.8,pH7. 4)， 42°C，120r/min，30min后吸取100μL进行梯度稀释，选择合适稀释倍数作平板活菌计数， 计数结果用10的对数值C化/g表示。实验结果如图2所示，结果显示，280天内本发明的禽 类微生态制剂在-20°C的活菌数基本保持稳定，4°C条件下，随着时间的推移，活菌数有所下 降，但其活菌量远大于益生菌制品中的益生菌数量的最低要求10 6c化/g，常溫（25~30°C) 保存禽类微生态制剂乳酸菌的活菌数30天内下降到了l〇6c化/g。
[0080] 实施例2
[0081] 五、禽类微生态制剂在防治禽类肠道疾病中的应用
[0082] 1、禽类微生态制剂对禽源空肠弯曲杆菌病的防治效果
[0083] 空肠弯曲杆菌动物实验方案，见表1
[0084] 将1日龄SPF鸡分成3组，每组25只，动物实验使用的病原菌为禽源空肠弯曲杆 菌（Campylobacterjejuni)SCCJ008,该攻毒菌株是本发明人于2012年从广东某鸡场分离 得到禽类致病菌株，其致病性2013年公开发表于《中国畜牧兽医》，文章题目为：禽源空肠 弯曲杆菌的分离鉴定及其致病性的初步研究。其中，禽类微生态制剂组简称为微制剂组。所 述的禽类微生态制剂为实施例1制备得到的，其活菌数约为2. 6Xl〇i°c化/邑。 阳0化]表1空肠弯曲杆菌动物实验方案 [0086]
[0087] 实验结果；
[0088] 禽类微生态制剂对不同处理组生长性能的影响见表2,动物实验各组平均体重增 长情况如图3。在攻毒后的第4天，微制剂组和攻毒组都有不同程度的腹泻现象，攻毒组先 后有9只鸡死亡，微制剂组在攻毒后第Ξ天死亡1只，微制剂组在饲喂禽类微生态制剂后情 况有所好转，25日龄，微制剂组食欲旺盛，肛口周围绒毛洁净无粪便，肌肉丰满有弹性，羽毛 皮肤整齐，有光泽，攻毒组中部分鸡出现肛口周围绒毛带有白色稀粪或有绒毛被粪便粘连 的情况，羽毛无光泽。实验25天，微制剂组的平均增重比对照组多23g，具有统计学意义，实 验结果说明本发明的禽类微生态制剂对禽类空肠弯曲杆菌病有很好的防治效果。其中，禽 类微生态制剂组简称为微制剂组。所述的禽类微生态制剂为实施例1制备得到的，其活菌 数约为 2. 6Xl〇i°cfu/g。
[0089] 表2禽类微生态制剂对不同处理组生长性能的影响
[0090]
[0091] 2、禽类微生态制剂对禽沙口氏菌病的防治效果
[0092] 沙口氏菌动物实验方案，见表3
[0093] 将1日龄SPF鸡分成4组，每组20只，动物实验使用的病原菌为鼠伤寒沙口氏菌 (Salmonellatyphimurium)(购于广东省微生物菌种保藏中屯、，编号CM(X50115)，攻毒剂量 200化3Xl〇iic化/mL，分别于3、10、19、24、29日龄称重。其中，所述的禽类微生态制剂为 实施例1制备得到的，其活菌数约为2.6Xl〇i°c化/邑。 阳094] 表3沙口氏菌动物实验方案 阳0巧]
[0096] 实验结果；
[0097] 动物实验各组平均体重增长情况如图4。
[0098] 动物试验期间，观察实验鸡的精神状态及饮食情况，结果如下表4。实验结果说明， 本发明的禽类微生态制剂不仅可W有效防治禽类沙口氏菌病，还可W促进禽类消化吸收， 使禽类健康快速生长。
[0099] 表4各组精神状态及饮食情况 阳100]
阳101 ] 3、禽类微生态制剂对禽大肠杆菌病的防治效果 阳102] 大肠杆菌动物实验方案，见表5 阳103] 将1日龄SPF鸡分成4组，每组20只，动物实验使用的病原菌为致病性大肠杆菌 巧nteropathogenic Escherichia coli，E阳C)(鸡致病性大肠杆菌〇78,血清型078 :Κ80,编 号GIM1. 739,购于广东省微生物菌种保藏中屯、），攻毒剂量为l〇i°c化其中，所述的禽 类微生态制剂为实施例1制备得到的，其活菌数约为2.6Xl〇i°c化/邑。
[0104] 表5大肠杆菌动物实验方案 阳1化]
阳106] 实验结果： 阳107] 动物实验各组平均体重增长情况如图5。 阳10引动物试验期间，观察实验鸡的精神状态及饮食情况，结果如下表6。实验结果表明 本发明禽类微生态制剂对禽大肠杆菌病有很好的防治效果。
[0109] 表6各组精神状态及饮食情况 阳110]
阳111] 本发明所提供的保护剂配方和Ξ种菌粉混合物所提供的比例范围值是确实可行 的，均能达到上述实验效果。
