专利名称：一种复合微生态制剂及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种复合微生态制剂，具体地说是涉及包含多种益生菌的复合微生态 制剂及其应用，属于微生态制剂技术领域。
背景技术：
目前，对动物疾病的预防和治疗药物基本仍采用抗生素，但由于长期、大量使用抗 生素，耐药性、菌群失调、免疫力下降、疾病复发率高、药物残留等种种弊端日益严重，同时 也严重危害动物机体及人类健康。当前，世界各国对抗生素各自采取了禁用或限制使用的 措施，如欧盟从2006年全面禁止使用抗生素；世界卫生组织(WTO)提出了“在食用动物中 减少抗生素使用的全球原则”；我国已启动“饲料安全工程”，并禁用了一批毒性和残留较大 的药物。在此形式下，改变养殖观念、预防重于治疗，并开发应用无毒、无药残的新型绿色饲 料添加剂是必然趋势。微生态制剂是目前常用和研究较多的一种绿色、安全的饲料添加剂，此类制剂是 由动物有益菌经工业化发酵生产得到的，包含有很多有益微生物及其代谢产物构成的活菌 制剂，可以直接饲喂动物。微生态制剂通过维持肠道内微生态的平衡而发挥作用，具有防 病、增强机体免疫力、促进生长、增加体重等多种功能，且无污染，无残留，不产生抗药性，是 一种绿色、安全的饲料添加剂。目前，市场上的微生态制剂存在以下几个方面的主要质量问题(1)活菌含量低， 而研究表明，如果一种菌在盲肠内容物中的浓度低少107个/g，则该菌产生的酶及代谢产 物不足以影响宿主，难以满足治疗需要；(2)水分含量偏高，这是影响微生态制剂质量的重 要因素之一；(3)不耐抗生素；(4)对胃酸和胆盐不稳定，致使只有少数菌株进入肠道后仍 具有活性，达不到发挥作用所需的活菌数量。由于微生态制剂存在的这些质量问题，从而影 响了其在动物上的应用效果，限制了微生态制剂的广泛应用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种活菌含量高、水分含量低、包含具有耐胃酸、耐胆盐、 耐高温及耐受常用抗生素等抗逆性能和产酸、产酶及抑制病原菌等益生功能的多种益生菌 的微生态制剂。本发明的另一目的在于提供该微生态制剂的用途。本发明的目的是通过如下技术方案实现的本发明提供一种复合微生态制剂，该制剂包含地衣芽孢杆菌 (Bacilluslicheniformis)CGMCC No. 2383菌粉、枯草芽孢杆菌菌粉、粪肠球菌 (Enterococcus faecium) CGMCC No. 2386 菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) CGMCC No. 2388菌粉中的任三种或四种。其中，所述的地衣芽孢杆菌、粪肠球菌、酿酒酵母具有良好的耐胃酸、耐胆盐、耐高 温、耐受常用抗生素等抗逆性能和产酸、产酶、抑制病原菌等益生功能，为申请人从健康动物肠道或粪便中分离、选育得到，经中国农业微生物菌种保藏管理中心鉴定，并于2008年3月3日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏(简称CGMCC)，保藏号 分别为CGMCC No. 2383、CGMCC No. 2386、CGMCC No. 2388。嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌可以按常规方法分离得到，也可从市场上购买得到，本 发明为从市场上购买得到。本发明的复合微生态制剂包含嗜酸乳杆菌菌粉、粪肠球菌菌粉、地衣芽孢杆菌菌 粉、酿酒酵母菌粉，上述各成分的重量配比为1 0.8 1.2 0.8 2. 5 1. 5 2. 5。本发明的复合微生态制剂包含地衣芽孢杆菌菌粉、枯草芽孢杆菌菌粉、酿酒酵母 菌粉，上述各成分的重量配比为1 3. 5 0.8 3. 