一株富铁产朊假丝酵母菌株及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及一株富铁产航假丝酵母菌株及其应用，属于微生物发酵工业技术领 域。
【背景技术】
[0002] 铁是人和动物维持生命和发育的必需营养物质，是构成血红素、肌红蛋白、细胞色 素等的重要成分，参与体内氧的运送和组织呼吸过程W及一系列新陈代谢反应，并具有增 强免疫的功能。膳食中铁的缺乏会引起贫血，免疫功能低下，并诱发多种疾病，例如贫血性 屯、脏病、舌炎、口角炎及各种感染性疾病和癌症等。仔猪贫血症也是由于缺铁引起的一种W 血红蛋白含量降低、红细胞数减少、皮肤粘膜苍白及生长受阻为特征的疾病，是严重危害周 龄哺乳仔猪的一种微量元素缺乏症。
[0003] 微量元素铁一般W无机盐形态补充，但由于铁离子对粘膜的刺激、胃肠道副作用 较大且吸收率低等原因限制了其使用。研究低毒高效补铁剂一直是开发的方向。利用生物 转化法，将无机状态的铁转化成有机状态的铁，可W提高生物体对铁的利用率，是开发新型 铁源，提高铁的利用率的主要措施。
[0004] 近年来，用微生物、特别是用酵母菌为载体富集人及动物所必需的微量元素W求 有机形态、制造成本较低廉而富有多种营养的微量元素产品已引起人们的关注。富铁酵母 是W酵母为载体，将无机铁转化为有机铁的发酵产品。已有实验表明，富铁酵母具有较高的 生物利用率。食用富铁酵母安全性好，除含有高含量高吸收率的铁元素外，还可提供相当数 量的蛋白、必需氨基酸及丰富的维生素、甘露寡糖及一些重要的营养辅助因子等。W高铁食 用酵母作为强化食品及饲料的铁源是预防铁缺乏和缺铁性贫血的一项行之有效的措施。 阳〇化]现有的富铁酵母产品多是由随机得到的酵母菌种进行发酵生产富铁酵母，对酵母 菌种缺少系统的筛选和育种过程。因此，酵母菌种的遗传稳定性差，不同酵母菌种对铁的抗 性和富集效果差异较大，产品缺乏稳定性，不利于实现工业化生产。
[0006] 产航假丝酵母又名食用圆酵母，其蛋白质和维生素B的含量都比啤酒酵母高，在 培养基中无需加入任何生长因子即可生长。目前，对于产航假丝酵母的研究主要集中于其 富砸、富含活性肤和乙硫氨酸抗性等方面，而对于产航假丝酵母的富铁特性尚未见报道。
【发明内容】
[0007] 针对上述现有技术，本发明的目的是提供一株富铁产航假丝酵母菌株及其应用。
[0008] 为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：
[0009] 一株富铁产航假丝酵母菌株，其为产航假丝酵母（Candidautilis)BLCC4-0021， 已于2015年10月16日保藏于位于中国武汉市武汉大学的中国典型培养物保藏中屯、，其保 藏编号为CCTCCN0:M2015611。
[0010] 上述产航假丝酵母化CC4-0021在生产富铁酵母产品中的应用也是本发明保护的 范围。
[0011] 本发明的另一目的是提供一种富铁酵母产品，其活性成分为上述产航假丝酵母 化CC4-0021或其发酵产物。
[0012] 本发明中所述的发酵产物是指W产航假丝酵母为载体，将无机铁转化为有机铁的 发酵产品，即富铁酵母。
[0013] 上述富铁酵母产品中，所述产航假丝酵母化CC4-0021的发酵产物按照如下方法 制备：在含无机铁的发酵培养基中发酵上述产航假丝酵母化CC4-0021，得到发酵产物。
[0014] 所述含无机铁的发酵培养基中的无机铁选自硫酸亚铁、硝酸铁、Ξ氯化铁、硫酸铁 锭或硫酸铁；优选为硫酸亚铁。
[0015] 所述无机铁在所述含无机铁的发酵培养基中的浓度为400-1200μg/mL;优选为 400μg/血。
[0016] 上述方法中，发酵的溫度为23~28°C，发酵的时间为20~2地，发酵培养基的初 始抑为4.0~6.0。
