一种禽类微生态制剂及其制备方法与应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种禽类微生态制剂及其制备方法，本发明设及一种禽类微生态制剂 及其制备方法与应用。
【背景技术】
[0002] 20世纪W来，抗生素、哇乙醇、哇诺酬等药物的相继问世，动物养殖业得到迅速发 展，运些药物在防治疾病、促进动物生长等方面作用十分明显。但运些药物的不合理使用 乃至滥用，导致了大量耐药菌株的产生，使得药物疗效大大降低或者没有效果，药物添加剂 引发的病原菌耐药性、药物毒性、药物残留等弊端也暴露出来，严重危害食品安全及人类健 康。
[0003] 为解决W上问题，世界各国，尤其是欧洲、美国、日本等发达国家纷纷对药物饲料 添加剂的种类、使用方法、剂量和配伍等方面严加限制，同时积极鼓励和倡导绿色安全饲料 添加剂的研究和推广。欧盟从2006年全面禁止使用抗生素，世界卫生组织（WT0)提出了"在 食用动物中减少抗生素使用的全球原则"，我国已启动"饲料安全工程"，并禁用了一批毒性 和残留较大的药物。在此形势下，用益生菌来制作的微生态制剂，因其无毒副作用、无耐药 性、无残留、成本低、效果显著、不污染环境及能长期保存的特性，在畜牧业生产上具有广阔 的应用前景。
[0004] 目前，国内大多微生态制剂生产采用固体发酵等粗放工艺，生产的产品往往目的 菌群和污染的杂菌共同存在，严重的影响了产品的使用效果。市场上的微生态制剂存在活 菌含量低、水分含量偏高、不耐抗生素、对胃酸和胆盐不稳定等问题影响了其在动物上的应 用效果，限制了微生态制剂的广泛应用。因此，具有克服W上缺点的微生态制剂具有很大的 研究及应用价值。
【发明内容】
[0005] 为了克服现有技术的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一种禽类微生态制 剂。该禽类微生态制剂具有增强免疫力、促进生长W及防治肠道疾病的特点。
[0006] 本发明的另一目的在于提供上述禽类微生态制剂的制备方法。
[0007] 本发明的再一目的在于提供上述禽类微生态制剂的应用。
[0008] 本发明的目的通过下述技术方案实现：
[0009] -种禽类微生态制剂，该制剂是一种粉剂，包括唾液乳杆菌化actobaci1lus saliva;rius)Scgz-ll菌粉、唾液乳杆菌（Xactobacillussaliva;rius)SCL87 菌粉、 LactobacillusingluvieiSCGZ-9 菌粉；
[0010] 所述的唾液乳杆菌Scgz-11菌粉、唾液乳杆菌SCL87菌粉和Lactobaci1lus ingluvieiSCGZ-9菌粉分别是经保护剂包被后制得；
[0011] 所述的保护剂的配方优选为脱脂奶20~30旨/1，玉米淀粉15~25旨/1，可溶性淀 粉90~llOg/L;其中，溶剂为水。
[0012] 所述的唾液乳杆菌Scgz-11菌粉、唾液乳杆菌SCL87菌粉和Lactobaci1lus ingluvieiSCGZ-9菌粉按质量比1: (1~2) : (1~1. 5)混合；
[0013] 所述的禽类微生态制剂还可进一步包含载体，所述的载体优选为麦教、稻慷、石粉 中的至少一种，最终可制成活菌数不小于1X109C化/g的含有载体的禽类微生态制剂。优 选制成活菌数为1X1〇9~1X10i°c化/g的含有载体的禽类微生态制剂。
[0014] 所述的唾液乳杆菌Scgz-11菌粉的制备方法，包括如下步骤：
[0015] 将唾液乳杆菌Scgz-11接种于MRS肉汤培养基，培养得到菌液；然后加入保护剂， 继续培养得到菌液和保护剂的混合物；将混合物预冻，并冻干成固体，最后制成粉末状，得 到唾液乳杆菌Scgz-11菌粉。
[0016] 所述的MRS肉汤培养基的配方为（g/L):蛋白腺10.0,牛肉浸粉8.0,酵母浸粉 4. 0,葡萄糖20. 0,憐酸氨二钟2. 0,巧樣酸氨二锭2. 0,乙酸钢5. 0,硫酸儀0. 2,硫酸儘 0. 04,吐溫801. 0,抑值5. 7 + 0. 2 ;MRS固体培养基是在MRS肉汤培养基内添加琼脂14. 0~ 20g/L，并调节抑值6. 5 + 0. 2。
[0017] 所述的培养的条件优选为37±rC，160±30r/min，培养16 +化；
[0018] 所述的保护剂的配方优选为脱脂奶20~30g/l，玉米淀粉15~25g/l，可溶性淀 粉90~llOg/L;其中，溶剂为水。