[0112] 上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的 限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化， 均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种禽类微生态制剂，其特征在于包括唾液乳杆菌（Lactobacillussalivarius) Scgz-11 菌粉、唾液乳杆菌（Lactobacillussalivarius)SCL87 菌粉、Lactobacillus ingluvieiSCGZ-9 菌粉； 所述的唾液乳杆菌Scgz-11菌粉、唾液乳杆菌SCL87菌粉和Lactobacillusingluviei SCGZ-9菌粉分别是经保护剂包被后制得； 所述的保护剂的配方为脱脂奶20~30g/L，玉米淀粉15~25g/L，可溶性淀粉90~ 110g/L〇2. 根据权利要求1所述的禽类微生态制剂，其特征在于： 所述的唾液乳杆菌Scgz-11菌粉、唾液乳杆菌SCL87菌粉和Lactobacillusingluviei SCGZ-9菌粉按质量比1: (1~2) : (1~1. 5)混合。3. 根据权利要求1或2所述的禽类微生态制剂，其特征在于： 所述的禽类微生态制剂还包含载体，所述的载体为麦麸、稻糠、石粉中的至少一种。4. 根据权利要求3所述的禽类微生态制剂，其特征在于： 所述的禽类微生态制剂加入载体后制成活菌数不小于1Xl〇9cfu/g的含有载体的禽类 微生态制剂。5. 根据权利要求1或2所述的禽类微生态制剂，其特征在于： 所述的唾液乳杆菌Scgz-11菌粉的制备方法，包括如下步骤： 将唾液乳杆菌Scgz-11接种于MRS肉汤培养基，培养得到菌液；然后加入保护剂，继续 培养得到菌液和保护剂的混合物；将混合物预冻，并冻干成固体，最后制成粉末状，得到唾 液乳杆菌Scgz-11菌粉； 所述的唾液乳杆菌SCL87菌粉参照唾液乳杆菌Scgz-11菌粉的制备方法进行制备。6. 根据权利要求5所述的禽类微生态制剂，其特征在于： 所述的培养的条件为37± 1 °C，160±30r/min，培养16±2h; 所述的保护剂与菌液的体积比为1: (1~1. 5); 所述的继续培养的条件为37±1°C，160±30r/min，继续培养3~5h。7. 根据权利要求1或2所述的禽类微生态制剂，其特征在于： 所述的LactobacillusingluvieiSCGZ-9菌粉的制备方法，包括如下步骤： 将LactobacillusingluvieiSCGZ-9接种于MRS肉汤培养基，培养得到菌液；然后加 入保护剂，继续培养得到菌液和保护剂的混合物；将混合物预冻，并冻干成固体，最后制成 粉末状，得到LactobacillusingluvieiSCGZ-9 菌粉。8. 根据权利要求7所述的禽类微生态制剂，其特征在于： 所述的培养的条件为37± 1 °C，160±30r/min，培养20±2h; 所述的保护剂与菌液的体积比为1: (1~1. 5); 所述的继续培养的条件为37 ± 1 °C，160 ± 30r/min，继续培养4~6h。9. 权利要求1~8任一项所述的禽类微生态制剂在制备防治禽类空肠弯曲杆菌病、禽 类沙门氏菌病或禽类大肠杆菌病的产品中的应用。10. 权利要求1~8任一项所述的禽类微生态制剂在制备改善肠道菌群生态平衡，增强 免疫功能，促进生长并防治腹泻疾病产品中的应用。
【专利摘要】本发明公开一种禽类微生态制剂及其制备方法与应用。本发明的禽类微生态制剂包括唾液乳杆菌Scgz-11菌粉、唾液乳杆菌SCL87菌粉、Lactobacillus？ingluviei？SCGZ-9菌粉；所选菌株是从健康鸡群分离出来的菌株，经过多重检查筛选，证明其安全可靠且稳定。本发明的禽类微生态制剂制作工艺无杂菌污染，活菌数高，保存期长，耐胃酸且具有肠溶性和水溶性，可拌料和拌水饲喂，方便可行；具有高效防治禽类空肠弯曲杆菌病、禽类沙门氏菌病或禽类大肠杆菌病的作用；还具有改善禽类肠道菌群生态平衡，增强免疫功能，促进生长、提高饲料利用率并防治腹泻疾病的作用。对保障食品安全和人类健康具有重要意义。
【IPC分类】A23K10/18, A61P31/04, A23K50/75, A61K35/747, C12R1/225, C12N1/20, A61P1/12
【公开号】CN105331559
【申请号】CN201510835257
【发明人】罗开健, 王媚, 张建民, 黄玉梅, 万红, 张宗尧, 聂荷敏, 刘哲
【申请人】华南农业大学
【公开日】2016年2月17日
【申请日】2015年11月26日