5 0.8 3. 5。本发明的复合微生态制剂包含粪肠球菌菌粉、地衣芽孢杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉， 上述各成分的重量配比为1 0.8 1.2 1.5 2. 5。本发明的复合微生态制剂包含嗜酸乳杆菌菌粉、地衣芽孢杆菌菌粉、酿酒酵母菌 粉，上述各成分的重量配比为1 1.5 2 2. 5 2 2. 5。本发明的复合微生态制剂还可进一步包含载体，载体为石粉、葡萄糖、硫酸钾铝、 玉米芯粉中的任一种或两种。本发明的另一目的在于提供该复合微生态制剂在畜禽饲料添加剂中的应用。该复 合微生态制剂可以根据畜禽及其所处生长阶段不同确定包含的益生菌种类、载体种类及其 比例，以更有针对性的制成各畜禽通用型或专用型的微生态制剂，从而更好的发挥微生态 制剂的功能，如本发明的复合微生态制剂包含嗜酸乳杆菌菌粉、粪肠球菌菌粉、地衣芽孢 杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉，载体为石粉，上述各成分的重量配比为1 0.8 1.2 1.5 2.5 1.5 2. 5 3. 5 4. 5，即可制成猪通用型复合微生态制剂，总有益菌数达2 5X109cfu/g ；复合微生态制剂包含嗜酸乳杆菌菌粉、粪肠球菌菌粉、地衣芽孢杆菌菌粉、 酿酒酵母菌粉和葡萄糖，上述各成分的重量配比为1 0.8 1.2 0.8 1.2 1.5 2.5 15 20，即制成仔猪专用型复合微生态制剂，总有益菌含量5 9X108cfu/g;复合 微生态制剂包含地衣芽孢杆菌菌粉、枯草芽孢杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉、硫酸钾铝和石粉， 上述各成分的重量配比为1 0.8 1.2 0.8 1.2 4. 5 5. 5 1. 5 2. 5，即制成 母猪专用型复合微生态制剂，总有益菌含量2 5X 109cfu/g ；复合微生态制剂包含枯草 芽孢杆菌菌粉、地衣芽孢杆菌菌粉、酿酒酵母菌偻和玉米芯粉，上述各成分的重量配比为 3 3. 5 3 3. 5 2. 5 3. 5 0. 5 1. 5，即制成饲料厂猪产品专用型复合微生态制 齐IJ，益生菌总菌含量可达2 5X101(lCfU/g ；复合微生态制剂包含粪肠球菌菌粉、地衣芽 孢杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉和葡萄糖，上述各成分的重量配比为1 0.8 1.2 1.5 2.5 15 20，即制成雏禽专用型复合微生态制剂，总有益菌含量5 9X108cfu/g;复合 微生态制剂包含嗜酸乳杆菌菌粉、地衣芽孢杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉和石粉，上述各成分 的重量配比为1 1.5 2 2. 5 2 2. 5 5 5. 5，即制成肉禽专用型复合微生态 制剂，总有益菌数达2X 109cfu/g ；复合微生态制剂包含地衣芽孢杆菌菌粉、枯草芽胞杆菌 菌粉、酿酒酵母菌粉和石粉，上述各成分的重量配比为1 1 1.2 1 1.2 7 8， 即制成蛋禽专用型复合微生态制剂，总有益菌数达2 5X 109cfu/g ；复合微生态制剂包含 枯草芽孢杆菌菌粉、地衣芽孢杆菌菌粉、酿酒酵母菌粉和玉米芯粉，上述各成分的重量配比 为3 3 3. 5 3 3. 5 0. 5 1. 5，即制成饲料厂鸡产品专用型复合微生态制剂，益生菌总菌含量可达2 5X 101Qcfu/g。本发明中所选育的地衣芽孢杆菌、粪肠球菌、酿酒酵母与枯草芽孢杆菌和嗜酸乳 杆菌在制备中采用液体深层高密度发酵技术和喷干或者冻干一系列的后处理加工工艺技 术制成菌粉，制剂中的活菌含量高、水分含量低，具有耐胃酸、耐胆盐、耐高温及耐受常用抗 生素等抗逆性能和产酸、产酶及抑制病原菌等益生功能。