[0019] 所述的保护剂与菌液的体积比优选为1:(1~1. 5);
[0020] 所述的继续培养的条件优选为37 ±rC，160 ± 30r/min，继续培养3~化；
[0021] 所述的预冻的条件优选为-80°C预冻8~12小时；
[0022] 所述的冻干的条件优选为采用真空冷冻的方法，-40°C，50~80化进行冻干；
[0023] 所述的唾液乳杆菌SCL87菌粉参照唾液乳杆菌Scgz-11菌粉的制备方法进行制 备。
[0024] 所述的Lactobacillus ingluvieiSCGZ-9菌粉的制备方法，包括如下步骤：
[0025] 将Lactobacillus ingluviei SCGZ-9接种于MRS肉汤培养基，培养得到菌液；然 后加入保护剂，继续培养得到菌液和保护剂的混合物；将混合物预冻，并冻干成固体，最后 制成粉末状，得到Lactobacillus ingluviei SCGZ-9菌粉。
[0026] 所述的MRS肉汤培养基的配方为（g/L):蛋白腺10.0,牛肉浸粉8.0,酵母浸粉 4. 0,葡萄糖20. 0,憐酸氨二钟2. 0,巧樣酸氨二锭2. 0,乙酸钢5. 0,硫酸儀0. 2,硫酸儘 0. 04,吐溫801. 0,抑值5. 7 + 0. 2 ;MRS固体培养基是在MRS肉汤培养基内添加琼脂14. 0~ 20g/L，并调节抑值6. 5 + 0. 2。
[0027] 所述的培养的条件优选为37±rC，160±30r/min，培养20 +化；
[0028] 所述的保护剂的配方优选为脱脂奶20~30g/l，玉米淀粉20~25g/l，可溶性淀 粉90~llOg/L;其中，溶剂为水。
[0029] 所述的保护剂与菌液的体积比优选为1:(1~1. 5);
[0030] 所述的继续培养的条件优选为37 +rC，160±30r/min，继续培养4~化；
[0031] 所述的预冻的条件优选为-80°C预冻8~12小时；
[0032]所述的冻干的条件优选为采用真空冷冻的方法，-40°C，50~80化进行冻干。
[0033] 所述的禽类微生态制剂的制备方法，包括如下步骤：
[0034] (1)按上述制备方法分别制备唾液乳杆菌Scgz-11菌粉、唾液乳杆菌SCL87菌粉和 LactobacillusingluvieiSCGZ-9 菌粉；
[0035] (2)将步骤（1)制备得到的唾液乳杆菌Scgz-11菌粉、唾液乳杆菌SCL87菌粉和 LactobacillusingluvieiSCGZ-9菌粉进行混合，得到禽类微生态制剂。
[0036]本发明所用的唾液乳杆菌Scgz-11(LactobacillussalivariusScgz-11)为申请 人从广东养殖场的健康鸡群中分离得到的优势菌株，经过生理生化及16sRNA分析鉴定，表 明该菌属于唾液乳杆菌，该菌株具有较好的耐酸、耐胆盐能力，并对对禽源致病性空肠弯曲 杆菌具有高效抑制作用。2014年3月12日保藏于中国典型培养物保藏中屯、（CCTCC)，保藏 地址：中国.武汉.武汉大学，保藏编号：CCTCCN0:M2014080。
[0037] 本发明所用的唾液乳杆菌SCL87(LactobacillussalivariusSCL87)为申请人从 广东养殖场的健康母鸡中分离得到的优势菌株，该菌株具有耐酸、耐胆盐、耐膜蛋白酶及良 好的黏附能力，竞争性抑制沙口氏菌的生长，预防及治疗禽致病性沙口氏菌病，促进禽类生 长的作用。2015年5月28日保藏于中国典型培养物保藏中屯、（CCTCC)，保藏地址：中国.武 汉.武汉大学，保藏编号：CCTCCN0:M2015338。
[0038] 本发明所用的LactobacillusingluvieiSCGZ-9为申请人从广东养殖场的健康 鸡群中分离得到的优势菌株，该菌株具有耐酸、耐胆盐及良好的黏附能力，竞争性抑制禽致 病性大肠杆菌的生长，预防及治疗禽致病性大肠杆菌病的作用，2015年5月28日保藏于中 国典型培养物保藏中屯、（CCTCC)，保藏地址：中国.武汉.武汉大学，保藏编号：CCTCCN0:M 2015337ο
[0039] 本发明的禽类微生态制剂在制备防治禽类空肠弯曲杆菌病的产品中的应用。
[0040] 本发明的禽类微生态制剂在制备防治禽类沙口氏菌病的产品中的应用。
[0041] 本发明的禽类微生态制剂在制备防治禽类大肠杆菌病的产品中的应用。
[0042] 本发明的禽类微生态制剂在制备改善肠道菌群生态平衡，增强免疫功能，促进生 长并防治腹泻疾病产品中的应用。
[0043] 本发明的禽类微生态制剂在制备