响,是一种高选择性的中药杂菌抑制剂。该中药杂菌抑制剂直接加入灵芝培养基中即可起到抑制杂菌的作用,其加入量为0.2%2%(质量),在0.3%1%范围内可以达到最佳的效果。具体实施方式实施例1称取lkg五味子粗粉,充分碾碎后,加入2.7L/kg(五味子)的75%乙醇进行回流提取,回流3次,每次2小时,合并回流液,减压回收乙醇,得到浓縮浸膏,再经过抽真空干燥得到干膏。将干膏粉碎得五味子提取物备用。其他中药大蒜、桂皮及木别子也按相同方法制取提取物。将粉末状的五味子提取物、大蒜提取物、桂皮提取物和木别子提取物按i0:i:2:i的比例混合均匀,制得中药杂菌抑制剂。实施例2采用实施例1的提取方法,仅将五味子提取物、大蒜提取物、桂皮提取物和木别子提取物的比例改为17:2:i:i。实施例3采用实施例1的提取方法,仅将五味子提取物、大蒜提取物、桂皮提取物和木别子提取物的比例改为15:i:i:2。实施例4采用实施例1的提取方法,仅将五味子提取物、大蒜提取物、桂皮提取物和木别子提取物的比例改为9:3:2:i。抑菌效果实验供试材料菌种灵芝、毛霉、木霉、枯草芽孢杆菌。培养基葡萄糖硫酸培养基、PDA培养基。—、对常见杂菌生长的影响在添加不同浓度(质量)抑制剂的葡萄糖硫酸培养基中,接入某一供试杂菌,2729t:培养,隔24h观测l次,重复三次。结果见表l。表1对常见杂菌生长的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>注"_"清亮;"+"微浑浊,"++"浑浊,"+++"浑浊且长菌。从表1可得,本发明的中药杂菌抑制剂在0.5%左右含量时即可达到较好的抑制效果。二、对灵芝生长的影响在添加不同浓度抑制剂的葡萄糖硫酸培养基中,接种灵芝食用菌,272『C和120次/min振荡培养,隔24h观测1次,重复三次。结果见表2C表2对灵芝生长的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注"-"菌丝体生长良好、增多;"+"菌丝体无明显变化,"++"菌丝体完全萎縮、沉底。从表2可得,本发明的中药杂菌抑制剂对灵芝的生长几乎没有不良影B向,而化学抑制剂即使在较低浓度下,也会严重影响灵芝的生长。三、对灵芝及杂菌混合影响在添加不同浓度抑制剂的PDA培养基中,无菌操作接种灵芝食用菌和三种受试杂菌,2729t:和120次/min振荡培养,隔24h观测1次,重复三次。总体结果见表3。表3对灵芝及杂菌混合影响<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注"-"菌丝体生长良好、增多;"+"菌丝体无明显变化,"++"菌丝体完全萎縮、沉底。从表3可得,本发明的中药杂菌抑制剂对灵芝的生长几乎没有不良影响,且能够有效抑制杂菌的生长,显示出优异的选择性。而化学抑制剂在不影响灵芝生长的情况下对杂菌也没有影响。权利要求一种灵芝菌丝体发酵的中药杂菌抑制剂,其特征在于该中药杂菌抑制剂由五味子、大蒜、桂皮和木别子的提取物组成,各组分的用量以重量份计为五味子提取物∶大蒜提取物∶桂皮提取物∶木别子提取物=5~30∶1~10∶1~10∶1~10。2.根据权利要求i所述的灵芝菌丝体发酵的中药杂菌抑制剂,其特征在于所述各组分的用量为五味子提取物大蒜提取物桂皮提取物木别子提取物=520:i5:i5:i5。3.根据权利要求2所述的灵芝菌丝体发酵的中药杂菌抑制剂,其特征在于所述各组分的用量为五味子提取物大蒜提取物桂皮提取物木别子提取物=io20:i2:i2:i2。4.权利要求13中任一所述的灵芝菌丝体发酵的中药杂菌抑制剂的制备方法,其特征在于取五味子、大蒜、桂皮和木别子干粉,分别采用体积浓度为60%80%的乙醇浸取35次,每次14小时,然后将提取液除去乙醇得到各中药提取物干膏,分别将各干膏粉碎后按比例混合。5.根据权利要求4所述的灵芝菌丝体发酵的中药杂菌抑制剂的制备方法,其特征在于所述乙醇的浓度为75%。6.权利要求13中任一所述的灵芝菌丝体发酵的中药杂菌抑制剂的制备方法,其特征在于取五味子、大蒜、桂皮和木别子干粉,分别采用体积浓度为60%80%的乙醇回流提取13次,每次15小时,然后将提取液除去乙醇得到各中药提取物干膏,分别将各干膏粉碎后按比例混合。7.根据权利要求6所述的灵芝菌丝体发酵的中药杂菌抑制剂的制备方法,其特征在于所述乙醇的浓度为75%。全文摘要本发明公开了一种灵芝菌丝体发酵的中药杂菌抑制剂,该中药杂菌抑制剂由五味子、大蒜、桂皮和木别子的提取物组成,各组分的用量以重量份计为五味子提取物∶大蒜提取物∶桂皮提取物∶木别子提取物=5~30∶1~10∶1~10∶1~10。本发明将四种中药提取物配伍使用,他们之间的协同作用不仅在较低使用量的情况能够有效抑制杂菌的生长,而且对灵芝菌丝体液体深层发酵几乎无影响,是一种高选择性的中药杂菌抑制剂。文档编号A01N65/08GK101766198SQ20091026414公开日2010年7月7日申请日期2009年12月31日优先权日2009年12月31日发明者彭江晨申请人:溧阳市天目湖保健品有限公司
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