本发明的复合微生态制剂能提高饲料利用效率，增加肉蛋奶等产量，促进动物生 长，提高免疫力和抗病力，替代抗生素，从而改善动物产品品质。本发明的地衣芽孢杆菌(Bacillus 1 icheniformis)CGMCC No. 2383、粪肠球菌 (Enterococcus faecium) CGMCC No. 2386 菌粉、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae) CGMCC No. 2388菌种的分离、选育及其菌粉的制备过程如下
1、增菌培养将健康动物(猪或者家禽)的新鲜粪便或肠道内容物样品接种于增 殖液体培养基中，在30 37°C恒温培养增殖；2、分离纯化对步骤1增菌培养物在增殖培养基平板上进行划线培养，从中挑取 各个具有特征形态的菌落再划线培养和分离，直至为纯菌落为止，革兰氏染色镜检，将分离 的疑似纯菌落接种试管斜面中增殖，然后将斜面菌种保藏于4°C冰箱中，待用；其中所述增殖培养基为BPY培养基、MRS培养基、98号培养基中的一种；3、抗逆性强的优良菌种的选育对步骤2所分离、纯化的菌株进行抗逆性筛选，可 以对所分离、纯化的菌种直接进行抗逆性能测定，从中筛选出抗逆性强的天然优良菌种；或 通过梯度培养逐渐增加溶液的酸性(至PH为1.5左右)及胆汁盐浓度，选出具有耐酸及耐 胆汁特性的菌株；或通过传统的物理、化学诱变方法、现代基因工程技术，定向选育出抗逆 性强的菌种；再做菌种鉴定及生物学性能测定1)耐酸性测定将斜面菌种接种到种子培养基中活化，30 37°C静置培养8 20h，按5 10%接种量分别接种于pH值2. 0,3. 0,4. O的人工模拟胃液中，Oh计数作对照， 2h、6h取样用磷酸缓冲液按10倍系列稀释，进行平板活菌计数，计算存活率；其中所述种子培养基为BPY培养基、MRS培养基、98号培养基中的一种；2)耐胆盐测定将斜面菌种接种于培养基中，30 37°C静置培养8_24h活化，按 5 10%接种量分别接种于0. 03%,0. 1%,0. 2%,0. 3%不同浓度的猪胆盐溶液中，Oh计数 作对照，2h、6h取样用生理盐水按10倍系列稀释计数，进行平板活菌计数，计算存活率；3)耐高温测定将斜面菌种接种于种子培养基中，30 37°C培养16_24h活化，分 别于50°C 80°C水浴处理15 30min，处理前的做对照，计算存活率；4)耐药性测定采用药敏性纸片法；5)产酶测定采用中华人民共和国轻工业行业标准，工业用α-淀粉酶制剂(QB/ Τ1805. 1-1993)，工业酶制剂通用试验方法(QB/T1803-1993)对地衣芽孢杆菌进行淀粉酶 活力测定；采用行业标准工业用蛋白酶制剂(QB/T1805. 3-1993)，对地衣芽孢杆菌进行蛋 白酶活力测定；6)产酸测定采用离子色谱法对粪肠球菌CGMCC No. 2386进行有机酸产量测定；7)抑菌试验采用牛津杯法(又称管碟法)对常见致病菌进行抑菌测定；本发明所选育的地衣芽孢杆菌CGMCC No. 2383在人工模拟胃液(pH2. 0 4. 0)中 处理6h，存活率在49. 5%以上；在猪胆盐溶液(浓度0. 3-3g/kg)处理6h，存活率为100%;50 80°C处理15 30min，存活率为100% ；对青霉素G、阿莫西林、大观霉素、红霉素、吉 他霉素、杆菌肽锌、林可霉素7种抗生素有耐药性；对大肠杆菌K88、金黄色葡萄球菌、鸡白 痢沙门氏菌三种致病菌均有较好的抑制作用，抑菌圈直径在12 20mm;产蛋白酶活力为 1000u/ml ；产淀粉酶活力为800u/ml。本发明所选育的粪肠球菌CGMCC No. 2386在人工模拟胃液(pH2. O 4. 0)中处 理6h，存活率在18.0%以上；在猪胆盐溶液(浓度0. 