[0017] 上述方法中，在所述发酵前，还包括如下步骤：
[0018] 将产航假丝酵母化CC4-0021的斜面种子接种在灭菌后的种子培养基中，在 28-32°C摇床（180巧m)振荡培养14-1化，得到液体种子液。
[0019] 所述种子培养基的组成为：酵母膏5g，蛋白腺lOg，葡萄糖20g，KH2P〇42g，蒸馈水 1000血。
[0020] 上述的富铁酵母产品在作为饲料添加剂和/或食品营养强化剂中的应用也是本 发明的保护范围。
[0021] 本发明的第Ξ个目的是提供一种预防保育猪缺铁性贫血的微生态制剂。
[0022] 该微生态制剂是由产航假丝酵母化CC4-0021的发酵产物8-12份、硫酸亚铁8-12 份、氯化钻0. 04-0. 08份、硫酸铜0. 6-1. 0份、VBi2〇. 2-0. 4份、Vc8-12份、巧樣酸8-12份、 载体55-65份和乳酸菌复配而成；
[0023] 复配后的微生态制剂中，乳酸菌的活菌数大于或等于108c化/g。
[0024] 所述载体为玉米淀粉和石粉中的任一种或二者的混合物。
[00巧]优选的，所述乳酸菌为植物乳杆菌LP化actobacillusplantarum)，已于2010年 06月21日保藏于中国典型培养物保藏中屯、，其保藏编号为：CCTCCΜ2010150;记载在申请 人的另一项专利"一株可用于生物防腐保鲜的乳酸菌及其应用"（CN101914475Β)中。 [00%] 优选的，所述微生态制剂由产航假丝酵母化CC4-0021的发酵产物10份、硫酸亚铁 10份、氯化钻0.06份、硫酸铜0.8份、VBi2〇. 3份、Vc10份、巧樣酸10份、载体60份和乳酸 菌复配而成；
[0027] 复配后的微生态制剂中，乳酸菌的活菌数为5X108c化/邑。
[0028] 载体为玉米淀粉和石粉的混合物，淀粉和石粉的质量比为7:3。
[0029] 本发明的有益效果：
[0030] (1)本发明利用紫外诱变的方法选育出一株新的产航假丝酵母化CC4-0021，该菌 株具有高浓度无机铁耐受性，在进行高生物量发酵的同时还具有较高的转铁富铁能力，该 菌株为高效富铁的酵母菌株，可W用来制备富铁酵母产品。
[0031] (2)本发明的菌株发酵生产富铁产品的原料来源广泛、操作简便、发酵周期短，而 且酵母中有机铁含量高，其对于饲料添加方面，安全无毒，对预防仔猪贫血及促生长作用均 极明显，且改善了母猪的繁殖性能，提高了母猪初乳中铁含量，通过给母猪补铁间接给仔猪 补铁，既避免仔猪应激，又利于环境保护。
【附图说明】
[0032] 图1:富铁产航假丝酵母生长曲线；
[0033] 图2:铁富集曲线；
[0034] 图3:各试验组仔猪照片。
【具体实施方式】
[0035] 结合实施例对本发明作进一步的说明，应该说明的是，下述说明仅是为了解释本 发明，并不对其内容进行限定。
[0036] 实施例1:菌株的紫外诱变筛选
[0037] 1材料与方法
[0038] 1. 1试验设备：UV2000分光光度计、离屯、机、超净工作台、恒溫培养箱、振荡培养箱 等。
[0039] 1. 2试验材料
[0040]1. 2. 1菌种
[0041] 产航假丝酵母（Candidautilis)，山东宝来利来生物工程股份有限公司生物研究 院保臧。
[0042] 1. 2. 2试剂
[0043] 硫酸亚铁、盐酸径胺、邻二氮菲、醋酸钢，均是分析纯。
[0044]1. 2. 3培养基配方
[0045] 斜面保存培养基：酵母膏5g，蛋白腺lOg，葡萄糖20g，KH2P〇42g，琼脂15g，蒸馈水 1000血。
[0046] 种子培养基：酵母膏5g，蛋白腺lOg，葡萄糖20g，KH2P〇42g，蒸馈水lOOOmL。
[0047] 液体发酵培养基：同种子培养基。
[0048]1. 3方法