3-3g/kg)处理6h，存活率为12.6% 以上；50 80°C处理15 30min，存活率为0. 43%；对青霉素G、头孢噻肟、庆大霉素、大观 霉素、新霉素、红霉素、吉他霉素、杆菌肽锌、林可霉素、诺氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、复方 磺胺甲基异恶唑13种抗生素有耐药性；对大肠杆菌K88、金黄色葡萄球菌、鸡白痢沙门氏菌 三种致病菌均有很好的抑制作用，抑菌圈直径在16 21mm ；乳酸、乙酸、异丁酸总酸产量为 4. 2g/L，乳酸产率达到89.4%。本发明所选育的酿酒酵母CGMCC No. 2388在人工模拟胃液(pH2. O 4. 0)中处理 6h，存活率在15. 4%以上；在猪胆盐溶液(浓度0. 3-3g/kg)处理6h，存活率为11. 5%以上； 50 80°C处理15 30min，存活率为0. 19% ；
4、菌粉的制备地衣芽孢杆菌CGMCC No. 2383菌粉的制备方法，包括如下的步骤1)平板培养复壮将地衣芽孢杆菌菌种接种于BPY平板培养基上，于30_37°C培 养12_24h，使地衣芽孢杆菌复壮，并形成单菌落，挑取单菌落于接种于斜面培养基上，于 30-37 °C 培养 24-36h ；2) 一级种子的制备将步骤1)培养的枯草芽孢杆菌菌种转接茄子瓶BPY斜面培 养基上，于30 37°C培养12 16h，使其处于对数中后期，得一级种子；3) 二级种子的制备将步骤2)制备的一级种子用无菌水制成菌悬液，接种到装有 1-1. 6M3 BPY种子培养基的2M3种子罐中，温度30 37°C，转速200 250rpm，罐压0. 05Mpa, 通风比1 0.6 0.8 (14. 4 19. 2M3/h)，培养10 14h，为二级种子液;4)地衣芽孢杆菌发酵液的制备将步骤3)制备的二级种子液按照3 10%的接 种量接种到装有12 16M3发酵培养基的发酵罐中，温度30 37°C，转速220 300rpm， 罐压0. 05Mpa，通风比1 0.6 0.8，培养16 20h，至芽孢形成率90%以上，活菌数为 1 2Χ101(ι(^ιι/πι1，则中止发酵，得地衣芽孢杆菌发酵液；所述的发酵培养基为麸皮1 2%，豆粕1 2%，氯化钠0. 2 0. 8%，硫酸镁 0. 01 0. 05% ；5)地衣芽孢杆菌菌粉的制备在步骤4)制备的发酵液中加入20 25%的填充 物，混勻，进行喷雾干燥，进风温度120 130°C，排风温度40 50°C，雾化器转速15000 ISOOOrpm,得到水分含量< 5%的地衣芽孢杆菌菌粉。所述的填充物为米糠、沸石粉、稻壳粉中的任一种。B、粪肠球菌CGMCC No. 2386菌粉的制备方法，包括如下的步骤1)平板培养复壮将粪肠球菌菌种接种于MRS平板培养基上，于32 37°C培养 12 24h，使粪肠球菌菌复壮，并形成单菌落；挑取单菌落接种于斜面培养基上，于32 37°C 培养 24 36h ；2) 一级种子的制备将步骤1)培养的粪肠球菌斜面菌种转接到装有250ml 300ml MRS培养基的500mL三角瓶中，于32 37°C培养12 16h，转速100 150rpm，使 其处于对数中后期，为一级种子；3) 二级种子的制备将步骤2)培养的乳酸杆菌一级种子转接到装有1. 2 1. 6L MRS培养基的2. OL三角瓶中，于32 37°C静止培养12 16h，为二级种子液； 4)发酵液的制备将步骤3)制备的二级种子液按照3 6%的接种量接种到装有 12 16M3发酵培养基的发酵罐中，温度35 37°C，转速120 160rpm，罐压0. 05Mpa，培 养16 20h，至活菌数为2 5 X 109cfu/ml，中止发酵；所述的发酵培养基为葡萄糖1 2 %，大豆蛋白胨1 2 %，硫酸铵0. 5 1. 0 %， 氯化钠0. 2 0. 8%，硫酸镁0. 01 0. 05% ；5)粪肠球菌菌粉的制备将步骤4)制备的发酵液，3500 5000rpm离心，得到菌 泥，加入与菌泥的重量/体积百分比为15 20%的冻干保护剂，混勻，于-25°C -45°C冷 冻干燥，得到水分含量< 5%的粪肠球菌菌粉。所述的冻干保护剂为脱脂奶粉、甘油、蔗糖、麦芽糊精和谷氨酸钠的混合物，按 照脱脂奶粉甘油蔗糖麦芽糊精谷氨酸钠=2 0. 5 1. 0 0. 5 1. 0 0. 5 1. 5 0. 5 1. 0的比例混合而成。C、酿酒酵母CGMCC No. 2388菌粉的制备方法，包括如下的步骤1)平板培养复壮将冰箱保藏的酿酒酵母斜面菌种采用划线接种的方法在98号 平板培养基上划线接种，于28 32°C培养24 36h，使酿酒酵母复壮，并形成单菌落；挑取 单菌落于新鲜的98号斜面培养基上，于28 32°C培养24 36h，放置冰箱备用；2) 一级种子的制备将步骤1)培养好的酿酒酵母新鲜斜面菌种转接到装有 200 250ml 98号培养基的500mL三角瓶中，于28 32°C培养12 16h，转速100 150rpm，使其处于对数中后期，为一级种子；3) 二级种子的制备将步骤2)培养好的酿酒酵母种子液转接到装有1. 0 1. 2L 98号培养基的2. OL三角瓶中，于28 32°C静止培养12 16h，为二级种子液；4)发酵液的制备将步骤3)制备的二级种子按照3 10%的接种量接种到装有 15 16M3发酵培养基的发酵罐中，温度28 32°C，转速150 200rpm，罐压0. 05Mpa，培 养12 16h中止发酵，此时活菌数为1 3X109cfu/ml ；所述的发酵培养基为红糖1 2%，大豆蛋白胨1 2%，酵母膏0. 2 0. 5%， 氯化钠0.5 1.0%，硫酸镁0.01 0. 05%，磷酸氢二钾0.2 0.5% ；5)酿酒酵母菌粉的制备将步骤4)制备的发酵液，2000 3000rpm离心，得到菌 泥，加入与菌泥的重量/体积百分比为10 15%的冻干保护剂，混勻后于-25°c -45°c冷 冻干燥，得到水分含量< 5%的酿酒酵母菌粉；所述的冻干保护剂为脱脂奶粉、甘油、麦芽糊精按照2 0.5 1 1 2比例 混合而成。通过下列实施例将更具体的说明本发明，但是应理解所述实施例仅是为了说明本 发明，而不是以任何方式限制本发明的范围。
具体实施例方式实施例1、优良菌种的的分离、筛选、选育及鉴定
1)增菌培养将健康动物(猪或者家禽)的新鲜粪便、肠道内容物样品接种于BPY 液体培养基中，在37°C恒温培养增殖48h ；2)地衣芽孢杆菌的分离纯化对步骤1)增菌培养物100°C水浴5min，然后在BPY培养基平板上进行划线培养，从中挑取各个具有特征形态的菌落再划线培养和分离，直至 为纯菌落为止，革兰氏染色镜检，将分离的疑似纯菌落接种试管斜面中增殖，然后保存于 4°C冰箱中，待用；菌落形态菌落表面粗糙，不光泽，乳白色不透明，边缘不整齐，直径2_3mm，随着 培养时间的延长，变为红褐色；镜检细胞为杆菌1. 6 3. 8 μ mXO. 6 1. 2 μ m，革兰氏阳 性，芽孢中生，椭圆形，不膨大，初步确定为地衣芽孢杆菌；3)粪肠球菌的分离纯化对步骤1)增菌培养基在MRS培养基平板上进行划线培 养，从中挑取各个具有特征形态的菌落再划线培养和分离，直至为纯菌落为止，革兰氏染色 镜检，将分离的疑似纯菌落接种试管斜面中增殖，然后保存于4°C冰箱中，待用；菌落形态菌落圆整，表面光滑，呈乳白色，大小l_3mm ；细胞圆形或卵圆形，直径 0. 5 1. Oum，大多数成短链或对，革兰氏染色阳性；4)酿酒酵母的分离纯化对步骤1)增菌培养基在98号培养基平板上进行划线培 养，从中挑取各个具有特征形态的菌落再划线培养和分离，直至为纯菌落为止，革兰氏染色 镜检，将分离的疑似纯菌落接种试管斜面中增殖，然后保存于4°C冰箱中，待用；菌落形态菌落为软而湿润，乳酪色、有光泽、平坦或稍凸起、边缘整齐；细胞为球 形或卵形，直径5 10um，繁殖方式芽殖；对步骤3)或者4)所分离、纯化的粪肠球菌或者酿酒酵母菌株进行抗逆性筛选，可 以对所分离、纯化的菌种直接进行抗逆性能测定，从中筛选出抗逆性强的天然优良菌种；或 通过梯度培养逐渐增加溶液的酸性(至PH为1.5左右)及胆汁盐浓度，选出具有耐酸及耐 胆汁特性的菌株；或通过传统的物理、化学诱变方法、现代基因工程技术，定向选育出抗逆 性强的菌种；并对其进行菌种鉴定，最后对选育出的菌株进行抗逆性性能测定。实施例2、3株优良菌种的抗逆性和生物学性能测定3株菌种地衣芽孢杆菌CGMCC No. 2383、粪肠球菌CGMCC No.2386、酿酒酵母 CGMCC No. 2388的生物学性能和抗逆性能测定1)地衣芽孢杆菌CGMCC No. 2383培养物的制备将冰箱保藏的斜面菌种接种到 BPY种子培养基中活化，37°C、200rpm培养18h，得到芽孢率在95%以上的培养物；2)粪肠球菌CGMCC No. 2386培养物的制备将冰箱保藏的斜面菌种接种到MRS种 子培养基中活化，35°C、IOOrpm培养16h，即得；3)酿酒酵母CGMCC No. 2388培养物的制备将冰箱保藏的斜面菌种接种到98号 种子培养基中活化，30°C、150rpm培养16h，即得；4)耐酸性测定将上述制备的培养物按5%接种量分别接种于pH值2.0、3.0、4.0 的人工模拟胃液中，Oh计数作对照，2h、6h取样用磷酸缓冲液按10倍系列稀释，进行平板活 菌计数，计算存活率。本发明选育的3株菌种地衣芽孢杆菌CGMCC No. 2383、粪肠球菌CGMCC No. 2386、 酿酒酵母CGMCC No. 2388在胃酸中存活率结果见表1。人工模拟胃液的制备量取9. 5% 10. 5%浓盐酸16. 4毫升，加蒸馏水至1000毫升，做基础人工胃液，用盐酸或氢氧化钠调pH值2. 0、3. 0、4. 0，各取10mL(9mL)，分装于试管 中，100°C下蒸汽灭菌15分钟，在无菌条件下，每IOmL液体中加入0. IOOg胃蛋白酶。表13株菌种在人工模拟胃液中的存活率
权利要求
一种复合微生态制剂，其特征在于包含嗜酸乳杆菌菌粉、地衣芽孢杆菌CGMCCNo.2383菌粉、酿酒酵母CGMCC No.2388菌粉，上述各成分的重量配比为1～1.5∶2～2.5∶2～2.5。
2.如权利要求1所述的复合微生态制剂，其特征在于进一步包含载体，载体为石粉、葡 萄糖、硫酸钾铝、玉米芯粉中的任一种或两种。
3.权利要求1 2任一项所述的复合微生态制剂在制备畜禽饲料添加剂中的应用。
全文摘要
本发明涉及一种复合微生态制剂及其应用，具体地说是涉及包含多种益生菌的复合微生态制剂及其应用。该制剂包含地衣芽孢杆菌CGMCC No.2383菌粉、枯草芽孢杆菌菌粉、粪肠球菌CGMCC No.2386菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉、酿酒酵母CGMCC No.2388菌粉中的任三种或四种，制剂活菌含量高，具有耐胃酸、耐胆盐、耐高温及耐受常用抗生素等抗逆性能和产酸、产酶及抑制病原菌等益生功能。该制剂可根据畜禽及其所处生长阶段不同确定包含的益生菌种类、载体种类及其比例。本发明的复合微生态制剂能提高饲料利用效率，增加肉蛋奶等产量，促进动物生长，提高免疫力和抗病力，替代抗生素，从而改善动物产品品质。
文档编号A23K1/00GK101933558SQ20101023259
公开日2011年1月5日 申请日期2008年5月14日 优先权日2008年5月14日
发明者刘宇, 姚琨, 孙占敏, 张玳华, 白玉卿, 莫云, 贾秋英, 赵军, 赵雁青 申请人:北京大北农科技集团股份有限公司